The sinoatrial (SA) node is a complex and inhomogeneous tissue in terms of cell morphology and electrical activity. There are two models of the cellular organisation of the sinoatrial node: the gradient and mosaic models. According to the gradient model there is a gradual transition in morphology and electrical properties of SA node cells from the centre to the periphery of the SA node. In the mosaic model, there is a variable mix of atrial and sinoatrial node cells from the centre to the periphery. This review focuses on the cellular organisation of the rabbit sinoatrial node in terms of the expression of connexin (Cx40, Cx43 and Cx45), L-type $Ca^{2+}$ channel and $Na^+-Ca^{2+}$ exchanger proteins. These immunocytochemical data, together with morphological and electrophysiological data, obtained from the intact sinoatrial node and isolated sinoatrial node cells support the gradient model of the cellular organisation of the SA node. The complex organisation of the sinoatrial node is important for the normal functioning of the sinoatrial node: (i) it allows the sinoatrial node to drive the surrounding hyperpolarized atrial muscle without being suppressed by it; (ii) it helps the pacemaker activity of the sinoatrial node continue under a wide range of physiological and pathophysiological conditions; (iii) it helps protect the sinoatrial node from reentrant arrhythmias.
Solar ultraviolet (UV) irradiation leads to distinct changes in the skin connective tissues by degradation of collagen, which is a major structural component in the extracellular matrix. UV irradiation induces the production of matrix metalloproteinases (MMP) capable of attacking native fibrillar collagen and responsible for inhibiting the construction of collagenous extracellular matrix. In this study, we attempted to investigate the protective actions of Rubus coreanus ethanol extract (RCE) on the MMP production and the consequent procollagen/collagen degradation in UV-B-irradiated human dermal fibroblasts. The analytical data showed that Rubus coreanus ethanol extract was mostly comprised of cyanidin 3-rutinoside. Pre-treatment of fibroblasts with this extract inhibited UV-B-induced production of MMP-1, MMP-8 and MMP-13 in dose-dependent manners. In addition, Western blot analysis and immunocytochemical staining assay revealed that RCE markedly augmented the cellular levels of procollagen/collagen declined in UV-B-exposed dermal fibroblasts. These results demonstrate that RCE blocks UV-B-induced increase of the collagen degradation by inhibiting MMP production. Thus, RCE may act as an agent inhibiting excessive dermal collagen degradation leading to the skin photoaging.
The gastrointestinal tract of three Percida, Lateolabrax japonicus, Epinephelus septemfasciatus and Mugil cephalus, was investigated immunocytochemically for the occurrence of somatostatin-. seotonin-, gastrin-, pancreatic polypeptide(PP)-, cholecystokinin-8(CCK-8)- and glucagon-immunoreactive cells. In Lateolabrax japonicus and Epinephelus septemfasciatus, five endorcrine cell types, such as somatostatin-, serotonin-, gastrin-, PP- and CCk-8-immunoreactive cells were demonstrated. In Mugil cephalus, however, six endocrine cell types, such as somatostatin-, serotnin-gastrin-, PP-, CCK-8- and glucagon-immunoreactive cells were detected. Somatostatin- and serotonin-immunoreactive cells were detected in the gastric mucosa of all species. Glucagon-immunoreactive cells were found only in the gastric mucoas of Mugil cephalus. In the pyloric caeca, PP-and CCK-8-immnuoreactive cells fo all species. gastrin-immunoreactive cells of Epinephelus septemfasciatus and Mugil cephalus, and serotonin-immunoreactive cells of Epinephelus septemfasciatus were demonstrated. In the intestinal mucosa of all species, gastrin-, PP- and CCK-8-immunoreactive cells were detected, and in the intestinal mucosa of Epinephelus septemfasciatus serotonin-immunoreactive cells were also detected. The frequency of these immunoreactive cells differs from each portion of the gastrointestinal tract of all species.
The endosperm protein, vicilin, of ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer) was purified by ammonium sulfate precipitaion, gel permeation and ion exchange column chromatography. Vicilin is a glycoprotein composed of 2 subunits with molecular masses of 55,000 (large subunit) and 44,000 (small subunit). The anti-vicilin antibody was raised in rabbit, and purified by DEAE Affi-Gel Blue affinity chromatography. The endosperm cells of the seed were reacted with this anti-vicilin antibody and colloidal gold conjugated secondary antibody. Gold particles were labelled on the elaborating granules of Golgi complex, electron-dense granules and protein bodies in the endosperm cells. These results indicated that the vicilin, which was synthesized in rough endoplasmic reticulum and transported to Golgi, was elaborated in saccules of the Golgi and then transported into protein bodies by electron-dense granules.anules.
The cytologic findings of endodermal sinus tumor of the ovary are reported. The cytologic preperations were obtained from ascitic specimens. The findings on Papanicolaou-stained smears included a clean background and poorly preserved atypical cells loosely arranged in irregular or papillary groups. At high magnification, the cells had ill-defined and microvacuolated cytoplasms, with an increased nuclear-cytoplasmic ratio and prominent nucleoli. Hyaline globules characteristic of the alpha-fetoprotein (AFP)-synthesizing cells of endodermal sinus tumor were observed within the cells with periodic-acid-Schiff(PAS) stain. The presence of PAS-positive hyaline globules can be regarded, therefore, as a diagnostic clue to endodermal sinus tumor in an appropriate clinical setting and in the presence of AFP production. The cytologic findings in a cell block is important, in addition to smears, to obtain more diagnostic clues. A preliminary cytomorphologic diagnosis of this highly malignant tumor is valuable as a guide in planning further immunocytochemical and serologic studies.
