참다래 동결건조물을 2.5%, 5% 농도로 사료와 혼합하여 실험동물에 투여하고 실험 5일간 loperamide(2 mg/kg/day, s.c.)로 변비를 유도하여 참다래의 변비치료 및 예방 효과를 측정하였다. Lopermide를 단독 투여한 군은 정상대조군과 비교하여 변의 개수 및 중량이 유의적으로 감소하였으며 원위 결장 내 변 잔류의 증가 및 cecocolonic segment의 무게가 증가하였다. 참다래 동결건조물 및 loperamide를 투여한 군은 loperamide를 단독 투여한 군과 비교하여 변의 개수 및 중량이 유의적으로 증가하였으며 원위 결장 내 잔류 변 및 cecocolonic segment의 무게도 감소하였다. 이러한 결과는 참다래가 in vivo에서 변비 개선 효과가 있음을 보여준다. 변의 수분 함량에서도 loperamide로 변비를 유발시킨 군에서 감소하는 경향을 보였고 참다래 동결건조물 투여군에서 농도 의존적으로 증가하는 것을 확인 할 수 있었다. 조직학적 검사에서도 참다래 동결건조물 투여군의 원위 대장관에서 crypt cell내 점액의 증가와 장관내 분변의 점액질의 증가도 관찰되었다. In vitro 실험결과, 회장 적출 절편에서 참다래 동결건조물(2.5 mg/ml)을 전 처리 시 loperamide에 의한 장력과 진폭 억제가 부분적으로 차단되었으며 이러한 결과는 참다래 동결건조물의 변비 개선효과가 장의 운동성 촉진과 대장관 내 점액분비 증가에 의한 대장관 내용물의 이동성증가와 관련이 있음을 시사한다.
Background/Aims MicroRNAs (miRNAs) were reported to be responsible for intestinal permeability in diarrhea-predominant irritable bowel syndrome (IBS-D) rats in our previous study. However, whether and how miRNAs regulate visceral hypersensitivity in IBS-D remains largely unknown. Methods We established the IBS-D rat model and evaluated it using the nociceptive visceral hypersensitivity test, myeloperoxidase activity assay, restraint stress-induced defecation, and electromyographic (EMG) activity. The distal colon was subjected to miRNA microarray analysis followed by isolation and culture of colonic epithelial cells (CECs). Bioinformatic analysis and further experiments, including dual luciferase assays, quantitative real-time polymerase chain reaction, western blot, and enzyme-linked immunosorbent assay, were used to detect the expression of miRNAs and how it regulates visceral hypersensitivity in IBS-D rats. Results The IBS-D rat model was successfully established. A total of 24 miRNAs were differentially expressed in the distal colon of IBS-D rats; 9 were upregulated and 15 were downregulated. Among them, the most significant upregulation was miR-200a, accompanied by downregulation of cannabinoid receptor 1 (CNR1) and serotonin transporter (SERT). MiR-200a mimic markedly inhibited the expression of CNR1/SERT. Bioinformatic analysis and luciferase assay confirmed that CNR1/SERT are direct targets of miR-200a. Rescue experiments that overexpressed CNR1/SERT significantly abolished the inhibitory effect of miR-200a on the IBS-D rats CECs. Conclusions This study suggests that miR-200a could induce visceral hyperalgesia by targeting the downregulation of CNR1 and SERT, aggravating or leading to the development and progression of IBS-D. MiR-200a may be a regulator of visceral hypersensitivity, which provides potential targets for the treatment of IBS-D.
Loperamide에 의한 변비는 위 배출, 소장 및 대장 운동성을 감소시켰으며, 과채복합추출물(Fruit and vegetable complex extracts, FVCE)은 이러한 효과를 예방한다. 우리는 다음과 같은 실험에서 로페로마이드(3mg/kg, sc, 14일)로 유발된 변비 수컷 Sprague-Dawley 쥐에 대한 프락토올리고당 및 과채복합추출물의 효과를 조사하였다. 쥐를 무작위로 정상대조군 쥐(일반식이), 변비 쥐(일반식이 + 로페로마이드), 200mg FVCE(200mg/kg/day FVCE + 로페로마이드가 보충된 일반 식이)로 처리한 변비 쥐, 400mg FVCE로 처리한 변비 쥐(200mg/kg/day FVCE와 로페로마이드가 보충된 일반 식단)으로 시험군을 구성하였다. 대조군 쥐에 비해 로페로마이드로 처리된 쥐에서 대변 배설량이 적고 대변 수분 함량이 더 낮았다. FVCE을 경구투여 하면 분변배설량의 감소를 억제하고 로페로마이드로 처리된 쥐의 대변 수분 함량. 로페로마이드를 처리한 쥐에서는 대장선와세포의 점액 생성과 대변 및 점막표면의 점액 함량이 감소하였다. 그러나 FVCE 처리군에서는 대장선와세포의 뮤신 함량이 증가하였고, Aclain blue로 염색된 점액층은 로페로마이드 처리군에 비해 FVCE 처리군에서 유의적으로 두꺼워졌다. 쥐 회장에서 로페로마이드는 회장 운동성을 억제한다. 이러한 결과는 FVCE가 로페로마이드에 의한 대장 연동 운동 억제 완화에 효과적이며 FVCE추출물이 변비 예방에 효과적 일 수 있다는 것을 나타낸다.
