본 실험은 육계에서의 Marek's disease(MD) 백신에 대한 안전성과 효용성을 국내에 기 도입된 18일령 계란에서의 백신 접종 방법(In-Ovo vaccination)을 이용하여 평가하고자 실시하였다. 육계에서의 MD 오염율은 nested PCR을 이용하였으며 백신 접종군과 비접종군간의 생산성 차이를 출하 일령, 평균출하체중, 출하율, 사료 효율을 기본으로 하는 생산 지수를 측정하여 비교하였다. 백신에 의한 면역 억제 현상을 파악하기 위하여 접종 농장에서 채취한 혈청에서의 항체 역가수준과 F낭의 무게 변화를 검사하였다. 국내 육계에서의 MD 발생율을 파악하기 위하여 nested PCR을 실시한 결과 조사 대상 농장 중 26.09%가 오염되었으며, 백신 접종 농장과 비접종 농장간의 생산 지수의 차이는 통계학적으로 유의한 차이가 없었다. 그러나 MDV 오염군에서의 MD 백신 접종 농장의 생산 지수가 비접종 농장보다 높아 간접적으로 효과가 있음이 인정되었다. 면역 억제여부를 파악하기 위한 검사에서는 두 그룹 간 B/B ratio 차이는 없었으나 두 계군 모두 출하 시 심한 위축을 보여주어 혈청 검사 성적과 연계하여 볼 때 국내 육계 농장에서의 IBD 감염이 만연되어 있다는 것을 알 수 있었다. 본 연구를 통해서 국내 육계에서의 MDV 오염율이 파악되었으며, In-Ovo 백신 접종에 의한 MD 백신 접종은 안전성에 있어서는 별다른 문제가 없었으나 효능면에 있어서는 MD 야외감염율이 낮고 IBD와 같은 면역 억제 질병의 감염이 만연되어 있어 정확한 평가가 되지 않아 앞으로 후속 연구가 진행되어야 할 것으로 판단되었다.
Objective: The effects of vaccinating 18-day-old chicken embryos with the combination of recombinant Eimeria profilin plus Clostridium perfringens (C. perfringens) NetB proteins mixed in the Montanide IMS adjuvant on the chicken immune response to necrotic enteritis (NE) were investigated using an Eimeria maxima (E. maxima)/C. perfringens co-infection NE disease model that we previously developed. Methods: Eighteen-day-old broiler embryos were injected with $100{\mu}L$ of phosphate-buffered saline, profilin, profilin plus necrotic enteritis B-like (NetB), profilin plus NetB/Montanide adjuvant (IMS 106), and profilin plus Net-B/Montanide adjuvant (IMS 101). After post-hatch birds were challenged with our NE experimental disease model, body weights, intestinal lesions, serum antibody levels to NetB, and proinflammatory cytokine and chemokine mRNA levels in intestinal intraepithelial lymphocytes were measured. Results: Chickens in ovo vaccinated with recombinant profilin plus NetB proteins/IMS106 and recombinant profilin plus NetB proteins/IMS101 showed significantly increased body weight gains and reduced gut damages compared with the profilin-only group, respectively. Greater antibody response to NetB toxin were observed in the profilin plus NetB/IMS 106, and profilin plus NetB/IMS 101 groups compared with the other three vaccine/adjuvant groups. Finally, diminished levels of transcripts encoding for proinflammatory cytokines such as lipopolysaccharide-induced tumor necrosis $factor-{\alpha}$ factor, tumor necrosis factor superfamily 15, and interleukin-8 were observed in the intestinal lymphocytes of chickens in ovo injected with profilin plus NetB toxin in combination with IMS 106, and profilin plus NetB toxin in combination with IMS 101 compared with profilin protein alone bird. Conclusion: These results suggest that the Montanide IMS adjuvants potentiate host immunity to experimentally-induced avian NE when administered in ovo in conjunction with the profilin and NetB proteins, and may reduce disease pathology by attenuating the expression of proinflammatory cytokines and chemokines implicated in disease pathogenesis.
닭의 전염성 F낭병 바이러스(IBDV)가 원인 바이러스인 전염성 F낭병은 전 세계 양계산업에 경제적으로 피해가 큰 중요한 질병이다. 이 연구의 목적은 닭에서 IBDV에 대한 방어면역을 유도하기 위한 in ovo 초회항원자극(priming)과 불활화백신에 의한 보강접종 방법에 항원보강제(adjuvant)로 chicken interleukin 6 (pcDNA-ChIL-6;plasmid encoding chicken interleukin-6)와 levamisole (LMS)의 효과를 조사하는 것이다. IBDV의 VP2, VP, VP3 protein을 암호화하는 유전자백신인 plasmid DNA vaccine (pcDNA-VP243) 단독 또는 pcDNA-ChIL-6 또는 LMS와 함께 18일령 부화란의 양막낭(amniotic sac)에 접종하고 부화한 1주령의 병아리에 불활화 IBD 백신을 근육 접종한 다음 3주령에 고병원성 IBDV인 SH/92 주로 공격 접종하고 10일 동안 관찰하였다. 백신하지 않은 공격접종 대조군이 100%의 폐사율을 보인 반면 pcDNA-VP243 단독 접종군과 pcDNA-VP243에 pcDNA-ChIL-6 또는 LMS를 첨가한 실험군은 모두 100%의 생존율을 나타내었다. 그러나 공격접종 후 F낭의 손상을 평가하기 위한 IBDV RNA의 검출, B/B ratio와 F낭의 병변지수(lesion score) 등을 분석한 결과 pcDNA-VP243에 pcDNA-ChIL-6 또는 LMS를 첨가한 실험군은 pcDNA-VP243 단독 접종군보다 향상된 방어효과를 나타내지 않았다. 이 실험결과는 유전자백신에 의한 in ovo 초회항원자극-불활화백신에 의한 보강접종법이 고병원성 IBDV로부터 닭을 보호하기 위한 효과적인 방법이었으나 pcDNA-ChIL-6 또는 LMS의 첨가로 인한 방어효과의 향상은 나타나지 않았다.
Coccidiosis control programs such as vaccines or in-feed anticoccidials are commonly practiced in the poultry industry to improve growth performance and health of commercial broiler chickens. In this study, we assessed the effects of various coccidiosis control programs (e.g., in ovo vaccination, synthetic chemicals, and antibiotic ionophores) on immune status of broiler chickens vaccinated against infectious bronchitis virus and Newcastle disease virus (ND) and raised on an Eimeria-contaminated used litter. In general, the levels of ${\alpha}$-1-acid glycoprotein, an acute phase protein, were altered by the treatments when measured at 34 days of age. Splenocyte subpopulations and serum antibody titers against ND were altered by various coccidiosis control programs. In-ovo-vaccinated chickens exhibited highest mitogenic response when their spleen cells were stimulated with concanavalin A (Con A) at 7 days of age. It is clear from this study that the type of coccidiosis control program influenced various aspects of innate and adaptive immune parameters of broiler chickens. Further studies will be necessary to delineate the underlying relationship between the type of coccidiosis control program and host immune system and to understand the role of other external environmental factors such as gut microbiota on host-pathogen interaction in various disease control programs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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