This research was conducted to investigate the interrelationship among methods of injection of PMSG-hCG to the number of ovulated eggs, percentage of matured oocytes and in vitro fertilization using out-bred ICR mice. The results obtained are as follows, 1) The optimurn dose was 5 IU for both PMSG and hCG, while the number of ovulated eggs was 42$\pm$8, percentage of M II was 73% and in vitro fertilization rate was 81 %. 2) The optimum injection interval of PMSG-hCG was 48 hours, while the number of ovulated eggs was 48 $\pm$ 8, percentage of M II was 80% and in vitro fertilization rate was 81%. 3) The optimum time for collecting eggs was between 16 and 18 hours after hCG injection, while the numbers of ovulated eggs were 44$\pm$8, 42$\pm$7 and 43$\pm$7 in 14,16 and 18 hours after hCG injection respectively, and percentages of M II were 79 and 81 %, and in vitro fertilization rates were 81 and 80% in 16 and 18 hours after hCG injection, respectively. 4) The repeat of superovulation decreased with the number of ovulated eggs, percentage of M II and in vitro fertilization rate, than in control. But it was recovered by increasing the repeat interval.
The present study was performed to investigate the effects of co-culture with granulosa cells on in vitro fertilization and cleavage of early bovine embryo development. Bovine oocytes were matured for 20-24 hrs in vitro with granulosa cells or without and then fertilized in vitro using frozen-thawed spermatozoa treated with BO-caffeine, BO-BSA(2OmM heparin added). At l8hrs after insemination, oocytes were fixed and examined or further cultured in TCM 199 for 48hrs. The fertilization rates between the control(70.4%) and the groups of co-cultured with granulosa cell(2.5$\times$106 cells/ml; 71.6%, 5.0$\times$ 106/ml; 71.9%, l.0$\times$ 107/ml; 71.1%) did not differ significantly. The cleavage rates in the groups co-cultured with granulosa cell(2.5$\times$ 106 cells/mi; 43.6%, 5.0$\times$ 106/ml; 46.8%. l.0$\times$ 107/ml; 45.0%)were significantly higher than that of without granulosa cell, respectively(P<0.05). However there were no significant differences between the groups co-cultured with granulosa cells. The result indicated that co-culture with granulosa cell was effective means to cleavage of bovine follicular oocytes but did not affect the in vitro fertilization.
Essential and non-essential amino acids supplemented to culture medium stimulate mammalian embryo development in vitro. Amino acids such as glycine, taurine and alanine are concentrated in the lumen of oviduct and uterus and it can he thought that these amino acids may have physiological role on fertilization and embryo development. Our aim of this experiment was to investigate the effects of essential and non-essential amino acids, taurine or glycine supplemented to fertilization medium on the cleavage and subsequent in vitro development of bovine oocytes matured and fertilized in vitro. Immature oocytes were obtained from slaughtered Holstein cows and heifers and matured in TCM199 containing 10% fetal calf serum, 2.5 $\mu$g /mL of FSH and LH and 1 $\mu$g / mL of estradiol with granulosa cells in vitro. After maturation, oocytes were coincubated with sperm in fertilization medium supplemented with Minimum Essential Medium (MEM) essential and non-essential amino acids, taurine (3.75 mM) or glycine (10 mM) for 30 hours in vitro. Inseminated oocytes were cultured in synthetic oviduct fluid medium (SOEM) containing MEM essential, non-essential amino acids and 1 mM glutarnine up to 8 days after fertilization.Supplementation of fertilization medium with MEM essential and non-essential amino acids lowered significantly (p<0.05 and p<0.001) the cleavage rate after 30 hours of IVF (53.3%) and at Day 3 (62.7%: Day 0: the day of I VF) compared to control (64.3% and 77.3%, respectively). Subsequent developmental rates to morulae (Mo) and expanding blastocysts (ExBL) also significantly decreased (p<0.001 and p<0.05 for Mo and ExBL) when oocytes were coincubated with sperm in the medium containing MEM amino acids. Taurine added to fertilization medium have not increased the cleavage rate over the control, whereas glycine showed significantly lower (p<0.01) cleavage rate at Day 3 than that of taurine, but there was no significant difference in the developmental rates to Mo and ExBL of bovine embryos irrespective of the supplementation of taurine or glycine to fertilization medium. In conclusion, supplementation of fertilization medium with essential and non-essential amino acids, taurine or glycine has no beneficial effect on in vitro cleavage and development of bovine oocytes matured and fertilization in vitro.
