Erythropoietin(EPO)는 혈액의 구성성분 중에서 적혈구 세포 증식에 중요한 기능을 한다고 알려져 있으며, 최근에는 암, 에이즈의 치료 등에도 효과가 있는 것으로 확인되고 있다. 따라서 본 연구팀은 지금까지 hEPO 유전자를 이용하여, 형질전환 돼지 "새롬이"의 생산에 성공한바 있다. 새롬이의 정액을 활용하여 인공수정을 실시 새롬이의 Fl를 24두 생산하였다. 이에 대하여 "형질전환 돼지의 계대번식시 유전자 전이효율에 관한 연구"라는 제목으로 발표 할 예정이며, 형질전환에 사용된 promoter가 WAP이므로, Fl이 임신, 분만을 하여야만 유즙을 통하여 hEPO물질을 생산할 수 있다. 따라서, Fl(♂)$\times$Fl(♀)의 교배에 의하여 5두가 임신, 분만을 하였으며, 이들 중 1두는 분만 후 21일에 폐사하였으며, 나머지는 현재 정상적으로 사육되고 있다. 이들 5두에 대하여 분만 후 유즙을 채취하여 유즙속에 EPO의 발현여부를 검토하였다. EPO-ELISA kit(medac)를 사용하여 분석결과, 유즙을 8,000배로 희석을 하여야만 Standard curve(1.25~160 mIU/$m\ell$)안에서 EPO의 단백질 발현을 검출할 수 있었다. 5두의 각각 농도는 28, 58, 17, 37, 27 IU/${\mu}\ell$ 였다. 또한 cDNA EPO와 genome EPO를 CHO 동물세포에서 생산하여 10배로 농축한 결과 5.5와 11 IU/${\mu}\ell$의 농도로 유즙과 비교하면 약 20~30배의 낮은 발현양을 나타내었으며, 또한 이러한 결과는 소변에서의 결과(1.1 IU/$m\ell$)보다는 약 30,000배 이상 높은 발현량을 화인 할 수 있었다. 현재, 이들 유즙 물질을 활용 빈혈 질환실험동물을 이용하여 생리활성을 검정, 체내에서 metabolic clearance rate(MCR)를 검토 중에 있다. 또한 F2의 자돈생산은 모돈 5두에서 총 25두가 생산되었는데, 이중 20두 약 80%가 EPO 유전자의 전환율을 나타내었다. 이상을 종합하면, 1) 돼지이용 생리활성물질(EPO)을 유즙에서 대량으로 생산할 수 있는 system의 활용가능성을 국내에서 처음으로 확인하였으며, 2) EPO에 있어서는 국제적으로도 형질전환 가축생산은 최초로 성공하였으며, 현재로서는 생산되어진 물질의 정제수준에 따라 활용가치가 결정되어 질 것으로 사료된다. 생리활성 물질을 생산할 수 있는 형질전환 돼지 생산의 성공은, 앞으로 형질전환 가축생산 뿐 만 아니라, 장기이식 및 복제돼지 생산의 활용 면에서의 응용가능성이 기대된다.
Park, Young-Shik;Kim, Hyun-Kyu;Lim, Seo-Kyu;Park, Kyung-You;Lee, Hyeon-Yong
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.22
no.4
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pp.389-394
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1994
8 X 10$^{6}$(viable cells/ml) of maximum cell density and 9000(IU/ml) of $\gamma$-IFN production were obtained at 55(ml/hr) of a perfusion rate by cultivating HSF cells using a moving membrane aeration bioreactor. This system proves to be an efficient culture process by maintaning 90% of viable cells during the whole cultivation periods. The metabolic molar quotient of glucose to lactate was 0.81 for overall ranges of glucose consumed while the evolution of ammonia was not linearly related to the consumption of glutamine. Low molar conversion ratio was observed in low consumptions of glutamine and high molar conversion ratio in high comsumptions. It also shows that the glutamolysis plays important role in the steady state conditions by evolving larger quantities of ammonia than lactate. At the above of 50 rpm, which is the optimum agitation speed for this bioreactor, the cell growth was severely affected while the IFN production was less decrea- sed, maintaing 1.5 X 10$^{-3}$(IU/cell/day) specific IFN production rate. The cumulatvie $\gamma$-IFN production was 7.2 X 10$^{8}$(IU) for 70 days of the cultivation, which yields 1 X 10$^{7}$ (IU/day) of IFN production rate. Therefore, a commercial production of $\gamma$-IFN by this culture process can be achievable by maintaining the above IFN productivity in a scaled-up culture system.