Kim, Ji Hyun;Nam, Seung-Joo;Park, Sung Chul;Lee, Sang Hoon;Kim, Tae Suk;Lee, Minjong;Park, Jin Myung;Choi, Dae Hee;Kang, Chang Don;Lee, Sung Joon;Ryu, Young Joon;Lee, Kyungyul;Park, So Young
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제24권2호
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pp.185-191
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2020
Interstitial cells of Cajal (ICC) are known as the pacemaker cells of gastrointestinal tract, and it has been reported that acute gastroenteritis induces intestinal dysmotility through antibody to vinculin, a cytoskeletal protein in gut, resulting in small intestinal bacterial overgrowth, so that anti-vinculin antibody can be used as a biomarker for irritable bowel syndrome. This study aimed to determine correlation between serum anti-vinculin antibody and ICC density in human stomach. Gastric specimens from 45 patients with gastric cancer who received gastric surgery at Kangwon National University Hospital from 2013 to 2017 were used. ICC in inner circular muscle, and myenteric plexus were counted. Corresponding patient's blood samples were used to determine the amount of anti-vinculin antibody by enzyme-linked immunosorbent assay. Analysis was done to determine correlation between anti-vinculin antibody and ICC numbers. Patients with elevated anti-vinculin antibody titer (above median value) had significantly lower number of ICC in inner circular muscle (71.0 vs. 240.5, p = 0.047), and myenteric plexus (12.0 vs. 68.5, p < 0.01) compared to patients with lower anti-vinculin antibody titer. Level of serum anti-vinculin antibody correlated significantly with density of ICC in myenteric plexus (r = -0.379, p = 0.01; Spearman correlation). Increased level of circulating anti-vinculin antibody was significantly correlated with decreased density of ICC in myenteric plexus of human stomach.
산통은 이환률과 치명률이 높아 말 산업에 가장 우려되는 질병이다. 많은 나라에는 산통마의 내과적, 외과적 치료에 따른 치명률과 예후인자 평가를 위한 연구 결과가 있지만 한국에서는 산통의 예후 판단을 위한 객관적 연구가 이루어지지 않았다. 본 논문에서 한국 산통마의 치명률을 확인하고, 잠재적 예후 인자들을 평가를 하고자 하였다. 2011년 1월부터 2013년 12월까지 한국마사회에 내원한 119마리의 산통마를 대상으로 조사하였다. 유의성을 평가하기 위하여 카이제곱검정, T-test와 Mann-Whitney test를 사용하였다. 그 결과, 전체 치명률은 15%였으며 내원한 산통마 중 78%가 내과적 치료를 받았다. 개체적 인자인 성별, 나이, 내원 시기는 예후와 유의성은 없었으나 3세 이하 (59%)의 수컷 (50%)에서 발생률이 높았다. 탈수의 대표적 지표인 구강점막의 색깔과 PCV는 생존집단과 폐사집단사이에 유의적인 차이를 보였다. 그 외 신체적 인자인 심박수, 장운동성 그리고 직장온도도 예후와 유의적으로 관련이 있었다. 임상병리인자 중에는 적혈구수, 혈색소농도, 충진세포용적, 혈소판수, 크레아틴키나아제(CK), 젖산탈수소효소(LDH), 혈당치가 산통의 예후인자로서 통계적으로 유의성이 있음을 확인하였다.
