• Title/Summary/Keyword: Immunoelectrophoresis

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T-cell subset 정량(定量)을 위한 항우적혈구(抗牛赤血球) IgM 항체(抗體)의 분리(分離) 정제(精製)(II) (Purification of Anti-Ox Red Blood Cell IgM Antibody for T-cell Subset Assay)

  • 하윤문;호순태
    • 대한미생물학회지
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    • 제18권1호
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    • pp.67-71
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    • 1983
  • Antisera to ox red blood cells were prepared by injection of ox red blood cell stroma without adjuvant in outbred white rabbits. Purified IgM fraction for T-cell subset assay was obtained from these rabbit anti-ox red blood cell stroma antisera by precipitation with 50% saturated ammonium sulphate followed by DEAE-Cellulose chromatography and Sephadex G-200 gel filtration. The serological identification of purified IgM fraction was achieved by immunoelectrophoresis with guinea pig antiserum against rabbit anti-ox red blood cell IgM antibody.

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吸着 크로마토그라피法에 의한 사람 ALpha-Fetoprotein의 分離 (Affinity Purification of Human Alpha-Fetoprotein)

  • Kang, Shin-Sung;Bang, Ok-Sun;Park, Tae-Kyu
    • 한국동물학회지
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    • 제29권4호
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    • pp.283-293
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    • 1986
  • 사람의 alpha-fetoprotein(AFP)에 대한 모노클론 항체의 생산 및 분석을 위하여, 태아조직을 재료로 추출법, DEAE-cellulose 및 concanavalin A-Sepharose, Cibacron blue F3GA-agarose, immunoadsorbent column등의 흡착크로마토그라피법에 의해 AFP를 분리하였다. 총 534g의 태아조직에서 AFP의 量은 8.76 mg으로서 순수분리되었음을 확인하였다.

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면역전기영동법에 의한 유구낭미충 낭액의 구성 단백질 분석 (Immunoelectrophoretic analysis of major component proteins In cystic fluid of Taenia solium metacestodes)

  • Yoon Kong;Seung-Yull Cho;Suk-Il Kim;Shin-Yong Kang
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제30권3호
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    • pp.209-218
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    • 1992
  • 혈청이나 뇌척수액에서 특이항체를 증명하여 유구낭미충증을 진단함에 있어 유구낭미충의 낭액이 가장 민감하고도 특이한 항원임은 이미 알려졌다. 낭액을 항원으로 사용하여도 다른 기생충증과 빈도는 낮지만 교차반응이 발생하므로 교차반응을 일으키는 구성단백질에 대하여 더 관찰할 필요가 있다. 이 연구에서는 유구낭미충 낭액을 Sephacryl S-300 Superfine 젤로 분획하고, 낭액 및 그 분획이 낭액을 면역시켜 만든 토끼 항혈청 (RACF)과 반응하는 양상을 면역전기영동법으로 관찰하여 낭액의 구성 단백질의 성질을 분석하고자 하였다. 유구낭미충 장액을 젤여과법으로 분획하면 제 3분회과 제 4분회에 단백질이 가장 많이 포함되었다. 제 3분획은 disc-PAGE상 분자량 150 kDa인 것으로 이미 알려진 Band C가 주(주) 구성 단백질이었다. 제 4분획은 분자량이 약 65kDa일 것으로 추정되는 Band N 단백질이 주 구성단백질이었다. 낭액에 대한 토끼 항혈청을 낭액과 면역전기영동법으로 반응시키면 주 침강대 2개와 작은 침강대 7∼8개를 형성하였는데 낭액의 제 3분획은 주 침강대 중 밖에 위치한 긴 침강대를 형성한 반면, 제4분획은 주 침강대 중 안쪽으로 위치한 짧은 침강대를 형성하였다. 유구낭미충과 혈청학적 교차반응을 가장 많이 일으키는 포충(포충, hydatid cyst)의 낭액과 RACF(유구낭미충 낭액에 대한 토끼 항혈청)을 면역전기영동법으로 반응시킨 바, 제 4분획이 반응한 위치에서 침강대를 형성하여 제 4분획의 주구성 단백질이 포충증과의 혈청학적 교차반응의 원인인 것으로 추정하였다. 유구낭미충증으로 이미 진단한 환자의 혈청 중 효소면역 측정 법으로 항체가가 매우 높았던 혈청 8개를 선택하여 유구낭미충 낭액 및 유구낭미충 충체 추출액과 각각 면역전기영동법으로 반응시킨 바 각각 7명에서 침강대를 형성하였고, 제 3분회 및 제 4분회으로 면역전기영동법으로 반응시킨 환자혈청 4개 중에서는 제 3분획에서는 4개 모두가 침강대를 형성한 반면 제 4분 회에서는 침강대가 혈청 2개에서 형성되었다.

