Purpose: Oral wound healing requires gingival fibroblasts to respond to local growth factors. Epigenetic silencing through DNA methylation can potentially decrease the responsiveness of gingival fibroblasts to local growth factors. In this study, our aim was to determine whether the inhibition of DNA methylation sensitized gingival fibroblasts to transforming growth factor-${\beta}1$ (TGF-${\beta}1$). Methods: Gingival fibroblasts were exposed to 5-aza-2'-deoxycytidine (5-aza), a clinically approved demethylating agent, before stimulation with TGF-${\beta}1$. Gene expression changes were evaluated using quantitative polymerase chain reaction (PCR) analysis. DNA methylation was detected by methylation-sensitive restriction enzymes and PCR amplification. Results: We found that 5-aza enhanced TGF-${\beta}1$-induced interleukin-11 (IL11) expression in gingival fibroblasts 2.37-fold (P=0.008). 5-aza had no significant effects on the expression of proteoglycan 4 (PRG4) and NADPH oxidase 4 (NOX4). Consistent with this, 5-aza caused demethylation of the IL11 gene commonly next to a guanosine (CpG) island in gingival fibroblasts. The TGF-${\beta}$ type I receptor kinase inhibitor SB431542 impeded the changes in IL11 expression, indicating that the effects of 5-aza require TGF-${\beta}$ signaling. 5-aza moderately increased the expression of TGF-${\beta}$ type II receptor (1.40-fold; P=0.009), possibly enhancing the responsiveness of fibroblasts to TGF-${\beta}1$. As part of the feedback response, 5-aza increased the expression of the DNA methyltransferases 1 (DNMT1) (P=0.005) and DNMT3B (P=0.002), which are enzymes responsible for gene methylation. Conclusions: These in vitro data suggest that the inhibition of DNA methylation by 5-aza supports TGF-${\beta}$-induced IL11 expression in gingival fibroblasts.
tRNA and 7SL RNA based antisense vehicles were prepared by inserting conserved anti-viral and anti-viroid domains. Anti-PVS coat protein leader sequence (ACPL) and antistructural antihairpin domain of PSTVd (AHII) were inserted in tRNA cassette; anti- zing finger domain of PVS, AHII and anti hop latent viroid ribozyme were inserted in 7SL RNA gene isolated from A. thaliana. These constructs were shown to be transcribed both, in in vitro and in in vivo conditions. However, it followed from our work that closely linked position of PoIII reference genes and PoIIII antisense genes within T-DNA lead to the impairment of RNA expression in transgenic plants. To assay in vivo transcription of antisense genes, hairy root potato cultures were established using h. tumefaciens A4-24 bearing both, Ri plasmid and PoIII-promoterless plant expression vectors with antisense RNA genes. Expression of antisense RNA in transgenic potato tissues was proven by specific RT-PCR reactions.
RNAs are versatile molecules that are primarily involved in gene regulation and can thus be widely used to advance the fields of therapeutics and diagnostics. In particular, circular RNAs which are highly stable, have emerged as strong candidates for use on next-generation therapeutic platforms. Endogenous circular RNAs control gene regulatory networks by interacting with other biomolecules or through translation into polypeptides. Circular RNAs exhibit cell-type specific expression patterns, which can be altered in tissues and body fluids depending on pathophysiological conditions. Circular RNAs that are aberrantly expressed in diseases can function as biomarkers or therapeutic targets. Moreover, exogenous circular RNAs synthesized in vitro can be introduced into cells as therapeutic molecules to modulate gene expression networks in vivo. Depending on the purpose, synthetic circular RNA sequences can either be identical to endogenous circular RNA sequences or artificially designed. In this review, we introduce the life cycle and known functions of intracellular circular RNAs. The current stage of endogenous circular RNAs as biomarkers and therapeutic targets is also described. Finally, approaches and considerations that are important for applying the available knowledge on endogenous circular RNAs to design exogenous circular RNAs for therapeutic purposes are presented.
Kim, Da Wan;Baik, Sang Yul;Kim, Jungwoo;Kim, Ji Won;Pang, Changhyun
한국진공학회:학술대회논문집
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한국진공학회 2016년도 제50회 동계 정기학술대회 초록집
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pp.366-366
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2016
Nanoscale observation of attachment systems of animals has revealed various exquisite multiscale architectures for essential functions such as gecko's locomotion, beetles' wing fixation, octopuses' sucking and crawling. In particular, the hierarchical 3-dimensional hexanonal nano-architectures in the tree frog's adhesion is known to have the capability of the enhancement of adhesion forces on the wet or rough surfaces due to the conformal contacts against rough surfaces and water-drainable micro channels. Here, we report that tree frog-inspired patches using unique artificial 3-dimensional hexagonal structures can be exploited to form reversibly enhanced adhesion against various highly curved and rough surfaces in dry and wet condition. To investigate the adhesion effect of micro-channels, we changed the arrangement of microstructure and spacing gaps between micro-channels. In addition, we introduced the 3-dimensional hexagonal hierarchical architectures to artificial patches to enhance to conformal contacts on the various rough surfaces such as skin and organs. Using the robust adhesion properties, we demonstrated the self-drainable and comfortable skin-attachable devices which can measure EKG (electrokardiogramme) for in-vitro diagnostics. As a result, bio-inspired programmable nano-architectures can be applied in versatile devices such as, medical patches, skin-attachable electronics etc., which would shed light on future smart, directional and reversible adhesion systems.