The entry of antipyrine and urea from the peritoneal cavity of rabbit into organ tissue and blood plasma was studied. Two hundred mg of antipyrine plus 300 mg of urea in 10 ml Ringer's solution was injected into the peritoneal cavity of anesthetized rabbit. The injection was made from above of a rabbit kept tying right side down and it enabled part of the abdominal organs (liver, intestine, kidney) was immersed in the injected solution and kept high concentration gradient throughout the experimental period. The remaining part of the organs was revered only by a thin film of the test solution. Subsequently, in this part of the organs the concentration gradient of the diffusible substances during entry was presumed to decrease as time elapsed. Four pieces of the liver tissue were taken namely, the right superficial, right deep, left superficial and left deep portions. Two were taken from the small intestine, one from the portion which was immersed in. the fluid and the other from that above the fluid mass. Both kidneys were separately analyzed. As a remote organ the gastrocnemius muscle was taken from the right leg of the animal. The intervals which were the time periods elapsed after injections were 5,7,10,15 or 30 minutes. At each point 5 animals were sacrificed and the concentrations of the test substances in the tissue water were measured. The results obtained were as follows. 1. In the liver the right portion which was immersed in the fluid showed higher concentration if the test substances than the left portion and the superficial region exceeded the deep region. The concentrations diminished as the time elapsed after infusion, particulary in the case of antipyrine, suggesting circulatory removal of the substances. In urea such decreasing tendency of the concentration was not obvious, and suggested slower removal rate of it as compared with that of antipyrine. 2. In the small intestine there was no regional difference in the concentration of the test substances. Because of the intestinal motility different portions of the intestine were seemed to have bathed in the fluid of the same concentration. In general the concentrations in the intestinal wall exceeded those of the liver, suggesting a slower removal rate than in the latter. 3. In the kidney the accumulation of the endogenous urea was predominant, and the accumulating mechanism in the renal tissue went on during the period of the experiment. Therefore it revealed increasing tendencies as the time elapsed. The penetration of the test substances in this organ from the peritoneal cavity seemed to be slower than in other abdominal organs, namely liver or small intestine. Part of the test substances in the kidney were obviously brought by the blood stream. 4. Rapid exponential decay of the concentration of antipyrine and of the osmolality of the peritoneal fluid was attributed to the extensive removal through the whole dimension of the peritoneal surface, and the remote organ such as the gastrocnemius muscle attained a fairly close value to that of the abdominal organs in less than 30 minutes. The factors which related to the absorption rate were discussed. They were the concentration gradient, permeability and the regional perfusion rate.
Objectives : The purpose of this study was to examine the effects of herbal medicines on pacemaker potentials of large intestinal interstitial Cells of Cajal (ICC) in mice. Methods : We made the ICC culture in large intestine in mice and used the electrophysiological method to record pacemaker potentials. Also we used MTT assay to check cell viability and examined the ICC protein expression by western blot. Results : 1.Glycyrrhiza uralensis Fischer (GF) (50-150 ㎍/ml) induced pacemaker depolarization and decreased frequency with concentration-dependent manners. EC50 is 58.95 ㎍/ml. Angelica gigas (AG) (50-200 ㎍/ml) induced pacemaker depolarization and decreased frequency with concentration-dependent manners. EC50 is 77.22 ㎍/ml. Poncirus fructus (PF) (10-100 ㎍/ml) induced pacemaker depolarization and decreased frequency with concentration-dependent manners. EC50 is 13.39 ㎍/ml. Citrus unshiu S. Marcov. (CU) (10-500 ㎍/ml) induced pacemaker depolarization and decreased frequency with concentration-dependent manners. EC50 is 139.80 ㎍/ml. Gardenia jasminoides J. Ellis (GJ) (100-500 ㎍/ml) induced pacemaker depolarization and decreased frequency with concentration-dependent manners. EC50 is 78.70 ㎍/ml. Coptis chinensis (CC) (100-1000 ㎍/ml) induced pacemaker depolarization and decreased frequency with concentration-dependent manners. EC50 is 138.10 ㎍/ml. Scutellaria baicalensis (SB) (10-100 ㎍/ml) had no effects on pacemaker potentials and decreased frequency with concentration-dependent manners. IC50 is 18.34 ㎍/ml. Atractylodes macrocephala koidzumi (AM) (10-100 ㎍/ml) induced pacemaker hyperpolarizations and decreased frequency with concentration-dependent manners. IC50 is 18.54 ㎍/ml. 2. PF, SB and AM had no effects on cell death in large ICC. 3. PF increased the ANO1 and c-kit protein expression and SB and AM increased the c-kit protein expression in large ICC. Conclusions : These results suggest that PF, SB, and AM are likely to be the optimal combination of herbal medicines that can be used to treat diseases such as gastrointestinal motility disorders such as irritable bowel syndrome.