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동남참게(Eriocheir japonicus)의 난황단백질 정제와 그 전구체의 합성부위 구명 (Purification of the Yolk Protein, and Identification of the Synthetic Site of Its Precursor in Eriocheir japonicus (Decapoda, Brachiura))

  • 한창희;배현환
    • 한국수산과학회지
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    • 제25권5호
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    • pp.432-442
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    • 1992
  • 동남참게, Eriocheir japonicus의 난황단백전구체 합성부위를 면역조직화학적인 방법으로 구명하기 위하여, 난황단백질을 정제하고, 이 단백질에 대한 항혈청을 제작하여 난황단백질에 대한 면역학적인 성질을 밝힌 후, 난황단백전구체의 항체가 존재하는 항 난황단백혈청을 사용하여 PAP(peroxidase-antiperoxidase)법으로 생식소, 간췌장, 근육조직을 대상으로 면역조직화학 반응을 시켰다. 성숙한 암, 수혈청에 대한 면역전기영동과 Ouch-terlony 면역확산 실험에 의하여 암혈청내에는 암 특이성혈청단백질이 있음이 밝혀졌다. 암, 수혈청에 대한 항혈청과 난황형성중인 암혈청에 대한 조난황단백추출액에 대하여 면역전기영동과 Ouchte-rlony 면역확산 실험을 행한 결과, 암 특이성혈청 단백질은 난황단백전구체임이 밝혀졌다. 조난황단백추출액으로 부터 DEAE 이온교환 chro-matography와 sepharose CL-4B gel 여과법에 의하여 난황단백질을 정제하였으며, 이 난황단백질의 분자량을 sepharose CL-4B gel 여과법에 의하여 추정한 결과 분자량은 약 245,000 dalton이었다. 또한 난황단백질은 면역학적인 분석에 의하여 난황 단백질에 대한 항혈청에는 난황단백전구체에 대한 항체가 존재하고 있음이 증명되었다. 난황단백질에 대한 토끼 항혈청을 이용하여 PAP법에 의한 면역조직화학반응을 시킨 결과, 난황형성중인 난모세포와 성숙한 암참게의 간췌장은 양성반응이 나타는데 반하여 난소내의 여포세포층과 난황형성전 난모세포, 근육층 그리고 성숙한 수참게의 간췌장은 전혀 양성반응이 나타나지 않았다. 따라서 본 종의 난황단백전구체의 합성부위는 간췌장임을 알 수 있다.

