In order to develop a high cellulolytic direct-fed microorganism (DFM) for ruminant productivity improvement, this study isolated cellulolytic bacteria from the rumen of Holstein dairy cows, and compared their cellulolytic abilities via DM degradability, gas production and cellulolytic enzyme activities. Twenty six bacteria were isolated from colonies grown in Dehority's artificial (DA) medium with 2% agar and cultured in DA medium containing filter paper at $39^{\circ}C$ for 24h. 16s rDNA gene sequencing of four strains from isolated bacteria showed that H8, H20 and H25 strains identified as Ruminococcus flavefaciens, and H23 strain identified as Fibrobacter succinogenes. H20 strain had higher degradability of filter paper compared with others during the incubation. H8 (R. flavefaciens), H20 (R. flavefaciens), H23 (F. succinogenes), H25 (R. flavefaciens) and RF (R. flavefaciens sijpesteijn, ATCC 19208) were cultured in DA medium with filter paper as a single carbon source for 0, 1, 2, 3, 4 and 6 days without shaking at $39^{\circ}C$, respectively. Dry matter degradability rates of H20, H23 and H25 were relatively higher than those of H8 and RF since 2 d incubation. The cumulative gas production of isolated cellulolytic bacteria increased with incubation time. At every incubation time, the gas production was highest in H20 strain. The activities of carboxymethylcellulase (CMCase) and Avicelase in the culture supernatant were significantly higher in H20 strain compared with others at every incubation time (p<0.05). Therefore, although further researches are required, the present results suggest that H20 strain could be a candidate of DFM in animal feed due to high cellulolytic ability.
Lee, Yeon-Sook;Han, Jung Min;Kang, Taehee;Park, Young In;Kim, Hwan Mook;Kim, Sunghoon
Molecules and Cells
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v.21
no.2
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pp.213-217
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2006
Although AIMP1 (previously known as p43) is one of three auxiliary proteins bound to a macromolecular aminoacyl tRNA complex, it is also secreted as a cytokine controlling both angiogenesis and immune responses. Here we show that systemically administered purified recombinant human AIMP1 had anti-tumor activity in mouse xenograft models. In Meth A-bearing Balb/c mice, tumor volume increased about 28 fold in the vehicle treatment group, while an increase of about 16.7 fold was observed in the AIMP1-treated group. We also evaluated the anti-tumor activity of AIMP1 in combination with a sub-clinical dose of the cytotoxic anti-tumor drug, paclitaxel. The growth of NUGC-3 human stomach cancer cells was suppressed by 84% and 94% by the combinations of 5 mg/kg paclitaxel + 25 mg/kg AIMP1 (p = 0.03), and 5 mg/kg paclitaxel + 50 mg/kg AIMP1 (p = 0.02), respectively, while 5 mg/kg paclitaxel alone suppressed growth by only 54% (p = 0.02). A similar cooperative effect of AIMP1 and paclitaxel was observed in a lung cancer xenograft model. These results suggest that AIMP1 may be useful as a novel anti-tumor agent.
Ginsenosides have been regarded as the principal components, responsible for the pharmacological and biological activities of ginseng. Absorption of major ginsenosides at the gastrointestinal tract was extremely low, when ginseng taken orally. In order to improve the absorption and bioavailability, transformation of major ginsenosides into more active and valuable minor ginsenoside is much required. In this present study, We isolated a lactic acid bacteria Leuconostoc fallax LH3 from the Korean fermented food Kimchi, which have higher ${\beta}$-glucosidase activity. Using the ethanol precipitated curd enzyme of Leuconostoc fallax LH3, we investigated the biotransformation of ginsenoside Rd at different experimental condition to increase transformation. The maximum convertion was supported at 30 $^{\circ}C$ and decreased when temperatures increased. In order to optimize the effect of pH, the curd enzyme was mixed 20 mM sodium phosphate buffer (pH 3.5 to pH 8.0). Ginsenoside Rd was almost hydrolyzed between pH 7.0 and pH 9.0, but not hydrolyzed above pH 10.0. Ginsenoside Rd was hydrolyzed after 24 hrs incubation, but whereas the ginsenoside F2 was appeared from 36 hrs, and all ginsenoside Rd was transformed to F2 after the 60 hrs incubation. Based on this study, the curd enzyme of Leuconostoc fallax LH3 transformed the ginsenoside Rd at the 30$^{\circ}C$ and the pH optimum of 7.0 to 9.0 after the 60 hrs incubation time.
