Background: TIAM2, a Rac guanine nucleotide exchange factor, is closely associated with cell adherence and migration. Here, we aimed to investigate the role of TIAM2 in non-small cell lung cancer (NSCLC) cells. Materials and Methods: A small interference RNA (siRNA) was introduced to silence the expression of TIAM2. Invasion and motility assays were then performed to assess the invasion and motility potential of NSCLC cells. GST-pull down assays were used to detect activation of Rac1. Results: TIAM2 was highly expressed in NSCLC cells. Knockdown of TIAM2 inhibited the invasion and motility, and suppressed activation of Rac1. Further experiments demonstrated that knockdown of TIAM2 could up-regulate the expression of E-cadherin, and down-regulate the expression of MMP-3, Twist and Snail. Conclusions: Our data suggest that TIAM2 can promote invasion and motility of NSCLC cells. Activation of Rac1 and regulation of some EMT/invasion-related genes may be involved in the underlying processes.
Objectives: To investigate whether hypoxia has an effect on regulation of multidrug resistance (MDR) to chemotherapeutic drugs in laryngeal carcinoma cells and explore the role of hypoxia-inducible factor-$1{\alpha}$ (HIF-$1{\alpha}$). Methods: Laryngeal cancer cells were cultured under normoxic and hypoxic conditions. The sensitivity of the cells to multiple drugs and levels of apoptosis induced by paclitaxel were determined by MTT assay and annexin-V/propidium iodide staining analysis, respectively. HIF-$1{\alpha}$ expression was blocked by RNA interference. The expression of HIF-$1{\alpha}$ gene was detected by real-time quantitative RT-PCR and Western blotting. The value of fluorescence intensity of intracellular adriamycin accumulation and retention in cells was evaluated by flow cytometry. Results: The sensitivity to multiple chemotherapy agents and induction of apoptosis by paclitaxel could be reduced by hypoxia (P<0.05). A the same time, the adriamycin releasing index of cells was increased (P<0.05). However, resistance acquisition subject to hypoxia in vitro was suppressed by down-regulating HIF-$1{\alpha}$ expression. Conclusion: HIF-$1{\alpha}$ could be considered as a key regulator for mediating hypoxia-induced MDR in laryngeal cancer cells via inhibition of drug-induced apoptosis and decrease in intracellular drug accumulation.
Dicer, an ribonuclease type III type endonuclease, is the key enzyme involved in biogenesis of microRNAs (miRNAs) and small interfering RNAs (siRNAs), and thus plays a critical role in RNA interference through post transcriptional regulation of gene expression. This enzyme has not been well studied in the Indian water buffalo, an important species known for disease resistance and high milk production. In this study, the primary coding sequence (5,778 bp) of bubaline dicer (GenBank: AB969677.1) was determined and the bubaline Dicer1 biocomputationally characterized to determine the phylogenetic signature among higher eukaryotes. The evolutionary tree revealed that all the transcript variants of Dicer1 belonging to a specific species were within the same node and the sequences belonging to primates, rodents and lagomorphs, avians and reptiles formed independent clusters. The bubaline dicer1 is closely related to that of cattle and other ruminants and significantly divergent from dicer of lower species such as tapeworm, sea urchin and fruit fly. Evolutionary divergence analysis conducted using MEGA6 software indicated that dicer has undergone purifying selection over the time. Seventeen divergent sequences, representing each of the families/taxa were selected to study the specific regions of positive vis-$\grave{a}$-vis negative selection using different models like single likelihood ancestor counting, fixed effects likelihood, and random effects likelihood of Datamonkey server. Comparative analysis of the domain structure revealed that Dicer1 is conserved across mammalian species while variation both in terms of length of Dicer enzyme and presence or absence of domain is evident in the lower organisms.
Kim, Hyun-Jung;Lee, Hyun-Seo;Kim, Eun-Young;Lee, Kyung-Ah
한국발생생물학회지:발생과생식
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제16권1호
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pp.59-67
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2012
Previously, we found that $Zap70$ (Zeta-chain-associated protein kinase) expressed in the mouse oocytes and played significant role in completion of meiosis specifically at MI-MII (metaphase I-II) transition. Microinjection of $Zap70$ dsRNA into the cytoplasm of germinal vesicle oocyte resulted in MI arrest, and exhibited abnormalities in their spindles and chromosome configurations. The purpose of this study was to determine the mechanisms of action of $Zap70$ in oocyte maturation by evaluating downstream signal networking after $Zap70$ RNAi (RNA interference). The probe hybridization and data analysis were used by Affymetrix Gene Chip Mouse Genome 430 2.0 array and GenPlex 3.0 (ISTECH, Korea) software, respectively. Total 1,152 genes were up (n=366) and down (n=786) regulated after $Zap70$ RNAi. Among those genes changed, we confirmed the expressional changes of the genes involved in the regulation of actin cytoskeleton and MAPK (mitogen-activated protein kinase) signaling pathway, since the phenotypes of $Zap70$ RNAi in oocytes were found in the changes in the chromosome separation and spindle structures. We confirmed the changes in gene expression in the actin skeletal system as well as in the MAPK signaling pathway, and concluded that these changes are main cause of the aberrant chromosome arrangement and abnormal spindles after $Zap70$ RNAi.
