염색가공 폐수 중 난분해성 물질이 PYA를 처리 하기 위하여, 한천-acrylamide를 이용한 bead를 제 조한 후 air-lift 반응기에서 연속실험을 행하였다. 합성폐수의 PYA놓도가 $3,100mg/\ell$. 체류시간 24hr일 때 유출수의 농도는 $4500mg/\ell$ 이며, 제거효율은 85% 이상을 나타내었다. 실제 호발폐수의 경우 PYA 및 COD농도가 $3,253mg/\ell$, $4,500mg/\ell$일 때, 체류시간 24hr에서 유출수의 농도는 $840mg/\ell, 480mg/\ell$이며, 제거효 율은 81.3%와 85.2%로 각각 나타났다. bead의 지름이 lmm일 때는 내부의 미생물 성장 이 양호하였으나 bead의 지름이 2mm일 때는 기질 과 산소전달저항에 의하여 반지름의 48% 이상은 미 생물의 성장이 저해를 받았다. 고정화 반응기에서 전체 기질 제거속도 중 bead 내 고정화 cell의 제거 분율은 평균 70%로 나타났다. 현탁 반응기에서 희석율 $0.083hr^{-1}$ 이상에서는 기질 이용속도가 감소하였으나 고정화 반응기에서는 희석율 $0.125hr^{-1}$까지 거의 선형척으로 증가하였다. PYA 제거속도식에서 포화상수 $K_s=6.60(g PVA/\ell)$와 최대 비기질 이용속도 k=0.175(g PVA/g cell.hr)를 얻었다.
For the enhanced production of a cardiac glycoside, digoxin, using in situ adsorption by biotransformation from digitoxin in plant cell suspension cultures, selection of proper resins was attempted and the culture conditions were optimized. Among various kinds of resins tested, Amberlite XAD-8 was found to be the best for digoxin production in considering adsorption characteristics as well as the effect on cell growth. Adequate time for resin addition was determined to be 36 h from the beginning of biotransformation and the presence of resins should be as short as possible to increase the productivity. In addition, to prevent the cells from direct contact with resin particles, immobilized systems were designed and examined. Immobilization further improved the advantages of in situ adsorption. It was confirmed that the increase of the contact area for mass transfer was an important factor in utilizing an immobilized system to enhance digoxin production.
Goto, K.;Kinoshita, A.;Kuroda, A.;Nakanishi, Y.;Ogawa, K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제4권3호
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pp.251-254
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1991
Immobilized (killed) mouse spermatozoa or sperm head were microinjected into mouse oocytes matured in vivo and cultured for 72h in vitro. When non-capacitated spermatozoon was injected, oocytes that developed to $${\geq_-}$$ 2-cell and $${\geq_-}$$ 4-cell was 27.8 (15/54) and 3.7% (2/54), respectively. When non-capacitated sperm head was injected. development to $${\geq_-}$$ 2-cell and $${\geq_-}$$ 4-cell was 21.3 (16/75) and 8.0% (6/75), respectively. When capacitated spermatozoon was injected, development to $${\geq_-}$$ 2-cell and $${\geq_-}$$ 4-cell was 21.4 (15/70) and 4.3% (3/70), respectively. When capacitated sperm head was injected, development to $${\geq_-}$$ 2-cell and $${\geq_-}$$ 4-cell was 29.9 (35/117) and 10.3% (12/117), respectively. In contrast, none developed beyond 4-cell in the sham-operated group. The results of this study demonstrated that mouse oocytes matured in vivo can undergo normal appearing cleavage to 4-cell stage by dead-sperm injection. Sperm treatment prior to injection did not affect the ability of mouse oocytes to cleave in vitro.
Dissolved oxygen level of cell culture media has a critical effect on cellular metabolism, which governs specific productivity of recombinant proteins and mammalian cell growth However, in the cores of cell aggregates or cell-immobilized beads, oxygen level frequently goes below a critical level. Mammalian cells have a number of genes induced in the lower level of oxygen, and the genes contain a common cis-acting element (-RCGTG-), hypoxia response element (HRE). By binding of hypoxia inducible factor-l (HIF-I) to the HRE, promoters of hypoxia inducible genes are activated, which is a survival mechanism. In this work, to develop a CHO cell capable of producing recombinant proteins in immobilization and high density cell culture efficiently, mammalian expression vectors containing human tissue-type plasminogen activator (t-PA) gene controlled by HRE were constructed and stably transfected into the CHO cells. In $Ba^{2+}$ -alginate immobilization culture, CHO/pCl/dhfr/2HRE-t-PA cells produced 2 folds higher recombinant t-PA activity than CHO/pCl/dhfrlt-PA cells without $CoCl_2$ treatment. Furthermore, in repeated fed batch culture, productivity of t-PA in immobilized CHO/pCI/dhfr/2HRE-t-PA cells was 121 ng/ml/day, total production of 0.968 mg/day at 11 days culture while CHO/pCIIdhfrlt-PA cells was 22.8 ng/ml/day. All these results indicate that HRE is very useful for the enhancement of protein productivity in mammalian cell cultures.
