• Applied Microscopy
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• 제17권2호
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• pp.1-22
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• 1987

Pemphigus vulgar교의 본태(本態)를 알아보기 위한 일환으로 본질병(本疾病)의 병변조직(病變組織)을 전자현미경적(電子顯微鏡的)으로 관찰(觀察)하고 본질병(本疾病)에 관여(關與)하는 세포(細胞)들에 대(對)해 면역전자현미경적(免疫電子顯微鏡的)으로 추구(追究)하였던 바, 그 결과(結果)를 보고(報告)하는 바이다. 견(犬)의 pemphigus vulgaris의 구강(口腔) 및 식도(食道)의 점막층(粘膜層)을 전자현미경적(電子顯微鏡的)으로 관찰(觀察)하였던 바 acantholysis를 일으켜도 desmosome과 기저막(基底膜)은 큰 변화(變化)가 없었으며 세포간(細胞間)은 세포간물질(細胞間物質)의 집적(集積)에 의(依)해 확장(擴張)되고 이들 세포간강물질(細胞間腔物質)은 집괴(集塊) 또는 무구조(無構造)한 물질(物質)로 나타났다. 그리고 기저세포(基底細胞)는 기저막(基底膜)에 단단히 부착(附着)되어 있었고 dendritic cell이 기저세포층(基底細胞層)위로 분포(分布)되어 있었으며, 이들 dendritic cell 중(中)에서는 가끔 여러 형태(形態)의 퇴행성변화(退行性變化)를 볼 수 있었다. Mouse 피부유리상피세포(皮膚遊離上皮細胞)에 있어서 immunogold-labeling 방법(方法)에 의해 dendritic cell을 동정(同定)하는 데에는 post-fixation, pre-embedding immunogold-labeling technique가 좋았으며 15nm와 40nm 크기의 colloid-fold 입자(粒子)로 Langerhans cell과 Thy-1양성(陽性) dendritic cell이 표식(標識)될 수 있었다. 이들 세포(細胞)들은 세포막항원(細胞膜抗元)에 따라 monoclonal antibody의 반응(反應)에 이어 치밀한 colloid-gold 입자(粒子)가 세포막표면(細胞膜表面)을 따라 일정(一定)하게 표식(標識)되었다. 또한 이들 상피세포(上皮細胞)들을 투과전자현미경적(透過電子顯微鏡的)으로 관찰(觀察)하였을 때 초미세구조(超微細構造)가 잘 보존(保存)되었으나 Langer-hans cell내(內)의 Birbeck granule은 유리전(遊離前) 피부상피조직내(皮膚上皮組織內)의 Langerhans cell내(內)의 Birbeck granule에 비(比)해 수적(數的)으로 현저히 감소(減少)되어 있었다. 그러나 Thy-1 양성(陽性) dendritic cell에서 볼 수 있는 dense-core 과립(顆粒)은 별변화(別變化)없이 쉽게 관찰(觀察)될 수 있었다. 조직배양(組織培養)을 한 견(犬)의 keratinocyte에 대(對)해 사람 pemphigus vulgaris의 항체(抗體)로 반응(反應)시킨 후 protein-A gold(15 nm)로 표식(標識)시킨 바 제일 바깥 상층(上層)의 keratinocyte에 있어서 세포막표면(細胞膜表面)을 따라 표식(標識)되어 세포막항원(細胞膜抗元)을 나타내었으며, 이와 같은 소견(所見)으로 미루어 정상피부(正常皮膚) 중층편평상피세포(重層扁平上皮細胞)에서도 동일(同一)한 소견(所見)을 관찰(觀察)할 수 있다고 본다.

• 한국식물병리학회:학술대회논문집
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• 한국식물병리학회 2003년도 정기총회 및 추계학술발표회
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• pp.119.1-119
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• 2003

The glyoxysomal nature of microbodies was determined in Botryosphaeria dothidea hyphae based on morphology and in situ enzyme characteristics by transmission electron microscopy and cytochemistry. Bound by a single membrane, microbodies had a homogeneous matrix and varied in size ranging from 200 to 400 m in diameter. Microbodies had crystalline inclusion(s) which consisted of parallel arrays of fine tubules in their matrices. Microbodies and lipid globules were frequently placed in close association with each other, forming microbody-lipid globule complexes in hyphae. The cytochemical activities of catalase and malate synthase were localized in matrices of microbodies, showing intense electron-density of the organelle. In addition, the immunogold labeling detected the presence of catalase in multivesicular bodies and hyphal cell walls as well as in matrices and crystalline inclusions of microbodies, supporting the enzyme secretion through cell walls. Meanwhile, isocitrate Iyase was localized only in matrices of microbodies. These results suggest that microbodies, particularly complexed with lipid globules, in the fungal hyphae are functionally defined as glyoxysomes, where glyoxysomal enzymes are biochemically active for the glyoxylate cycle to be a metabolic pathway in gluconeogenesis. (Mycology and Fugus Diseases)

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제39권2호
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• pp.119-132
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• 2001