Chae, Hyo Ju;Rhee, Nu Ga;Kim, Hyun Jong;You, Je Sung;Chung, Sung Phil;Lee, Hahn Shick
Journal of The Korean Society of Clinical Toxicology
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v.10
no.2
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pp.97-102
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2012
Purpose: Serious acetaminophen (AAP) poisoning causes hepatotoxicity. N-acetylcysteine (NAC) is the most effective therapy for AAP poisoning and can be administered orally and intravenously (IV). Several studies have compared the efficacy of these two routes of administration and the results have been controversial. The purpose of this study was to compare the efficacy of oral and IV NAC for the prevention of hepatic toxicity in Korean patients whose serum AAP levels were higher than normal. Methods: A retrospective before/after study was performed, in which the patients presented to the emergency department with an AAP overdose from February 1995 to March 2012. A 3-day oral NAC regimen was used in the beginning, and a 20-hr intravenous regimen was then used from 2007. This study assessed the complications of an AAP overdose, such as hepatotoxicity, hepatic failure and renal failure as well as the side effects of the treatment regimen. Results: A total of 41patients was enrolled in this study. The median ALT and AST were 63 (IU/L) and 57 (IU/L) for the oral NAC treated patients, and 14 (IU/L) and 20 (IU/L) for the IV NAC treated patients (p=0.004 and p=0.001, respectively). The incidence of complications was similar in the treatment groups (p=0.399). Among the patients, 7 patients developed hepatotoxicity and were treated successfully with oral or IV NAC. Conclusion: This study suggests that IV NAC and oral NAC can prevent and successfully treat hepatic toxicity in patients whose serum AAP levels are higher than normal.
Lee, Kyung-Min;Lee, Yeon Joo;Won, Eun-Sook;Lee, Sang Sun
The Korean Journal of Food And Nutrition
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v.27
no.4
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pp.570-580
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2014
The purpose of this study was to investigate the effect of calcium (Ca) and vitamin D (vit. D) levels on metabolism of various minerals such as Ca, P, Mg, Fe, Zn, Cu, and Cr. The comparison was made on the rats that were placed on diet containing powdered skim milk with different Ca and vit. D levels for 5 weeks. A total of 42 5-week-old Sprague-Dawley rats were divided into 7 groups as follows: Control group consisted of normal Ca and normal vit. D (0.5% Ca, 1,000 IU vit. D); Experimental groups were divided into low (0.25%) and high (1.0%) calcium levels; and vit. D group was divided into low (10 IU), normal (1,000 IU), and high (5,000 IU) subgroups. The weight gain and food efficiency ratios of the rats were not significantly different with increasing dietary Ca levels. The absorption rates of 7 minerals (Ca, P, Mg, Fe, Zn, Cu, and Cr) were significantly decreased with increasing dietary Ca levels. Also, fecal excretion of P significantly increased with increasing dietary vit. D levels (p<0.05), and urine excretion of Fe was significantly increased with increasing dietary vit. D levels (p<0.001). The result indicated that higher Ca intake affected on bioavailability of other minerals, due to interactions among minerals in the process of intestinal absorption. However, vitamin D intake had no effect on bioavailability of several minerals. Therefore, it could be suggested that adequate Ca intake is important for balance of the minerals.
This study was performed to induce the estrus in 9 anestrus Shih-tzu bitches by intramuscular injection of pregnant mare serum gonadotrophin (PMSG) 50IU/kg for 10 consecutive days and by intravenous injection of human chorionic gonadotrophin (hCG) 1,000IU/Head on Day 10. The day when the first injection of PMSG was counted as Day 0 of experiment. All of the bitches were monitored by vaginal discharges, displays the perineal region, vaginal swelling and male acceptances. The 9 bitches (100%) showed vaginal discharges and vaginal swelling, and were mated. The 5 bitches out of 9 bitches were pregnant (55.6%) and 4 bitches were non-pregnant (44.4%). The 3 bitches out of 5 pregnant bitches were spontaneously delivered (33.3%) and litter size were $1.66{\pm}1.15\;(1{\sim}3\;pups)$ pups. The 2 bitches were diagnosed as early embryonic death on days 38 and 41 after first injection of PMSG. These results indicated that rates of estrus induction, pregnancy and delivery were 100%, 55.6% and 33.3%, respectively, using PMSG and hCG.