주파수 부족 및 비효율적 활용을 완화시키기 위해 제안된 무선인지시스템은 기존의 1차 사용자에게 대한 간섭을 주지 않도록 하면서 유휴주파수를 사용하게 하는 기술로서 최근 주목받고 있는 차세대 이동통신 시스템이다. 최근 FCC는 실질적으로 TV대역에 무선인지 시스템을 적용하도록 하면서 관련된 규정을 개정하였고 TV대역의 유휴주파수에 대하여 고정기기 및 개인 휴대기기에 대한사용을 허가하도록 방침을 정하였으며 2009년 DTV로 전환 완료 이후 해당 기기들의 사용은 본격화 될 것이다 무선인지 시스템의 기본 방침안 면허 사용자에 대한 보호를 위하여 TV대역사용에서의 우선순위가 가장 높은 신호인 TV 및 무선마이크에 대한 보호가 이루어져야하는데 이를 위해 정확한 1차 사용자에 대한 검출,즉 TV대역의 1차 사용자인 DTV에 대한 정확한 스펙트럼 센싱이 이루어져야 한다. 본 논문에서는 스펙트럼 센싱 성능이 우수한 파일릿 센성을 이용하여 DTV신호를 검출하도록 하였고 DTV신호검출의 신뢰성 향상을 위하여 협력 센싱기반의 파일릿 센싱을 수행하여 DTV신호의 검출 확률의 정확성 및 신뢰성을 높이도록 하였다. 또한 각 단일 센싱 결과를 취합하여 판단하는 과정에서 효율적인 판단을 위해 다수의결법을 제안한다.
Ri, Hwajung;Lee, Jongbin;Sonn, Jun Young;Yoo, Eunseok;Lim, Chunghun;Choe, Joonho
Molecules and Cells
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제42권4호
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pp.301-312
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2019
Post-transcriptional regulation underlies the circadian control of gene expression and animal behaviors. However, the role of mRNA surveillance via the nonsense-mediated mRNA decay (NMD) pathway in circadian rhythms remains elusive. Here, we report that Drosophila NMD pathway acts in a subset of circadian pacemaker neurons to maintain robust 24 h rhythms of free-running locomotor activity. RNA interference-mediated depletion of key NMD factors in timeless-expressing clock cells decreased the amplitude of circadian locomotor behaviors. Transgenic manipulation of the NMD pathway in clock neurons expressing a neuropeptide PIGMENT-DISPERSING FACTOR (PDF) was sufficient to dampen or lengthen free-running locomotor rhythms. Confocal imaging of a transgenic NMD reporter revealed that arrhythmic Clock mutants exhibited stronger NMD activity in PDF-expressing neurons than wild-type. We further found that hypomorphic mutations in Suppressor with morphogenetic effect on genitalia 5 (Smg5) or Smg6 impaired circadian behaviors. These NMD mutants normally developed PDF-expressing clock neurons and displayed daily oscillations in the transcript levels of core clock genes. By contrast, the loss of Smg5 or Smg6 function affected the relative transcript levels of cAMP response element-binding protein B (CrebB) in an isoform-specific manner. Moreover, the overexpression of a transcriptional repressor form of CrebB rescued free-running locomotor rhythms in Smg5-depleted flies. These data demonstrate that CrebB is a rate-limiting substrate of the genetic NMD pathway important for the behavioral output of circadian clocks in Drosophila.
동양달팽이의 EST 에서 serpin 유전자는 2가지 type이 추정되었다. Ns-serpin type 1 (partial) 서열의 코딩 영역은 총 819 bp 이었으며, 272개의 아미노산으로 이루어져 있었으며, Ns-serpin type 2 (partial) 의 코딩영역은 총 555 bp, 185개의 아미노산으로 이루어져 있었다. Laminarin 처리 전에는 Ns-serpin type 1이 2개 발현되었으며 처리 후에는 Ns-serpin type 2가 1개 발현되고 있었다. BLAST 결과를 바탕으로 유사도가 높은 17개의 참고 서열과 동양달팽이의 Ns-serpin type 1, 2의 아미노산 서열을 MEGA6 프로그램의 clustalW 엔진을 이용하여 multiple sequence alignment 를 수행한 결과, 척색동물의 포유강 9종, 조류강 1종, 양서강 1종과 척색동물인 해초강, 절지동물의 거미강 1종과 곤충강 1종이 같은 군으로 묶였으며, 연체동물문의 경우 동양달팽이의 두 가지 type 을 포함한 복족강 4종이 같은 군으로 묶이는 것을 확인하였다. Psipred 프로그램을 활용하여 예측한 2D 구조도 multiple align 및 phylodendrogram 결과와 연관이 있음을 확인할 수 있었다. EST를 통해 밝힌 동양달팽이의 두 가지 type의 Ns-serpin 서열은 Aplysia californica 등의 근연종들의 서열과 유사하였다. 본 연구에서는 무척추동물에서의 선천성 면역과 연관이 있는 것으로 잘 알려진 두 종류의 serpin 유전자 서열을 동양달팽이 EST 결과에서 발굴 하였으며, 동양달팽이에서도 여러 가지 type의 serpin 이 존재 할 수 있음을 입증하였다.