The present study was carried out to determine viral antigens and its morphogenesis in the ultrathin frozen and araldite sections of cell cultures infected with ADV by protein A-gold labeling. ADV antigens were labeled with 10nm gold probes, and electron-dense gold particles were mainly present on viral nucleocapsids and viral envelopes. Immunogold labeling in the ultracryosections showed a very low degree of interaction with tissue structures. Immunogold labeling in the ultrathin cryosections can be useful tool for the detection of ADV antigens, and the technique also may provide its great potential for immunocytochemical studies on various virus-host cell Interactions.
Kim, Sunshin;Sung, Ho Jin;Lee, Ji Won;Kim, Yun Hee;Oh, Yong-Seok;Yoon, Kyong-Ah;Heo, Kyun;Suh, Pann-Ghill
BMB Reports
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v.50
no.1
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pp.37-42
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2017
The tubby protein (Tub), a putative transcription factor, plays important roles in the maintenance and function of neuronal cells. A splicing defect-causing mutation in the 3'-end of the tubby gene, which is predicted to disrupt the carboxy-terminal region of the Tub protein, causes maturity-onset obesity, blindness, and deafness in mice. Although this pathological Tub mutation leads to a loss of function, the precise mechanism has not yet been investigated. Here, we found that the mutant Tub proteins were mostly localized to puncta found in the perinuclear region and that the C-terminus was important for its solubility. Immunocytochemical analysis revealed that puncta of mutant Tub co-localized with the aggresome. Moreover, whereas wild-type Tub was translocated to the nucleus by extracellular signaling, the mutant forms failed to undergo such translocation. Taken together, our results suggest that the malfunctions of the Tub mutant are caused by its misfolding and subsequent localization to aggresomes.
Although cerebellar Purkinje cells display spontaneous electrical activity in vivo and in slice experiments, the mechanism of the spontaneous activity generation has not been clearly understood. The aim of this study was to investigate whether cerebellar Purkinje cells of postnatal rats generate spontaneous electrical activity without synaptic inputs. Dissociated cerebellar Purkinje cells were used for reducing synaptic inputs in the present study. Cerebellar Purkinje cells with dendrites were dissociated from postnatal rats using enzymatic treatment followed by mechanical trituration. Spontaneous electrical activities were recorded from dissociated cells without any stimulus using whole-cell patch clamp configuration. Two types, spontaneously firing or quiescent, of dissociated Purkinje cells were observed in postnatal rats. Both types of cells were identified as Purkinje cells using immunocytochemical staining technique with anti-calbindin after recording. Spontaneously active cells displayed two patterns of firing, repetitive and burst firings. Two thirds of dissociated Purkinje cells displayed repetitive firing and the rest of them did burst firing under same recording condition. Repetitive firing activities were maintained even after further isolation using either physical or pharmacological techniques. Neither high magnessium solution nor excitatory synaptic blockers, AP-5 and DNQX, block the spontaneous activity. These results demonstrate that spontaneous electrical activity of isolated cerebellar Purkinje cells in postnatal rats is generated by intrinsic membrane properties rather than synaptic inputs.
Experimentally induced cortical disorganization exhibits many anatomical features which are characteristic of cortical malformations in children with early-onset epilepsy. We used an immunocytochemical technique and extracellular field potential recordings from the dorsal hippocampus to determine whether the excitability of the CA1 pyramidal cells was enhanced in rats with exnerimentallv induced hippocampal dysplasia. Compared with control rats, the MAM-treated rats displayed a decrease of paired pulse inhibition. When $GABA_A$ receptor antagonists were blocked with $10{\mu}M$ bicuculline the amplitude of the second population spike of the MAM-treated of rats was similar to that of the first population spike, as was in the control rats. The MAM-treated rats had fewer somatostatin and parvalbumin-immunoreactive neurons than the control rats. These results suggest that the enhanced neuronal responsiveness of the in vivo recording of the CA1 in this animal model may involve a reduction of CA1 inhibition.
Near full length cDNA clones encoding the rice seed storage protein, prolamine, were isolated and divided into two homology classes based on cross-hybridization and DNA sequencing analysis. These cDNA clones contain a single open reading frame encoding a putative rice prolamine precursor(M.W.=17,200) possessing atypical 14 amino acid signal peptide. Clones of these two homology classes diverge mainly by insertions/deletions of short nucleotide stretches and point mutations. The deduced primary structures of both types of prolamine polypeptides are devoid of any major tandem repetitive sequences, a feature prevalent in other cereal prolamines. No significant homology teas detected between the rice prolamine and other cereal prolamines, indicating that the rice gene evolved from a different ancestor that gave rise to other cereal prolamine genes. Developing wheat and rice endosperms were examined using ultrathin sections prepared from tissues harvested at various days after flowering. By immunocytochemical localization techniques, wheat prolamines are localized within vesicles from Golgi apparatus and in homogeneous regions of protein bodies. The involvement of the goli apparatus in the packaging of wheat prolamines into protein bodies indicates a pathway which differs from the mode of other cereal prolamines and resembles the mechanism employed for the storage of rice glutelin and legume globulins.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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