식물세포인 Lithospermum erythrorhizon을 교반 반응기와 calcium alghinate에 고정화된 상태로 충전층 반응기에서 n-hexadecane으로 동시 추출하면서 shikonin을 생산하여 각각의 생산성을 비교하였다. 교반 반응기에서 shikonin의 비생산과 부피생산성은 각각 1.5mg shikonin/g cell과 400$\mu g$ shikonin/(L.day)였고 충전층 반응기에서는 가각 2.0mg shikonin/g cell과 2857 $\mu g$ shikonin/(L.day)였으며 이는 각각 교반 반응기에 비하여 1.3, 7.1배 높은 것이다. 충전층 반응기에서 shikonin의 생산성이 높은 것은 calcium alginate 입자에 세포가 고농도고 축적되어 단위 반응기 부피당 세로의 부하 능력이 높고 또한 세포가 서로 접촉하기가 쉽고 고정화 입자내의 환경이 세포가 분화하기에 좋은 조건을 형성하기 때문인 것으로 사료된다.
Using a murine T cell hybridoma, activation-induced cell death (AICD) was studied. As an in vitro model system for the AICD, 1 cell hybridoma expressing TCR/CD3 complex was incubated onto the immobilized purified anti-CD3 antibody. The immobilized anti-CD3 antibody induced AICD effectively up to 40%. At 1-100 $\mu$M range of SNP, an exogenous source of nitric oxide (NO), the cell proliferation was not affected, but at 1 mM SNP, cell proliferation was significantly reduced. The AICD of T cell hybridoma was inhibited by exogenous NO at non-cytotoxic concentration, In the cells undergoing AICD, the expressions of caspase-3 and FasL were detected, but not iNOS. Similar result was recognized in the apoptosis induced by dexamethasone, an apoptosis-inducing agent. However, the conversion from the inactive form of caspase-3 (32 kDa) to the active form (17 kDa) was significantly reduced in the cells in AICD induced by anti-CD3 antibody, With the result of increased PARP cleavage in the cells, we propose that another PARP cleavage pathway not involving caspase-3 may function in the anti-CD3 antibody induced AICD in the T cell hybridoma.
Lee, Sang-Eun;Lee, Choon Geun;Kang, Do Hyung;Lee, Hyeon-Yong;Jung, Kyung-Hwan
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제22권12호
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pp.1673-1680
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2012
In this study, DEAE-corncobs [delignified corncob grits derivatized with 2-(diethylamino)ethyl chloride hydrochloride ($DEAE{\cdot}HCl$)] were prepared as a carrier to immobilize yeast (Saccharomyces cerevisiae) for ethanol production. The immobilized yeast cell reactor produced ethanol under optimized $DEAE{\cdot}HCl$ derivatization and adsorption conditions between yeast cells and the DEAE-corncobs. When delignified corncob grit (3.0 g) was derivatized with 0.5M $DEAE{\cdot}HCl$, the yeast cell suspension ($OD_{600}$ = 3.0) was adsorbed at >90% of the initial cell $OD_{600}$. This amount of adsorbed yeast cells was estimated to be 5.36 mg-dry cells/g-DEAE corncobs. The $Q_{max}$ (the maximum cell adsorption by the carrier) of the DEAE-corncobs was estimated to be 25.1 (mg/g), based on a Languir model biosorption isotherm experiment. When we conducted a batch culture with medium recycling using the immobilized yeast cells, the yeast cells on DEAE-corncobs produced ethanol gradually, according to glucose consumption, without cells detaching from the DEAE-corncobs. We observed under electron microscopy that the yeast cells grew on the surface and in the holes of the DEAE-corncobs. In a future study, DEAE-corncobs and the immobilized yeast cell reactor system will contribute to bioethanol production from biomass hydrolysates.
Kim, Jung-Hoon;Rene, Eldon R.;Park, Seung-Han;Park, Hung-Suck
Environmental Engineering Research
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제11권5호
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pp.285-291
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2006
Biofiltration is a simple, effective, economically viable and the most widely used gas treatment technique for treating malodors at low concentrations and high flow rates. This paper reports the performance of two lab scale immobilized cell biofilters operated in continuous mode for hydrogen sulfide ($H_2S$) and ammonia ($NH_3$) removal. The removal efficiency (RE, %) and the elimination capacity (EC, $g/m^3{\cdot}hr$) profiles were monitored by subjecting the biofilters to different loading rates of $H_2S$ (0.3 to $8\;g/m^3{\cdot}hr$) and $NH_3$ (0.3 to $4.5\;g/m^3{\cdot}hr$). The removal efficiencies were greater than 99% when inlet loading rate to the biofilters were upto $6\;gH_2S/m^3{\cdot}hr$ and $4\;gNH_3/m^3{\cdot}hr$ respectively. The performance of the biofilters were also ascertained by conducting shock loading studies at a loading rate of $10\;gH_2S/m^3{\cdot}hr$ and $6\;gNH_3/m^3{\cdot}hr$. The results from this study show high removal efficiency, good recuperating potential and stability of the immobilized microbial consortia to transient shock loads.
고생산성의 알콜 발효용 생물반응기를 개발하기 위하여 sodium alginate로 효모균체를 고정화시킨 후 충전탑 반응기를 제조하였다. 이 때 gel속에 고정화되어 있는 세포에 산소를 공급하기 위하여 배지를 공기로 포화시킨 후 공급하였다. 그 결과 9% 포도당을 함유한 배지를 사용하였을 경우 최대 알콜생산성은 35g/$\ell$-gel-hr에서 55g/$\ell$-gel-hr로 증가되었고 90%의 전환율을 얻는데 걸리는 시간도 40분에서 25분으로 감소되었다. 즉 고정화세포 충전탑 반응기에서도 배지에 어느 정도의 산소를 공급하면 세포활성의 증가로 발효속도가 현저히 촉진됨을 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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