In this study, we measured the complex efficiency of a physiologically active antibody, a chelator and radiosiotopes using the ESI-TOF/Ms system for develop good radiopharmaceuticals. For a precise measurement, TLC is a low accuracy method. Loading of same amount of sample is difficult for each test, and work to quantify accurately the results obtained through TLC cannot be afforded compared to the use of other analytical instruments. The method of analysis using a mass spectrometer is capable of a mass analysis of proteins for quantitative analysis. The conjugates of the chelator (CHX-A- DTPA) and the antibody (IgG) were separated through MWCO, and were analyzed using ESI-TOF and MALDI-TOF mass spectrometry. The analysis using MALDI-TOF is roughly divided into measurements on mass spectrometry. When conjugating a small molecular weight of CHX-A-DTPA and a large molecular weight of IgG, distinguishing the peak of the conjugate and the peak of IgG was difficult. However, an ESI-TOF mass spectrometer system is capable of an analysis of mass by decentralizing the IgG. It is utilized as a technique for measuring the metabolic processes during conjugation and the stability evaluation of radiopharmaceuticals. When establishing this technique, the accuracy of the overall radiophar-maceutical analysis is expected to be able to be improved.
Repeated injections of low-doses of mercuric chloride in rats or mice induce polyclonal activation which includes the induction of anti-glomerular basement membrane (GBM) antibodies and circulating immune complex and it results in nephritis. Because this disease is autoimmune mediated disease resulted from immune dysfunction, immunomodulators are used to control the symptoms or to cure the disease. Irpex lacteus Fr. is a kind of new medicinal fungus. The polysaccharide fraction extracted from submerged fermentation of Irpex lacteus Fr. decreased the serum agglutinin, serolysin and IgM plaque forming cells in normal mice. The hitherto obtained clinical results suggested that it significantly improved the oligourea, edema, and hypertension in patients who have nephritis. To elucidate the action-mechanisms of Irpex lacteus Fr., we established the experimental model of HgCl$_2$induced polyclonal activation by intraperitoneal administrations of HgCl$_2$to mice. To assess the immunomodulating effect of Irpex lacteus fraction, we Investigated its effects on the mitogen induced proliferation and IgM PFC counts of splenic lymphocytes in mice during the treatment of HgCl$_2$. The Irpex lacteus polysaccharide reduced the abnormally increased mitogen induced Iymphocyte proliferation and IgM PFCs to almost normal levels. And the Irpex lacteus polysaccharides prevented the increasement of serum immunoglobulin level induced by HgCl$_2$. These data suggested that the Irpex lacteus polysaccharides might have the immunomodulating activity to prevent and /or improve the HgCl$_2$ induced autoimmune disease.
Purpose: Celiac disease, an autoimmune enteropathy triggered by exposure to gluten, is not uncommon in South Jordan. However, its prevalence is underestimated due to lack of physician awareness of the diversity of disease presentation. The clinical spectrum includes classic gastrointestinal manifestations, as well as rickets, iron-deficiency anemia, short stature, elevated liver enzymes, and edema. Our goal was to evaluate celiac disease presentation in clinically diagnosed children. Methods: Retrospective study included all children diagnosed with celiac disease between September 2009 and September 2015. Hospital charts were reviewed. Demographic data, clinical characteristics, and follow-up were recorded. Results: Thirty-five children were diagnosed with celiac disease during the study period. Mean age${\pm}$standard deviation was $6.7{\pm}3.8$ years (range, 2.0-14 years). There were 17 (48.6%) female patients. The average duration between onset of symptoms and diagnosis was $16.3{\pm}18.7$ months. Fifteen (42.9%) patients presented with classic malabsorption symptoms, whereas 7 (20.0%) patients presented with short stature. Positive tissue transglutaminase antibodies (tTg)-immunoglobulin A (IgA) was seen in 34 (97.1%) patients. The one patient with negative tTg-IgA had IgA deficiency. Although tTG-IgA values were not available for objective documentation of compliance, clinical data (resolution of presenting abnormalities and growth improvement) assured acceptable compliance in 22 (62.9%) patients. Conclusion: CD in children may present with diverse picture. Although of the small number, the non-classical presentations are not uncommon in our rural community. Gluten-free diet is the main strategy for treatment and associated with usually correction of laboratory abnormalities and improvement of growth.
