The objective of this study was to develop an in vitro digestion technique to estimate bioavailable energy values of different corn hybrids in swine and poultry. A total of 21 samples were investigated; 18 normal corn (NC) and 3 high-oil corn (HOC) hybrids. One step-two enzymes digestion system was introduced to develop the in vitro technique. The gross energy (GE) values of NC hybrids were correlated with the in vitro disappearing energy values (IVE; r=0.85, p<0.01), the in vitro energy digestibilities (IVED; r=0.70, p<0.01), and the in vitro DM digestibilities (IVDM; r=0.55, p<0.05). It appears, however, that IVE values of NC and HOC hybrids were not significantly different according to the one step-two enzyme digestion system. Results of in vivo and in vitro estimates suggested that there was no significant correlation between them in poultry. The IVE value was regressed linearly with ME and DE values in swine with low regression coefficient (34 and 41%, respectively).
Sexing from bovine embryos which were fertilized in vitro implicate a possibility of the sex-controlled cattle production. This study was carried out to investigate the possibility of determining of embryo sex by fluorescence in situ hybridization (FISH) technique. FISH was achieved in in vitro fertilized bovine embryos using a bovine Y-specific DNA probe which constructed from the btDYZ-1 sequences. To evaluate Y-chromosome specificity of the FISH probe, metaphase spreads of whole embryos and lymphocytes were prepared and tested. A male-specific signal was detected on 100% of Y chromosome bearing metaphase specimens. Using the FISH technique with a bovine Y-specific probe, 232 whole embryos of 8 cell- to blastocyst-stage were analyzed. Observing the presence of the Y-probe signal on blastomeres, 102 embryos were predicted as male, and 130 embryos as female. The determining rate of embryo sex by FISH technique was about 93% regardless of embryonic stages. In conclusion, the FISH using a bovine Y-specific DNA probe is an accurate, reliable and quick method for determining the sex of bovine embryos.
While the technique of In Vitro Fertilization and Embryo Transfer has been proven undoutedly, it is for from reaching a consensus on the legal implication. Legal authority regarding clinical therapeutic In Vitro Fertilization and Embryo Transfer is, for all practical purpose, nonexistant. In this paper, it is discussed existing regulation dealing with In Vitro Fertilization and Embryo Transfer and related areas i.e. the regulation related medical technologies, the use of donor sperm, donor eggs, surrogate uteri, multiple pregnancy, miscarriages, extra embryos, the technique of cryopreservation. The legality of embryo donation, the responsibility for embryo preservation or destruction and the legal status of the embryos are surveyed. Finally the various legal theories that may give rise to physician liability in connection with clinical In Vitro Fertilization are also reviewed.
This experiment was carried out to improve a simple and effective procedure of egg transfer which is considered to be the most useful technique for the improvementand proliferation of domestic animals. Several experiment procedures such as superovulation, surgical recovery of ovulated egg, in vitro capacitation of ejaculated spermatozoa, in vitro fertilization and culture of embryo were conducted. The results obtained in this experiment were summarized as follows: 1. In rabbits treated with PMS in combination with estradiol and HCG, 10 to 43 eggs were obtained in one rabbit and the average ovulation number of 20 rabbits was 21 eggs. 2. Six to 24 eggs (average 13 eggs) were recovered from the removed oviducts by the methods of flushing technique and the average recovery rate of 20 rabbits was 61.9 percent. 3. Most rabbit spermatozoa ejaculated by artificial vagina were capacitated in vitro by the culture of the spermatozoa with PBI medium at 37$^{\circ}C$ for 4 hours after removal of seminal plasma. 4. Normal fetilization following in vitro fetilization was observed in 88 (42.7%) of 206 eggs. 5. The number of eggs developed to 2-, 4-, and 8-cell stage following in vitro culture with PBI medium at 37$^{\circ}C$ was 26 (70.3%), 20 (54.1%) and 17 (45.9%) of 37 eggs used for in vitro culture.
The technique for maturation of follicular oocyte has been devised to provide such a low cost and in ptentifut number supply of bovine embryo. Some of problems concerning production of bovine embtyo in vitro were discussed in this paper. Bovine follicular oocytes cultured in vitro achieved normal fertilization but cleavage rates to blastocyst were low compared to the oocyte matured in vivo. It has been concluded that a deficient cytoplasmic maturation occurs in the oocytes matured in vitro. These results indicate that the studies for maturation of bovine follicular oocytes in vitro need improvement of culture conditions and to define the characteristics that might be indicative of healthy oocyte.