The activity of lactate dehydrogenase in plasma and various tissues(skeletal muscle, cardiac muscle, liver, lung, kidney and spleen) of Korean native cattle in a Chonju abattoir, the Breeding Stock Farm and Animal Farm of Chonbuk University was determined by using ultra violet method. Using polyacrylamide gel electrophoresis, the lactate dehydrogenase isoenzyme distrimution of plasma and various tissues in Korean native cattle was studied. The plasma lactate dehydrogenase activity of Korean native cattle was $554.80{\pm}92.70IU/l$ and the lactate dehydrogenase activity of male plasma was $543.96{\pm}97.89IU/l$, which was lower than that of female plasma, $579.19{\pm}78.09IU/l$. The plasma lactate dehydrogenase activity of calf was $557.31{\pm}110.27IU/l$ and was no significantly different from that of adult Korean native cattle. But the range of calf lactate dehydrogenase activity was larger than that of adult Korean native cattle. In tissues, the lactate dehydrogenase activity was decreased in order of lung, kidney, spleen, liver, heart and skeletal muscle. The lung had the greatest activity and the skeletal muscle had the least. Lactate dehydrogenase isoenzymes in plasma and tissues were found to have a characteristic distribution and quantitative isoenzyme patterns. In plasma, the LDH1 usually had the greatest activity and other isoenzymes showed a decreasing tendency in order of LDH2, LDH3, LDH4 and LDH5. The distribution of lactate dehydrogenase isoenzymes had a wide variation in tissues. But the distribution of LDH isoenzymes in plasma was similar to that in kidney, and also cardiac muscle and spleen had similar pattern in LDH isoenzymes distribution.
This study surveyed 146 obese elementary school children(94 male and 52 female) in Seoul, and measured height, body weight, degree of obesity, blood pressure, fasting blood sugar, serum lipid profiles and liver function. The hypertension was above 95 percentile depending on age and sex. and the hyperglycemia was defined as above 110mg/dl. The hypercholesterolemia and hypertriglyceridemia were defined as above 200mg/dl, 160mg/dl, repectively. The abnormal liver function was considered as elevated alanine aminotransferase(ALT>35IU/L)or aspartate aminotransferase(AST>35IU/L). The results were as follows: 1. The mean degree of obesity was $29.56\pm12.56\%$, and the percentage of overweight was $18.5\%$, mild obesity $41.1\%$, moderate obesity $35.6\%$, severe obesity $4.8\%$ respectively in surveyed children. 2. The systolic blood pressure was $108.34\pm13.73mmHg$, diastolic blood pressure was $67.46\pm8.27mmHg$. 3. FBS was $93.79\pm6.51mg/dl$. 4. Total cholesterol, triglyceride, ALT and AST were $183.34\pm31.38mg/dl$. $115.55\pm56.43mg/dl,\;24.08\pm18.42IU/L,\; 28.73\pm10.45IU/L,$ respectively. 5. The prevalence of complications was $47.2\%$ : hypertension$(13\%)$, hyperglycemia$(0.7\%)$, hypercholesterolemia$(23.3\%)$, hypertriglyceridemia$(17.1\%)$, and liver dysfunction$(21.9\%)$. In conclusion. childhood obesity is associated with various risk factors. Therefore, the aggressive approaches to successful prevention, early detection, and effective treatment of obesity in children are urgently required.