Background: Korean ginseng is a well-known medicinal herb that has been widely used in traditional medicine to treat various diseases, including asthma. Ginseng can be classified as white ginseng (WG) or red ginseng (RG), according to processing conditions. In this study, the authors compared the efficacies of these two ginseng types in a mouse model of acute asthma. Methods: To produce the acute asthma model, BALB/c mice were sensitized with ovalbumin (OVA) and aluminum hydroxide, and then challenged with OVA. WG and RG extracts were administered to mice orally. The influences of WG and RG on airway hyperresponsiveness (AHR), immune cell distributions in bronchoalveolar lavage fluid (BALF), and OVA-specific immunoglobulin E (IgE), IgG1, and IgG2a in serum were investigated. Cytokine production by lymphocytes isolated from peribronchial lymph nodes and histopathological changes was also examined. Results: In OVA-sensitized mice, both WG and RG reduced AHR and suppressed immune cell infiltration in bronchoalveolar regions. BALF OVA-specific IgE levels were significantly lower in RG-treated OVAsensitized mice than in the OVA-sensitized control group. WG and RG also suppressed inflammatory cytokine production by peribronchial lymphocytes. Histopathological findings showed reduced inflammatory cell infiltration and airway remodeling (e.g., epithelial hyperplasia) in WG- and RG-treated OVA mice compared with OVA controls. Conclusion: In this study, WG and RG showed antiasthmatic effects in an OVA-sensitized mouse model, and the efficacies of RG were found to be better than those of WG.
본 연구는 육계사료 내 quercetin의 첨가가 육계의 생산성, 혈액 생화학적 성상, 면역 및 혈액 항산화 활성에 미치는 영향을 조사하기 위하여 수행하였다. 공시계는 1일령 육계 수평아리(Ross ${\times}$ Ross 308) 320수를 선별하여 육계초기(0~3주령)와 육계후기(3~5주령)의 35일 동안 시험을 실시하였다. 시험설계는 8처리구(C(-), 대조군; C(+), 항생제 처리군; T1, 비타민 E 20 ppm 처리군; T2, 비타민 E 200 ppm 처리군; T3, quercetin 20 ppm; T4, quercetin 200 ppm; T5, methoxylated quercetin 20 ppm; T6, methoxylated quercetin 200 ppm)를 처리구당 4반복, 반복당 10수씩으로 나누어 완전임의 배치하였다. 사료 섭취량과 사료 요구율은 quercetin 첨가에 따른 유의적인 차이가 없었다. 증체량은 quercetin 200 ppm 처리구가 높았으나, 유의적인 차이는 볼 수 없었다. 혈액 생화학 조성은 creatinine과 BUN이 무항생제 첨가구에 비해 유의적으로 감소하였다(P<0.05). 혈액 내 immunglobulin인 IgA, IgG 및 IgM 농도는 quercetin이나 methoxylated quercetin 첨가구가 무항생제 첨가구에 비해 유의적으로 감소하였다(P<0.05). 혈액 내 항산화 인자를 조사한 결과, quercetin 및 methoxylated quercetin 첨가구에 따라 SOD 활성이 높았으며, 특히, quercetin 200 ppm 처리구에서 가장 높게 나타났다(P<0.05). MDA는 무항생제 첨가구에 개선되는 경향을 보였으나, 처리구 사이에서 유의적인 차이는 없었다. 이런 결과들은 사료 내 quercetin의 첨가가 육계 생산성 및 혈액 대사에 효과를 보이며, 최적 수준은 20 ppm 이상이라는 것을 보여주고 있다.