The in-vitro fertilization in human clinic and animal reproduction is a very important technique but the rate of success is still low. When the in-vitro fertilization and culture of gametes or embryos were done under the condition which Hema hydrogel chamber were implanted into the peritoneal cavity of mouse, the in-vitro fertilization and development of embryos could be significantly improved and the cell-block under in-vitro culture could be overcome. Also, the Rema hydrogel chamber was very useful for the protection of isolated blastomeres. It is concluded that the polymerized Hema (pHema) hydrogel chamber may be effectively used in the fields of embryo transfer and in vitro fertilization.
In tobacco, in vitro pollination has been successfully applied to overcome interspecific incompatibility. The use of this technique will make it possible to introduce DNA into pollen tubes just before fertilization. In this study, we showed improvement of the efficiency of in vitro self-pollination and introduction of foreign genes into pollen tubes by the method of polycation. A plasmid harbouring the GUS gene was introduced into pollen grains and pollen tubes, which had incubated on pollen germination medium(PGM), by polyornithine method. Transient expression of the GUS in pollen grains and pollen tubes that were treated with 0, 2, 5 and $10{\mu}g/m\ell$ DNA was observed. In results, combination of the techniques of polyornithine and in vitro pollination was efficient new technique for genetic transformation through fertilization processes.
Two trials in vivo and in vitro were conducted, in vivo to determine the apparent digestibility of gross energy, crude protein, dry matter, acid detergent fiber, neutral detergent fiber and apparent digestible energy in 10 corn by-products. In vivo the diets included one basal corn diet, four corn gluten meal diets, four corn distillers dried grains with solubles diets and two corn distillers dried grains diets using the different methods, 12 crossbred barrows weigh $40{\pm}$1.6 kg were allocated into individual metabolic crate, according to a $6{\times}6$ Latin square design. In vitro using flask technique, filter bag technique and dialysis tubing technique, the digestibilities of gross energy, crude protein and dry matter in corn gluten meal and corn distillers dried grains with solubles were investigated. Pepsin, pancreatin, intestinal fluid, rumen fluid and cellulase were used in incubation. The results showed that correlation coefficient was 0.73 in corn distillers dried grains with solubles between the digestibility of crude protein and acid detergent fiber in vivo (p<0.01); and correlation coefficient was 0.68 in corn distillers dried grains with solubles between the digestibility of gross energy and neutral detergent fiber in vivo (p<0.01). Apparent digestible energy (DE) of corn by-products in pig total tract was predicted by the percentage of crude protein (CP) and the content of gross energy (GE) in feedstuff. The equation: DE=5,601.09+26.69$\times$CP %-0.5904$\times$GE, ($R^2=0.72$). In vitro, filter bag technique was more convenient; furthermore, the digestibility for the treatments (pepsin+pancreatin+rumen fluid and pepsin+pancreatin+cellulase) was better.
Han, M. S.;E. J. Cho;H. B. Ha;Park, H. S.;S. H. Sohn
Proceedings of the KSAR Conference
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2004.06a
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pp.287-287
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2004
Sexing from bovine embryos which were fertilized in vitro implicate a possibility of production of the sex controlled cattle. This study was carried out to investigate the possibility of determining of embryo sex by fluorescence in situ hybridization (FISH) technique. FISH was achieved in in vitro fertilized bovine embryos using a bovine Y-specific DNA probe which constructed from the btDYZ-1 sequences. (omitted)
In the present research, we assessed the utility of the structural information of drugs for predicting human in vivo intrinsic clearance from in vitro intrinsic clearance data obtained by human hepatic microsome experiment. To compare with the observed intrinsic clearance, human intrinsic clearance values for 51 drugs were estimated by the classical methods using in vivo-in vitro scale-up and by the new methods using the in vitro experimental data and selected molecular descriptors of drugs by the forward selection technique together. The results showed that taking consideration of molecular descriptors into prediction from in vitro experimental data could improve the prediction accuracy. The in vitro experiment is very useful when the data can estimate in vivo data accurately since it can reduce the cost of drug development. Improvement of prediction accuracy in the present approach can enhance the utility of in vitro data.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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