An immunoelectron microscopy employing immunogold labeling method was performed to detect tissue origin of Dl fraction (DIA) among 5 antigenic protein fractions partially purified by DEAE- anion exchange chromatography from water- soluble crude antigen (PIWA) of adult Paragonimus iloktsuenensis. Immune reactions of adult worm tissues with rabbit serum immunoglobulin immunized with crude antigen (PI-Ig) and D1 antigen (D1-Ig), as well as rat serum immunoglobulin infected with P. iloktsuenensis were observed. DlA showed strong antigenicity in the intestinal epithelium of the worms during the early infection period of 2-4 weeks after infection. The vitellaria also showed stronger antigenicity than the other tissue sites in immune reaction of tissues against all immunoglobulins from 4 to 33 weeks after vitelline development. Therefore, it is suggested that DlA was mainly originated from the intestinal epithelial tissues before the development of vitelline gland of the parasites. Immune-reactivity of two immunoglobulins (PI-Ig, Dl-Ig) was significantly different in intestinal epithelial cytoplasmic protrusions (CP) and intestinal epithelial secretory granules (SG). In the experimental group with Dl-Ig, gold particles were labeled significantly in CP than in SG when compared to the PI-Ig group. Thus, the major antigenic materials in Dl antigen having a strong antigenicity in the early infection period was considered to be originated from the intestinal epithelial tissue .

• BMB Reports
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• 제38권1호
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• pp.65-70
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• 2005

Choristoneura fumiferana granulovirus (ChfuGV) infection results two types of enveloped virions: Occlusion-derived virus (ODV) and budded virus (BV). Structural proteins ODVP-6E/ODV-E56 and p74 are two major conserved ODV-associated proteins that may be involved in the initiation of viral infection cycle in susceptible host insect larvae. This study presents the characterization of ChfuGV odvp-6e/odv-e56 and p74 transcription and translation as well as immunolocalization of these proteins in the occluded ChfuGV virion. Our results revealed that the transcription of odvp-6e/odv-e56 and p74 genes, both, start at 24 hours post infection (h p.i.). Using monospecific polyclonal antibodies made against ODVP-6E/ODV-E56 and p74 we demonstrated that these proteins are both expressed late in infection (24 h p.i.). Immunogold labeling using antisera against ODVP-6E/ODV-E56 and p74 proteins demonstrated that ODVP-6E/ODV-E56 and p74 proteins are both associated with the ODV envelop of ChfuGV.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제36권4호
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• pp.227-234
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• 1998

쥐와포자충의 운동에 관여하는 구조에 대하여 다른 구충류에서와 마찬가지로 알려진 바가 없다. 이 연구에서는 쥐와포자충에서 microfilament와 그 결합단백질의 분포를 관찰하여 이 기생충의 운동기전에 대한 이해를 돕고자 하였다. Actin의 분포를 보기 위해 두 종류의 actin, 즉 닭 골격근과 평활근의 actin에 대한 항체를 사용하였고, tropomyosin의 관찰을 위해서는 닭 골격근의 tropomyosin에 대한 항체를 이용하여 면역황금표지법으로 관찰하였다. 관찰된 모든 발육단계의 쥐와포자충이 actin과 tropomyosin을 가지고 있었는데 두 종류의 actin은 서로 다른 부위에서 관찰되었다. 즉, 골격근에 대한 항체는 주로 세포질과 세포막 구조에 표지되었고, 평활근에 대한 항체는 feeder organelle과 숙주세포 사이의 섬유질 구조 (filamentous cytoplasm)에 주로 표지되어 서로 다른 actin이 상이하게 분포하고 있음을 알 수 있었다. 분포 위치로 미루어 볼 때 골격근형 actin은 기생충의 세포질 내 여러 가지 현상에, 평활근형 actin은 쥐와포자충과 숙주세포 부착을 유지시키는데 주요 역할을 할 것으로 생각된다. Tropomyosin은 쥐와포자충 모든 발육단계에서 관찰되었는데 세포막에 주로 분포하였고 세포질 내의 소공포 (vacuole) 막 주위 및 핵 주위에서도 관찰되었다. Tropomyosin은 쥐와포자충의 발육단계가 변함에 따라 끊임없이 분포를 달리하는 것으로 생각되며 특히 막구조에 다수 분포하므로 항원으로서 숙주세포를 자극할 가능성이 있는 것으로 보인다.

• Applied Microscopy
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• 제40권4호
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• pp.261-266
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• 2010