Vesicular stomatitis virus G glycoprotein (VSV-G) has been widely used for pseudotyping retroviral, lentiviral, and artificial viral vectors. The objective of this study was to establish a potential approach for large-scale production of VSV-G. To this end, VSV-G was cloned with an N-terminal His-tag into Pichia pastoris expression vector pPIC3.5K. Three clones ($Mut^s$) containing the VSV-G expression cassette were identified by PCR. All clones proliferated normally in expansion medium, whereas the proliferation was reduced significantly under induction conditions. VSV-G protein was detected in cell lysates by western blot analysis, and the highest expression level was observed at 96 h post induction. VSV-G could also be obtained from the condition medium of yeast protoplasts. Furthermore, VSV-G could be incorporated into Ad293 cells and was able to induce cell fusion, leading to the transfer of cytoplasmic protein. Finally, VSV-G-mediated DNA transfection was assayed by flow cytometry and luciferase measurement. Incubation of VSV-G lysate with the pGL3-control DNA complex increased the luciferase activity in Ad293 and HeLa cells by about 3-fold. Likewise, incubation of VSV-G lysate with the pCMV-DsRed DNA complex improved the transfection efficiency into Ad293 by 10% and into HeLa cells by about 1-fold. In conclusion, these results demonstrate that VSV-G could be produced from P. pastoris with biofunctionalities, demonstrating that large-scale production of the viral glycoprotein is feasible.
Kim, Yong-Jin;Youn, Seok-Jea;Kim, Hun-Nyun;Hwang, Moon-young;Park, Jin-rak;Lee, Byoung-cheun;Lee, Jae-Kwan
Journal of Korean Society on Water Environment
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v.31
no.5
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pp.460-467
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2015
We analyzed the formation of phytoplankton community and the occurences of odorus compound from benthic cyanobacteria in North, South Han-River, Paldang-Lake and Kyeongan-Stream sediments. Sediments were incubated in different water temperature. Akinetes were found (0~500 cells/g) with the highest number on sediment in Yangsoo railroad bridge (YC). The result showed that Anabaena ranged between $0.02{\sim}0.53{\times}10^3cells/mL$ in Sambong (SB), YC, Mukhyen-Stream (MS), Paldang-Lake (P2) and Kyeongan-Stream (KK). The total 68 taxa of phytoplankton were observed during the incubation period. A standing crop of phytoplankton was in the range of $0.13{\sim}8.97{\times}10^3cells/mL$ and Microcystis appeared in SB, YC, P2 and KK sites with $20{\sim}25^{\circ}C$ temperature. In South Han-River (P3), Oscillatoria tenuis was dominant at $25^{\circ}C$ temperature. The concentration of geosmin was the highest in SB-$15^{\circ}C$ (25.5 ng/L), and the concentration of 2-MIB was the highest in P3-$25^{\circ}C$ (286.8 ng/L). Odorous compounds were detected in all the temperature conditions from each site. Our results indicate that the dominant benthic cyanobacteria (O. tenuis, O. limosa, Phormidium tenue and Pseudanabaena limnetica) have high correlation with the occurrence odorous compounds and 2-MIB.
To enhance the reductive dechlorination of polychlorinated biphenyls (PCBs) under anaerobic conditions, we examined the adjunctive effects of cobalt (Co) and nickel (Ni), which are the central metals of transition-metal cofactors of coenzyme F$\_$430/ and vitamin B$\_$12/, respectively, on the dechlorination of Aroclor 1248. After 32 weeks of incubation, the average numbers of chlorines per biphenyl in culture vials supplemented with 0.2, 0.5, and 1.0 mM of Co reduced from 3.88 to 3.39, 2.92, and 3.28, respectively. However, the numbers of chlorine after supplementing with Ni decreased from 3.88 to 3.43, regardless of the Ni concentrations. The observed congener distribution patterns of all vials with different conditions were similar to the pattern produced by the dechlorination process of H' after 21 weeks of incubation, and these patterns were unchanged up to week 32, except for vials supplemented with 0.5 and 1.0 mM of Co. In vials containing 0.5 mM of Co, meta-rich congeners, such as 25/ 25-,24/25-, and 25/23-chlorobiphenyls (CBPs), which were found as accumulated products of dechlorination in other conditions, were further dechlorinated, and 25/2-, 24/2-, and 2/2-CBPs were concomitantly increased after 32 weeks of incubation. In this case, the congener distribution was similar to the dechlorination pattern of process M. From these results, we suggested that the enrichment of cultures with Co might stimulate the growth of specific populations of meta-dechlorinators, and that populations might promote a change in the dechlorination process from H' to M, which is known to be less effective on the dechlorination of the more highly chlorinated congeners of PCBs.