Kim, Jung Nam;Song, Ho Jun;Lim, Bora;Kwon, Young Kyu;Kim, Byung Joo
대한약침학회지
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제16권1호
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pp.43-49
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2013
Objective: Pyungwi-san (PWS) plays a role in a number of physiologic and pharmacologic functions in many organs. Interstitial cells of Cajal (ICCs) are pacemaker cells that generate slow waves in the gastrointestinal (GI) tract. We aimed to investigate the beneficial effects of PWS in mouse small-intestinal ICCs. Methods: Enzymatic digestion was used to dissociate ICCs from the small intestine of a mouse. The whole-cell patch-clamp configuration was used to record membrane potentials from the cultured ICCs. Results: ICCs generated pacemaker potentials in the GI tract. PWS produced membrane depolarization in the current clamp mode. Pretreatment with a $Ca^{2+}$-free solution and a thapsigargin, a $Ca^{2+}$-ATPase, inhibitor in the endoplasmic reticulum, eliminated the generation of pacemaker potentials. However, only when the thapsigargin was applied in a bath solution, the membrane depolarization was not produced by PWS. Furthermore, the membrane depolarizations due to PWS were inhibited not by U-73122, an active phospholipase C inhibitor, but by chelerythrine and calphostin C, protein kinase C inhibitors. Conclusions: These results suggest that PWS might affect GI motility by modulating the pacemaker activity in the ICCs.
This study was carried out to investigate the necrotic enteritis of chicken in Korea. Epidemiological, pathological and microbiological examination were done on 12 naturally occurred cases of necrotic enteritis of chicken. And the susceptibility of isolated bacteria to antimicrobial agents was also examined. The results obtained were as follows; 1. The Clostridium perfringens infection, necrotic enteritis of chicken, occurred in the chickens mainly raised in floor pens. Necrotic enteritis of chicken was occurred coincidently with coccidiosis and Gumboro disease frequently. And several cases were recurred at 2-3 weeks after recovery. 2. Clinical signs of the infected chickens were depression, decreased appetite, reluctance to move, diarrhea, ruffled feathers and acute death within several hours. 3. The characteristic biochemical properties of isolates were 2-band hemolysis, no motility, positive reaction of reverse CAMP test and the formation of LV precipitate in egg yolk medium. 4. Gross lesions of the infected chickens were distention of intestine with gas, thickened mucosa and formation of thick pseudomembrane in intestine. Livers were friable with yellowish brown color and, in some case, showed demarcated necrotic foci. 5. Histopathological findings of the infected chickens were severe necrosis of the intestinal mucosa and attachment of numerous large bacilli to the mucosal surface of necrotic villi. In liver, necrosis of liver tissue and numerous large bacilli in the necrotic foci were also observed. 6. In susceptibility test to antimicrobial agents, 12 isolates of Clostridium perfringens were highly sensitive to ampicillin, baytril, cephalothin and penicillin.
In this study, we propose that diprophylline exerts bidirectional modulation (BM) on the isolated rat jejunal segment depending on its contractile state. The results supported the hypothesis. Diprophylline ($20{\mu}M$) exerted stimulatory effects on the contractility of jejunal segment in six low contractile states while inhibitory effects in six high contractile states, showing the characteristics of BM. Diprophylline-induced stimulatory effect was significantly blocked by atropine, indicating the correlation with cholinergic activation. Diprophylline-induced inhibitory effect was partially blocked by phentolamine, propranolol, and L-N-Nitro-Arginine respectively, indicating their correlation with sympathetic activation and nitric oxide-mediated relaxing mechanisms. Diprophylline-induced BM was abolished by tetrodotoxin or in a $Ca^{2+}$ free condition or pretreated with tyrosine kinase inhibitor imatinib, suggesting that diprophylline-induced BM is $Ca^{2+}$ dependent, and that it requires the presence of enteric nervous system as well as pacemaker activity of interstitial cells of Cajal. Diprophylline significantly increased the reduced MLCK expression and myosin extent in constipation-prominent rats and significantly decreased the increased MLCK expression and myosin extent in diarrhea-prominent rats, suggesting that the change of MLCK expression may also be involved in diprophylline-induced BM on rat jejunal contractility. In summary, diprophylline-exerted BM depends on the contractile states of the jejunal segments, requires the presence of $Ca^{2+}$, enteric nervous system, pacemaker activity of interstitial cells of Cajal, and MLCK-correlated myosin phosphorylation. The results suggest the potential implication of diprophylline in relieving alternative hypo/hyper intestinal motility.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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