Background: GC-binding factor 2 (GCF2) is a transcriptional regulator that represses transcriptional activity of the epidermal growth factor receptor (EGFR) by binding to a specific GC-rich sequence in the EGFR gene promoter. In addition to this function, GCF2 has also been identified as a tumor-associated antigen and regarded as a potentially valuable serum biomarker for early human hepatocellular carcinoma (HCC) diagnosis. GCF2 is high expressed in most HCC tissues and cell lines including HepG2. This study focused on the influence of GCF2 on cell proliferation and apoptosis in HepG2 cells. Materials and Methods: GCF2 expression at both mRNA and protein levels in HepG2 cells was detected with reverse transcription (RT) PCR and Western blotting, respectively. RNA interference (RNAi) technology was used to knock down GCF2 mRNA and protein expression. Afterwards, cell viability was analyzed with a Cell Counting Kit-8 (CCK-8), and cell apoptosis and caspase 3 activity by flow cytometry and with a Caspase 3 Activity Kit, respectively. Results: Specific down-regulation of GCF2 expression caused cell growth inhibition, and increased apoptosis and caspase 3 activity in HepG2 cells. Conclusions: These primary results suggest that GCF2 may influence cell proliferation and apoptosis in HepG2 cells, and also provides a molecular basis for further investigation into the possible mechanism at proliferation and apoptosis in HCC.
현재 서울 및 대부분의 광역도시에서 운영 중인 전동차는 출퇴근시 높은 혼잡도로 인해 열차 운행시간이 상습적으로 지연되고 있는 실정이다. 그 중 정차역에서 승객들의 승하차 시간에 따른 지연 효과도 큰 영향을 미친다. 이번 연구에서는 승객 승하차 시간을 단축시킴으로써 도시철도의 표정속도를 향상시킬 수 있는 방안으로 광폭 출입문 시스템 개발을 수행하였다. 먼저 광폭 출입문의 폭을 정의하기 위해 시험을 통하여 크기별 시간 단축 효과를 확인하고, 주변 기기와의 간섭 효과를 고려하여 열차의 정위치 정차 성능 향상을 조건으로 최적 사이즈를 정의하였다. 그리고 출입문 크기의 변경으로 인한 차량구체의 구조 특성이 바뀌게 되므로 구조 해석을 통해 구조 안정성을 확인하였다. 다음으로 광폭 출입문 시스템의 상세 설계를 진행하고 시작품을 제작하였으며 기능 시험과 내구 시험을 진행하여 제시한 설계안의 타당성을 검증하였다. 본 연구의 체계적인 개발 과정을 통해 향후 표정속도 향상을 위한 방안으로 광폭 출입문 적용시 출입문 크기 정의부터 시스템 제작까지 설계 자료로 활용할 수 있을 것이다.
Objective: The objective of this study was to explore the knowledge and perceptions of Malaysian tradition healers towards cancer and cancer prevention. Methodology: A total of 25 participants agreed to participate in this qualitative study during the period from $20^{th}$ July 2011 until $24^{th}$ of September 2011. The proposal of this study was approved by the Ethics Committee of Management and Science University (MSU). Once the participant agreed to be interviewed, date, time and place of the interviews were determined. Consent form was obtained from participants before the interview began. Participants were briefed about the study and its purpose, and after asking their permissions, their replies were recorded. The data was organized into themes and analyzed manually. Results: Twenty-five Malaysian traditional healers participated in this qualitative study. The age of participants ranged between 26 to 78 years old. The majority were in the age group of 31-60 years old, male, Chinese, degree holders with a monthly income ranging from 1,000-5,000 Ringgit Malaysia (RM) and were married (56%, 80%, 48%, 52%, 68%, 84% respectively). The majority defined cancer as having high cholesterol or abscess accumulation. A few of them defined cancer as a type of cell growth. The majority mentioned that food and unhealthy lifestyles are the primary causes of cancer. Surprisingly some of them mentioned that cancer is caused by interference by ghosts. Regarding the diagnosis of cancer, the majority mentioned that they refer their patients to modern physicians' medical report when it comes to diagnosing or treating patients with cancer. The most common cancers that many patients came to seek treatment were breast cancers, followed by colon cancers, liver and lung cancers. Conclusions: Despite good knowledgeabout the causes of cancer among traditional healers, misconceptions still exist. Insufficient knowledge about the definition of cancer was noted among the traditional healers. This urges immediate action by the Ministry of Health of Malaysia to set up a strict regulation and regular monitoring of the traditional healers nationally. Traditional and Complementary Medicine may be integrated into the healthcare system and need to have sustained cooperation for the benefit of patients since about 80% of patients use traditional medicines.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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