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Bacillus thuringiensig subsp, israelensis의 용혈성 약화 및 무포자 변이주의 분리 (Isolation of Oligosporogenous (Spo-Cry+)Mutant Containing Relatively tow Hemolytic Activity in $\delta$-Endotoxin from Bacillus thuringiensig subsp, israelensis)

  • 배점순;김광현
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제17권4호
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    • pp.273-276
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    • 1989
  • Bti 균주를 배양하여 포자와 $\delta$-endotoxin의 복합물을 직접 field에 적용시키면 미생물 생태계에 변화를 초래할 가능성이 있으며, 배양 후 포자로부터 $\delta$-endotoxin만을 분리할 경우에는 대량생산을 위한 기술적인 어려움이 있다. 또한 $\delta$-endotoxin은 용혈성 단백질을 함유하고 있어 Bti 균주로부터 무포자이며 $\delta$-endotoxin을 생산하는 변이주의 분리와 아울러 $\delta$-endotoxin의 용혈성 인자의 제거 또는 약화를 시도하였다. 그 결과 Bti 균주를 열처리시켜 SPO3 (Spo$^-$ Cry$^+$) 변이주를 분리 선별하고, 그 $\delta$-endotoxin의 모기유충에 대한 LC$_{50}$ 및 응혈성을 조사해 본 결과 LC$_{50}$는 약 20배, 용혈성은 약 25배정도 야생주의 $\delta$-endotoxin에 비해 약화되었다. 이는 변이주의 $\delta$-endotoxin내에 28KDa 단백질의 소실에 기인된 것이라 생각되며, 이는 면역확산반응과 면역전기영동 및 SDS-PAGE에 의해 확인되었다.

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IgG κMonoclonal Gammopathy of Undetermined Significance와 연관된 운동신경 다발성 신경병증과 다발선 뇌신경병증 (Sensorimotor Polyneuropathy and Multiple Cranial Neuropathies Associated with IgG κMonoclonal Gammopathy of Undetermined Significance)

  • 전성호;김윤봉;이영배;박종호;신원철;박현미;신동진
    • Annals of Clinical Neurophysiology
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    • 제6권1호
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    • pp.48-51
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    • 2004
  • The occurrence of polyneuropathy in association with monoclonal gammopathy of undetermined significance (MGUS) is quite common. However, reports of MGUS associated cranial neuropathies are rare. A 63 year-old women was presented with diplopia and swallowing difficulty. Neurological examination showed limitation of abduction of right eye, right peripheral facial palsy, decreased hearing and gag reflex, left side deviation of uvula, and decreased DTR. Sensorimotor polyneuropathy were observed with elctrophysiological studies. Protein and immunoelectrophoresis revealed IgG ${\kappa}$monoclonal gammopathy. She was treated with intravenous immunoglobulin and steroid, and her symptoms and signs were improved. This case suggested that she had sensorimotor polyneuropathy and multiple cranial neuropathies associated with IgG ${\kappa}$MGUS.

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인시목곤충의 성충체액 단백질에 관한 생리.생화학적 연구 II. 누에의 성충특이체액 단백질의 분리.정제 및 분자적 특성 (Physiological and Biochemical Studies on the Adult Heamolymph Proteins in Lepidoptera II. Purification and Molecular Properties of Adult Specific Protein in the Silkworm, Bombyx mori)

  • 이상몽;성수일
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제34권1호
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    • pp.30-34
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    • 1992
  • 누에의 성충특이체액단백질(adult specific protein : ASP)의 생리 생화학적 특성 및 성충화 발육에 따른 기능을 구명하기 위한 연구의 일환으로 ASP의 분리·정제 및 분자적 특성을 조사하였다. ASP는 Sephadex G-100 gel 여과 및 CM52 ion exchange chromatography에 의해 분리·정제되었으며, 정제된 단백질의 순도는 native-PAGE 및 면역전기영동에 의해 확인되었다. ASP는 분자량 19.5kDa 및 17.5kDa으로 추정되는 2종류의 subunits으로 구성되어 있고 또한 당 및 지질을 포함하지 않는 단순단백질임이 밝혀졌다.