Quality management is a recent phenomenon. Advanced civilizations that supported the arts and crafts allowed clients to choose goods meeting higher quality standards than normal goods. There are many methods for quality improvement. Health care, refers to the treatment and management of illness, and the preservation of health through services offered by the medical, dental, complementary and alternative medicine, pharmaceutical, clinical laboratory sciences (in vitro diagnostics), nursing, and allied health professions. Health care embraces all the goods and services designed to promote health, including "preventive, curative and palliative interventions, whether directed to individuals or to populations. The overall impact of managed care remains widely debated. Proponents argue that it has increased efficiency, improved overall standards, and led to a better understanding of the relationship between costs and quality. Practices can solicit feedback from patients in a variety of ways: phone surveys, written surveys, focus groups or personal interviews. What do I do with the results? While you don't have to act on every suggestion that your patients give you, you should take action on the key items that are causing dissatisfaction.
Dental local anesthesia is performed daily on a global scale. Adverse effects are rare, but the topic of neurotoxicity of local anesthetics deserves to be explored, as publications can be controversial and confusing. Therefore, a need was felt to address and question the evidence for potential neurotoxicity of dental local anesthetics. This review aimed to assess the studies published on the neurotoxicity of dental local anesthetics. A PubmedⓇ search was conducted between January 2019 and August 2019. This revealed 2802 hits on the topic of neurotoxicity or cytotoxicity of the following anesthetics: lidocaine, prilocaine, mepivacaine, articaine, ropivacaine, and bupivacaine. Only 23 papers were deemed eligible for this review: 17 in vitro studies, 3 reviews and 3 audits of national inquiries. The heterogeneous literature on this topic showed that all dental local anesthetics are potentially neurotoxic in a concentration and/or exposure time fashion. There seems no consensus about what cell lines are to be used to investigate the neurotoxicity of local anesthetics, which makes the comparison between studies difficult and ambiguous. However, the bottom line is that all dental local anesthetics have a neurotoxic potential, but that there is no unanimity in the publications about which local anesthetic is the least or the most neurotoxic.
Micro-scale magnetic beads are widely used for isolation of proteins, DNA, and cells, leading to the development of in vitro diagnostics. Efficient isolation of target biomolecules is one of the keys to developing a simple and rapid point-of-care diagnostic. A zinc finger protein (ZFP) is a double-stranded (ds) DNA-binding domain, providing a useful scaffold for direct reading of the sequence information. Here, we utilized two engineered ZFPs (Stx2-268 and SEB-435) to detect the Shiga toxin (stx2) gene and the staphylococcal enterotoxin B (seb) gene present in foodborne pathogens, Escherichia coli O157 and Staphylococcus aureus, respectively. Engineered ZFPs are immobilized on a paramagnetic bead as a detection platform to efficiently isolate the target dsDNA-ZFP bound complex. The small paramagnetic beads provide a high surface area to volume ratio, allowing more ZFPs to be immobilized on the beads, which leads to increased target DNA detection. The fluorescence signal was measured upon ZFP binding to fluorophore-labeled target dsDNA. In this study, our system provided a detection limit of ≤ 60 fmol and demonstrated high specificity with multiplexing capability, suggesting a potential for development into a simple and reliable diagnostic for detecting multiple pathogens without target amplification.
This paper presents the development and market trends of nano biosensors. These biosensors must possess high sensitivity and selectivity to effectively detect diseases. Presently, many research groups are focusing on the field-effect transistor aspect of nano biosensors, which can identify diseases such as Down syndrome, bladder cancer, breast cancer, and numerous other cancers, utilizing graphene and transition metal dichalcogenide materials. In the case of in-vitro diagnostics, the use of nano biosensors has been rapidly growing since the onset of the COVID-19 pandemic. This paper also discusses market trends and the outlook for both national and international enterprises engaged in the nano biosensor field. Nano biosensors are expected to play a beneficial and significant role soon, contributing to the early diagnosis of diseases and subsequently improving patient outcomes.
The rising cases of multidrug-resistant Acinetobacter baumannii (Ab) and the lack of effective drugs call for quick attention. Here, based on a Tn7 transposon and Xer/dif system, we constructed a stable, selectable marker-free autoluminescent Ab capable of producing visible light without extra substrates. Utilization of this autoluminescent reporter strain has the potential to reduce the time, effort and costs required for the evaluation of activities of anti-Ab drug candidates in vitro.
최근 반려동물 시장의 급격한 성장으로 인해 동물용 질병 진단키트의 개발이 이루어지고 있다. 이에 동물 분자진단 개발을 위한 바이오마커의 도입으로 효용성을 재평가하고 있다. 좋은 바이오 마커는 정확하고 신뢰할 수 있어야 하고, 정상 상태와 질병 상태를 구별하고, 다른 질병을 구별해야 한다. 최근 보고된 유전마커나 세포유리 DNA, 순환종양세포, granzyme, 피부종양에 관한 종양마커의 개발이 활발히 이루어지고 있으며, 기타로는 브루셀라증, programmed death receptor-1, symmetric dimethylarginine, periostin, cysteinyl leukotrien이 활발히 도입되고 있다. 따라서 바이오마커는 위험 예측에 사용되거나 질병 진행의 스크리닝, 진단 및 모니터링에 사용된다. 관련 바이오 마커에 대한 가장 중요한 기준은 질병 특이성이며 많은 잠재적 바이오 마커가 실험실 및 시험 연구에서 출현했지만, 독립적인 실험이나 대규모 임상 연구에서 검증이 부족하다. 후보 바이오 마커는 질병과 연관성을 평가하고, 조기 발견, 질병 진행에 대한 바이오 마커의 유효성을 검증하여서 인간 및 동물에게 접목하게 된다. 향후 잘 구조화 된 바이오마커 기반 연구의 효용성을 재평가하고 동물 질병 진단에 도입되는 추세에 맞춰 현장검사에서 활용될 수 있는 키트의 개발에 대한 연구가 요구돼야 할 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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