Purpose : To investigate the effects of the lavender, lemon and eucalyptus oil mixture on the atopy dermatitis skin lesions induced on NC/Nga Mice by dinitrochlorobenzene (DNCB). Material and Method : For this purpose, we fabricated the oil mixture blending three essential oils (lavender, lemon, eucalyptus : ELL) with one carrier oil (jojoba) and apply it on the atopic dermatitis skin lesions of NC/Nga Mice. Atopic dermatitis in NC/Nga Mice was induced by DNCB treatment on the dorsal skin of mice for 8 weeks. The mixture of ratio of each essential oil drop was 1 (eucalyptus) : 2 (lemon) : 2 (lavender) and this mixture was blended with jojoba oil 50ml (0.025%). The ELL-ointment was supplied for 8 weeks. We evaluated the effects of ELL on cell viability of mouse lung fibroblast, clinical skin features and severity, the level of serum Immunoglobulin (Ig) E & Ig G1, Interleukin (IL)-4, IL-13 and Interferon (IFN)-$\gamma$. Results : ELL showed safety on the cell viability of mouse lung fibroblast compared with control group. The cell viability was measured by SRB method. The effects of ELL on clinical skin features and severity in DNCB-induced dermatitis model of NC/Nga mice was significant compared with control group. EEL also showed significant effects on clinical symptom score compared with control group. Serum IgE & IgG1 level and development of atopy dermatitis skin lesions were evaluated. Serum IgE & IgG1 production was significantly down-regulated in EEL group compared with control group. ELL also down-regulated the levels of IL-4 and IL-13, and up-regulated the level of IFN-$\gamma$ compared with control group significantly. Conclusion : ELL was effective on atopy dermatitis by modulating Th2 related factors.
식물세포의 느린 생장과 낮은 생산량의 이유로 지금까지 는 주로 미생물이나 동물세포에서 유전자 재조합 단백질을 생산하여 왔다. 그러나 저렴한 배지 가격, 동물 유래 바이러스 감염 위험성으로부터의 안정성, glycosylation 등의 post-translational modification이 가능하다는 장점들로 인하여 최근 들어 식물세포배양은 생물학적 활성을 가진 고부가가치의 단백질을 생산하는데 많이 이용되고 있다. 본 연구에서는 생장배지에 첨가했던 sucrose의 소비와 induction 배지로의 교환에서 오는 배지내의 삼투압을 조절하여 hCTLA4-Ig의 생산성을 높이고자 하였다. 다양한 삼투압 조절제 첨가 실험을 통해 sorbitol을 선별하고, 40 mM의 sorbitol 첨가에서 상대적으로 높은 생존도와 induction 후 7일째 대조구보다 1.7배 높은 생산성을 확인하였다. 또한, 저농도의 glucose 첨가를 통한 생산성 증대에 있어서는 8 mM glucose에서 induction 이후에도 높은 세포농도를 유지하면서 최대 37.3 mg/L까지 hCTLA4-Ig 생산량을 증가시켰다. 5-L bioreactor에서 회분식 배양과 induction시의 hCTLA4-Ig 생산량을 비교한 결과 induction시 배양 18일째 최고 45.3 mg/L까지 높일 수 있었으며, 회분식 배양에 비해 2.1배 증가됨을 확인하였다.