미토콘드리아에서 생성하는 ATP는 미토콘드리아의 속막에 존재하는 전자전달계 효소(electron transferase)에 의해 생성되며, 이러한 전자전달계 효소는 복합체 I, II, III, IV, V로 구성되어 있다고 알려져 있다. ATP는 ATPase에 의해 생성되며, ATPase는 $F_0$와 $F_1$ 소복합체로 구성되어 있다. 미토콘드리아의 외막에는 Porin 또는 VDAC(voltage-dependent anion-selective channel)이라고 알려져 있는 미세한 구멍 형태의 단백질이 존재하며, 세포질에 존재하는 succinate, malate, ATP와 같은 음전하용질 또는 전자를 선택적으로 통과시키는 역할을 수행하는 것으로 보고된 바 있다. 본 연구에서는 소의 심근 미토콘드리아에 존재하고 있는 porin과 ATPase의 기능과 분포의 관계를 알아보기 위하여, porin과 ATPase Ⅴ-${\beta}$ 항체를 면역반응법을 이용한 광학현미경과 이중면역반응법을 이용한 형광현미경으로 확인하고, 심근 미토콘드리아의 두 단백질 분포를 면역황금표지법을 이용한 전자현미경으로 관찰하였다. 미토콘드리아에서 porin 항체에 대한 미토콘드리아 조직항원의 발색은 조직내에서 전반적으로 관찰할 수 있었으며, ATPase 항체에 대한 조직항원의 발색은 세로면에서 관찰되었다. 이중면역응법에서 porin 항체와 ATPase는 각각 다른 조직에서 발색이 관찰되거나, 같은 조직 내에서 관찰되었다. 면역황금표지법에서 porin 항체는 미토콘드리아의 바깥막에서 황금입자가 표지된 것을 확인할 수 있었으며, ATPase는 미토콘드리아의 속막에서 황금입자가 표지된 것을 확인할 수 있었다. 그러나 ATPase 항체가 황금입자로 표지되지 않은 미토콘드리아도 확인되었다. 이러한 결과로 porin 항체와 ATPase 항체는 미토콘드리아의 바깥막과 속막에 각각 분포양상을 확인하였다. porin 항체의 발색으로 인한 조직 내의 미토콘드리아가 존재하고 있음을 확인할 수 있었으며, ATPase 항체의 발색으로 인한 ATP를 생성하는 미토콘드리아를 확인할 수 있었다. 하지만 porin 항체의 반응으로 확인된 미토콘드리아가 반드시 ATP를 생성하는 것은 아니라는 것을 추측할 수 있었다.

• Applied Microscopy
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• 제38권2호
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• pp.125-133
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• 2008

Mitochondria 내막의 cytochrome-c-oxidase는 세포의 에너지 생합성에 중요한 요소이며, 세포자멸사와 각종세포의 병리학적 현상과 밀접한 연관성이 있는 전자전달계효소로 알려져 있다. Porin 단백은 mitochondria 내막과 외막에 분포하는 효소단백으로 전자전달계효소 형성과 ATP 운반에 관여하는 것으로 알려져 있다. 따라서 면역현미경법을 사용하여 cytochrome-c-oxidase의 분포와 porin 단백과의 연관성을 확인하여 mitochondria의 cristae에 분포하는 cytochrome-c-oxidase의 형성과 변화를 알아보고자 하였다. Cardiac muscle tissue의 sarcoplasm에는 많은 수의 mitochondria가 분포하며, cytochrome-c-oxidase가 풍부한 mitochondria와 porin 단백이 풍부한 mitochondria로 구별되었다. Cytochrome-c-oxidase가 풍부한 mitochondria는 porin 단백이 빈약하고 porin 단백이 풍부한 mitochondria는 cytochrome-c-oxidase가 소량 포함되어 있는 것으로 관찰되었다. 심근조직의 부위에 따라 근형질에 분포하는 mitochondria에 cytochrome-c-oxidase가 풍부한 mitochondria와 porin 단백이 풍부한 mitochondria가 각각 상이하게 분포하였다. 이상의 결과로 미성숙 mitochondria는 많은 양의 porin 단백을 함유하여 근형질로부터 단백질 소단위를 mitochondria 막내로 운반하여 cytochrome-c-oxidase를 형성시키고 mitochondria가 성숙하면서 ATP를 운반할 최소한 양의 porin 단백만을 남기고 소멸되는 것으로 추측된다.

• Applied Microscopy
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• 제38권4호
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• pp.375-382
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• 2008

삼차신경주감각핵에서 치수유래 일차들신경섬유의 종말과 그에 연접하는 연접이전신경종말에 함유된 연접소포들을 형태학적으로 비교하기 위하여 신경추적자(WGA-HRP)를 흰쥐 앞니의 치수강에 주입하여 치수 유래 일차들신경종말을 표식한 후, 투과형 전자현미경을 통한 미세구조적 정량 분석을 실시하였다. 표식된 치수유래 일차들신경종말은 직경이 $45{\sim}55\;nm$인 구형의 소포를 함유하고 있었으며, 일부 직경이 $80{\sim}120\;nm$ 큰 치밀소포가 관찰되기도 하였다. 또한 표식된 신경종말은 다형성 연접소포를 함유하고 있는 연접이전신경종말과 대칭연접을 이루고 있었다. 일차들신경종말의 연접소포들은 긴 지름에 대한 짧은 지름의 비율(form factor)이 $0.6{\sim}0.99$의 분포를 보인 반면, 연접이 전신경종말의 연접소포들은 $0.25{\sim}0.99$까지 다양하게 나타났다. 또한 대부분의 연접이전신경종말은 GABA에 대한 면역양성반응을 보였다. 이상의 결과는 표식된 신경종말과 그에 연접하는 연접이전신경종말의 연접소포는 서로 다른 형태를 보이고 있으며, 또한 그 연접이전신경종말이 억제성 신경전달물질인 GABA를 함유하고 있음을 나타낸다.