Asia-Pacific Journal of Business Venturing and Entrepreneurship
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v.10
no.1
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pp.175-185
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2015
This article focuses on an analysis of entrepreneurship education programs at U.S. college and universities in order to determine distinctive features of those programs. To this end, we delved into the entrepreneurship programs including Martin Trust Center for MIT, Harvard University VIP program, Polsky Center of Chicago University and Stanford University program. By analyzing major roles, curriculums, and characteristics of the programs, three types of distinctive features emerged. The first feature is dynamic education-focused programs, which provide students with opportunities for applying what they have learned through startup competitions. The second is local-based programs, which take the lead in local startups by focusing on the local industry. The third is the programs with support and encouragement for startups. Based on the three types of features, we suggested critical factors for successful entrepreneurship education.
Entrepreneurs recognize that their passion was an important factor in driving successful entrepreneurship. However, they were often unaware of the impact that third-party passions related to startups have on them. Therefore, in this study, it was verified whether the accelerator incubation program had an effective effect on portfolios. At this time, I tried to do an empirical analysis focusing on how the third-party accelerator entrepreneur passion affects the entrepreneurial performance of portfolios. To this end, a survey was conducted on representatives of portfolios across the country who completed the accelerator incubation program, and empirical testing was conducted based on 330 valid ones. As a result of empirical analysis, it was confirmed that mentoring and networking among accelerator incubation programs had a positive (+) effect on entrepreneurial performance of portfolios. On the other hand, education and seed investment in the accelerator program did not significantly affect the entrepreneurial performance of portfolios. On the other hand, it was tested that accelerator entrepreneur passion significantly moderated both the incubation program elements (education, mentoring, network, seed investment) and the entrepreneurial performance of portfolios. The results of this study are meaningful in that they reveal that the passion of accelerator entrepreneurs is an important lynchpin of incubation programs and the key to success in startups. In addition, this study suggests that it is important for startups to go one step further from seed investment and properly identify the accelerator entrepreneur and his passion, the key man of accelerators.
Objective: To investigate the effects of ROS on kinematic parameters in human spermatozoa. To verify the changes in above parameters, human spermatozoa were incubated with xanthine-xanthine oxidase (X-XO), $H_2O_2$, sodium nitroprusside (SNP) or lymphocyte. Otherwise, spemlatozoa were incubated under low $O_2 (5%) condition. Methods: CASA was employed to analyze sperm motion parameters. Results: Under $H_2O_2 treatment, all kinematic parameters of spermatozoa were dramatically increased during 30 min, but gradually decreased thereafter. Under the low concentration of $H_2O_2 (125 ${\mu}M$ and 250 ${\mu}M$), the movement velocity (VAP, VCL, VSL) decreased, but forward movement increased. Under the 1mM $H_2O_2, sperm showed reduced kinematic parameters except during first 30 min of incubation. In the cases of X-XO and SNP treatment, the movement velocity increased but the forward movement reduced. After incubation for 3 hr treatment, the kinematic parameters gradually decreased in high concentration of X-XO. However these parameters maintained or increased in low concentration of X-XO. There was no obvious changes in the above parameters in the high concentration of SNP. In the presence of high concentration of lymphocytes, all parameters decreased. Under the 5% $O_2 condition, the parameters of the movement velocity and movement pattern increased, but forward movement decreased. Taken togethers, it suggested that ROS increased the movement velocity but decreased the forward movement and lateral head replacement. $H_2O_2, X-XO, SNP and lymphocyte treatment significantly increased capacitated spermatozoa within I h of incubation. There was no significant difference in capacitation between low- and high $O_2 group. Conclusion: The early onset of capacitation in the presence of ROS suggest that ROS might be a positive regulator of sperm capacitation and hyperactivation. These results demonstrate that low concentration ROS facilitates the movement velocity but high concentration ROS was inhibitory.
We have launched an investigation for Embryonic Development, Larvae and Juvenile Morphology, of Buenos aires tetra in order to build basic data of Characidae and fish seeding production. We brought 50 couples of Characidae from Bizidduck aquarium in Yeosu-si, Jeollanamdo, from Korea on March of 2015. We put them in the tetragonal glass aquarium ($50{\times}50{\times}30cm$). Breeding water temperature was $27.5{\sim}28.5^{\circ}C$ (mean $28.0{\pm}0.05^{\circ}C$) and being maintained. The shape of fertilized egg was round shape, and it was adhesive demersal egg. The egg size was 0.63~0.91 mm (mean $0.74{\pm}0.07mm$, n=20). After getting fertilized egg, the developmental stage was gastrula stage, and embryo covered almost two-thirds of Yolk. Incubation was happened after 16 hours 13 minutes from gastrula stage, and the tail of juvenile came out first with tearing egg capsule. Immediately after the incubation, prelarvae had 3.78~3.88 mm length (mean $3.84{\pm}0.04mm$, n=5), and it had no mouth and anus yet. 34 days after hatching from the incubation, juvenile had 8.63~13.1 mm (mean $10.9{\pm}1.66mm$), and it had similar silver-colored body shape with its mother.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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