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서울 및 경기도 지역 주민에서의 B형간염항원에 대한 조사(제 4 보) (Survey of Hepatitis B Surface Antigen in the Sera of Healthy Adults in Seoul and Gyunggi-Do)

  • 임병욱
    • 대한미생물학회지
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    • 제17권1호
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    • pp.1-6
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    • 1982
  • To investigate the annual distribution of hepatitis B surface antigen(HBs Ag) in healthy adults, this study was performed by means of counter-immunoelectrophoresis with sera obtained from 4,856 healthy adults who reside in Seoul and Gyunggi-Do area from January to December, 1981. The experimental procedures were same with the previous reports. The subjectives were consisted of two groups: one is mass life group(3.853 adults) and the other, home life group(1.003 adults). The results were as follows: 1. Among the 4.856 cases tested, 326 cases(6.71%) showed HBs Ag positive. HBs Ag positive rates in the group of mass life and home life were 6.51% and 7.48%, respectively. 2. It showed slightly high positive rates in the home life and long term duration group, and upper class group showed slightly high positive rate. 3. In seasonal variation, it showed relatively high positive rate(7.38%) in winter, and A blood group showed higher rate(7.60%) than the other blood groups. And then, boundary area of Seoul city showed slightly high positive rate(7.36%) in areal distribution.

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Characterization of Two Glucans Activating an Alternative Complement Pathway from the Fruiting Bodies of Mushroom Pleurotus ostreatus

  • Kweon, Mee-Hyang;Lim, Wang-Jin;Yang, Han-Chul;Sung, Ha-Chin
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제10권2호
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    • pp.267-271
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    • 2000
  • Abstract Two glucans (PONGa and PONGb) differing in their anomeric and glycosidic linkage structures were isolated from the water-insoluble materials (PON) of Pleurotus ostreatus basidiocarps, which activated the complement system and were almost soley composed of D-glucose. The isolatIon was achieved by repeated precipitations with ethanol and adsorption on concanavalin A (Con A) of paN suspension in thymol/NaCL Based on methylation analysis. IR, GLC-MS, $^1H,{\;}and{\;}^{13}C-NMR$ spectroscopies, PONGa was found to be a branched a-glucan composed of ${\alpha}-linked$ D-glucopyranose residues and ${\alpha}-linked$ units with 6-branching points, whereas PONGb was a linear ${\beta}-1,3-glucan$ composed mainly of ${\beta}-1,3-linked$ D-glucopyranose residues. The PONGb particles reacted more potently than the PONGa particles as C3 activator in alternative complement hemolysis and crossed-immunoelectrophoresis using anti-human C3, thereby suggesting that the complement activating components of PON were ${\beta}-(13)-glucans rather$ than ${\alpha}-glucan$ components.onents.

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천잠(Antheraea yamamai) Vitellin의 분리와 생화학적 특성에 관한 연구 I. Vitellin의 분리와 동정 및 배자발생에 따른 변동 (Studies on the Purification and Biochemical Properties of Vitellin in the Antheraea yamamai Guerin-Meneville I. Isolation and Purification of Vitellin and its Change to Embryonic Development)

  • 김철명;문재유
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제31권2호
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    • pp.72-81
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    • 1989
  • 천잠의 알에서 난황 주단백질인 vitellin을 분리·정제하고 가잠 및 상잠의 vitellin과 첨잠 nitellin과의 면역학적 특성을 비교하였으며 천잠의 배자발생에 따른 난내 vitellin의 변동을 조사하였다. 1. 전잠의 체액 vitellogenin은 유충기의 토사말기부터 검출되었다. 2. 점잠의 vitellinm은 가잠 및 상잠의 vitellin과 저기영동상의 이동도는 같았으나 면역학적인 특성에 있어서는 비동질성이었다. 3. 천잠 vitellin은 함량은 전체 가용성 난단백질의 46.0%였으며, 배자발생에 따른 vitellin의 변동은 산난후 8일까지는 같은 수준이었나, 10일 이후부터는 감소되는 경향을 보이다가 5개월된 난과 17개월된 난에서는 상당히 미량만이 검출되었다.

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