최근 몇년전부터 한국에서도 In Vitro Fertilization - Embryo Transfer Program(IVF-ET)에 대한 논의가 있어왔다. 현재 몇몇 종합병원 및 개인 산부인과 의원에서 수십명의 난관 유착환자를 위한 IVF가 시도되었으나 아직까지, 한건도 성공되었다는 보고는 없다. 몇 십명이 실험적 모델로 제공되었으나 한 건의 성공사례도 없었다는 것은 문제점이 있는 것이 분명하며 이러한 한국에서의 문제점을 시설 문제와 전문가 또 IVF 과정에서의 technical problem들을 종합해서 다루어 보고져 하는 것이 본 논의의 주제임을 먼저 밝혀둔다.
It has been claimed that artificial insemination (AI) of cows with frozen-thawed semen treated with commercially produced kits, Wholemom (in favour of female gender) increases the birth chance of calves with desired sex ratio by approximately 85% without decrease of pregnancy rates. Hence, this study was conducted to investigate the efficacy of wholemom kits as combined with frozen-thawed bovine semen during in vitro fertilization on the in vitro fertilization and developmental efficiency and sex ratios such as some reproductive parameters in bovine. For this, 1,737 oocytes were in vitro fertilized and developed. Agglutination effects on bovine after treatment of Wholemom kit were observed by time passage and dose respectively. To determine sex of embryos, Bovine embryo Y-specific gene primers(ConEY) and Bovine specific universal primer(ConBV) were used as multiple PCR method. Fertilization rate of wholemom-treated group was significantly lower than its of control group[66.9% (1,156/1,737) in Wholemom-treated group; 75.0% (610/813) in control group]. However, developmental rate after fertilization of both wholemom-treated and control groups were not significantly different [26.1% (404/1,156) in Wholemom-treated group; 27.4% (224/610) in control group]. Sex ratio of in vitro fertilized embryo with frozen-thawed semen treated with wholemom kit was determined by multi PCR. Female ratio in wholemom-treated group [85.4% (173/201)] was significantly higher than its of control group [47.2% (66/141)]. In conclusion, wholemom treatments of semen used in the in vitro fertilization and development of bovine oocytes provided increase in female ratio with decrease of fertilization rate.
Objectives: The purpose of this systematic review is to assess the effects of herbal medicine with in vitro fertilization-embryo transfer (IVF-ET) based on the current evidence. Methods: Eligible randomized controlled trials (RCT) searched from Pubmed which compared a combination of herbal medicine and IVF with IVF alone were included. Results: Sixteen trials, in which 2025 women involved, were included in this review. The review results showed that the effect of traditional herbal medicine can improve the clinical pregnancy rate (herbal medicine intervention: 30.36~63.64%, Control: 9.38~47.5%) and rate of high quality oocytes and embryos. The mechanism may be through regulating follicular fluid to improve microenvironment for oocytes which would lead to a successful embryo implantation. Conclusions: This analysis showed that combination of IVF and traditional herbal medicine used in the included trials improve clinical pregnancy rate and IVF success. During in vitro fertilization, TCM can regulate the microenvironment in the follicular fluid to mature the oocyte, improve the quality of the embryo, and help the development and implantation of the embryo. Further large randomized placebo controlled trials are needed to confirm the effectiveness of traditional herbal medicine with concurrent IVF.
Objectives: We investigated whether oriental medical therapy influences the results of in vitro fertilization-embryo transfer. Methods: 19 women with infertility were treated by oriental treatment from August 1999 to June 2000 in the department of obstetrics and gynecology of an oriental medical center. The women were planning in vitro fertilization-embryo transfer after oriental medicine treatment. The data from the women was analyzed, we obtained the following results. Results: The average age of infertile women was $35.42{\pm}4.86$; infertility caused by male factor or tubal factor were the most frequent. The average number of previous failed IVF treatments was $2.21{\pm}1.81$. The number of aspirated oocytes was $9.00{\pm}6.09$ in IVF cycle before oriental therapy, increasing to $9.80{\pm}5.41$ after therapy, but it was not statistically significant. In IVF before oriental therapy, the average number of embryos transfer was $3.20{\pm}1.90$, and it significantly increased to $4.40{\pm}1.45$ after treatment. The quality points of embryos were $10.00{\pm}6.02$ before treatment, but statistically significantly improved to $14.07{\pm}4.98$ after. The characteristics of women being pregnant and non-successful women were compared with age, period of taking herbal medicine and the number of failed IVF treatments, but there was no significant difference. Conclusion: Oriental treatment before IVF could be expected to have good results in treatment of infertility.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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