여러가지 방법으로 난백을 처리하고 난백 중 주요한 알레르겐인 OM의 알레르기성 변화를 계란 알레르기 환자의 IgE 항체를 이용한 간접경합 ELISA로 조사하였다. 12종의 효소를 이용한 가수분해, 방사선조사, succinic anhydride 처리는 OM의 알레르기성을 효과적으로 감소시키지 못 하였다. OM의 당쇄를 제거하는 TFMS의 처리는 OM의 알레르기성을 1/20 정도로 감소시켰다. $100^{\circ}C$에서 10분간의 열처리는 알레르기성을 감소시키지 못하였으나 $121^{\circ}C$(10분)의 처리는 난백 중 OM의 알레르기성을 1/100정도로 감소시켰다. NaOH 단독 처리는 3%(w/v) 이상에서 알레르기성이 대부분 사라졌고, NaOH(0.3%(w/v) 이상)와 열($70^{\circ}C$,15 min)의 복합처리는 알레르기성을 1/10,000 이하로 낮춤으로써 가장 효과적인 감소를 보였다. 본 연구에서 환자의 IgE 항체를 이용한 ELISA 분석결과와 동일 시료에 대한 토끼 IgG 항체의 ELISA 결과는 대체적으로 비슷한 결과를 보였지만, TFMS 처리물에 대한 반응성은 후자에서 훨씬 많이 감소되어(1/10,000) 대조적이었다. 이는 식품의 항원성과 알레르기성 간에는 약간의 차이가 있음을 시사하였다.
Antiphospholipid antibody is an immunoglobulin which may be of any class and which reacts with any phospholipid. For clinical use the definition of the term anti-phospholipid antibody is usually restricted to IgG and/or IgM antibody directed against the negatively charged phopholipids, cardiolipin, phosphatidyl inositol, phosphatidyl serine, or phosphatidic acid. The antigen of the serological test for syphilis is cardiolipin; negatively charged phopholipids are understood to be antigens to which lupus anticoagulants are directed. The term 'anticardiolipin' antibody syndrome, 'antiphospholipid' antibody syndrome, and 'lupus anticoagulant' syndrome are often, imprecisely, used interchangeably. We have experienced a case of recurrent spontaneous abortion with antiphospholipid antibody. So we report this case with a brief review of literatures.
Background: Immunoglobulin (Ig) light chain repertoire has been implicated as a critical determinant in regulation of autoreactive B cells and production of pathogenic anti-DNA antibodies in systemic lupus erythematosus (SLE). We analyzed the impact of Ig ${\lambda}$ chain repertoire on development of autoimmunity in patients with SLE. Methods: We obtained genomic DNA from individual peripheral CD19+ B cells of 3 untreated active SLE patients, and amplified $V{\lambda}$ rearrangements from each single cell by polymerase chain reaction. Results: A total number of 208 $V{\lambda}J{\lambda}$ rearrangements were analyzed. Analyzed sequences included 158 productive rearrangements and 50 nonproductive rearrangements. The differences in $V{\lambda}$ gene usage in the productive and nonproductive repertoire of SLE patients were found compared to the non-autoimmune individuals. $V{\lambda}$ gene, 9A was significantly overrepresented in nonproducative repertoire of SLE patients (P=0.016). In the productive repertoire, $V{\lambda}$ genes, 3L and 1E were found more often in the SLE patients (P=0.001, P=0.043). When the productive and the nonproductive repertoires were compared, 9A was found significantly less in the productive repertoire in the SLE patients (P=0.000). There were no significant differences in the $J{\lambda}$ gene usage between SLE patients and non-autoimmune individuals, but $J{\lambda}2/3$ gene was the most frequently used in SLE, whereas $J{\lambda}7$ gene was the most frequently used in the normal subjects. In the productive SLE $V{\lambda}$ repertoire, 9.4% of the total sequences employed identical CDR3. It was particularly striking to find 7 identical versions of the 1G-$J{\lambda}2/3$$V{\lambda}J{\lambda}$ rearrangements from one patient and 3 of the same sequence from another patient. Notably, identical $V{\lambda}$ junctions in the SLE patients utilized significantly more homologous joining compared to $V{\lambda}$ junctions of the normal adults (P=0.044). Conclusion: These data demonstrate regulation of ${\lambda}$ light chain expression in the SLE patients by selection of unique $V{\lambda}$ genes. Also, biased selection and clonal expansion of particular $V{\lambda}$ rearrangements are apparent in the SLE ${\lambda}$ repertoire.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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