The effect of exogenous gonadotrophins on superovulation in rabbits was examined. One hundred and sixteen sexually mature California, Chinchilla and New Zealand White rabbits were randomly allocated to control (100 IU hCG), PMSG-treated (100 IU HCG following 150 IU PMSG) and FSH-treated groups (0.3 mg/head /12 h for 3 days followed by 100 IU hCG). All does were mated after hCG injection and were sacrificed or laparotomized within 1 to 4 days postcoitus for counting the number of ovulation points. The number of ovulations was higher in FSH-treated animals than in the control and PMSG-treated groups (37.2 vs. 10.4 and 14.5, p<0.05). Follicle haemorrhagicum was observed in many cases in the PMSG-treated group. No significant difference in ovulation number was observed between left and right ovaries regardless of gonadotropin treatment. In another experiment, 2-cell stage embryos were collected at 26 h postmating and blastomeres were separated by mechanical pipetting or gentle pressure with a fine glass needle. Aggregated or chimeric embryos were produced from two single blastomeres from two breeds, New Zealand White and Chinchlla, with different coat colors. All the embryos were cultured in Ham's F-10 medium supplemented with 1.5% BSA (bovine serum albumin fraction V) and 10% PRS (pregnant rabbit serum), and incubated in a humidified atmosphere with 5% $CO_2$ at $38^{\circ}C$. After development to morula or early blastocyst, the embryos were transferred into the oviducts of recipient does. Results showed that 7 out of 10 does (70%) receiving intact embryos (control) became pregnant and 41 kits were delivered. However, no pregnancy was obtained from the recipient of either denuded demi- or aggregated embryos. It is suggested that embryos without zona pellucida could not develop to term in rabbits.
Liu, Zhao L.;Yang, De P.;Chen, Pu;Dong, Wei X.;Wang, Dong M.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.21
no.6
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pp.838-844
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2008
This experiment was conducted to evaluate the effect of supplementing a fat diet with selenium (Se) and vitamin E on performance of cows, blood antioxidant status and milk fatty acid composition. Sixty-three lactating Holstein cows were randomly divided into seven groups of nine cows each and each group was fed one of the following diets: i) a basal diet (control); ii) a basal diet with 0.15 mg Se/kg DM (LSe); iii) a basal diet with 0.3 mg Se/kg DM (HSe); iv) a basal diet with 5,000 IU/cow d vitamin E (LVE); v) a basal diet with 10,000 IU/cow d vitamin E (HVE); vi) a basal diet with 0.15 mg Se/kg DM and 5,000 IU/cow d vitamin E (LSeVE); vii) a basal diet with 0.3 mg Se/kg DM and 10,000 IU/cow d vitamin E (HSeVE). Milk fat percentage and conjugated linoleic acid (CLA) yield in HVE and HSeVE diets increased (p<0.05) compared with the control diet. In milk fat, dietary supplementation of Se tended to increase the proportion of the sum of unsaturated fatty acids (UFA) and significantly decreased (p<0.05) the proportion of the sum of saturated fatty acids (SFA). In addition, compared with the control, thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) content was lower and glutathione peroxidase (GSH-Px) was higher when fat diets were supplemented with Se. Our data showed that supplementation with Se and/or VE improved these nutrients in blood and milk. The results indicated that fat diets supplemented with Se improved both antioxidant status in blood and fatty acids in milk fat, and fat diets supplemented with vitamin E alleviated milk fat depression. Therefore, the combination of Se and vitamin E caused synergistic effects on the nutritional quality of milk fat and performance of cows fed a fat diet.
The effect of vitamin E supplementation on plasma ${\alpha}$-tocopherol level, total antioxidant level and reproductive performance in Murrah buffaloes was studied during periparturient period. Twenty-four advance pregnant buffaloes were randomly divided into four equal groups as $T_1$, $T_2$, $T_3$ and $T_4$ and were supplemented with 0, 1,000, 1,500 and 2,000 IU of ${\alpha}$-tocopheryl acetate (Merck) from 60 days prepartum to 30 days postpartum and 0, 500, 750 and 1,000 IU from 30 to 60 days postpartum, respectively. Blood samples were collected at -60, -45, -30, -15, -7, 0, 7, 15, 30 and 60 days of parturition and were analyzed for plasma ${\alpha}$-tocopherol and total antioxidant activity (TAA). The intake of DM, CP and TDN did not vary among different groups. Plasma ${\alpha}$-tocopherol and TAA around parturition (-7 to 15 day) in $T_3$ and $T_4$ were significantly higher than the control group. There was 17% reduction in retention of fetal membranes (RFM) and metritis in $T_4$ than control. The post partum estrus interval averaged 58.00, 55.33, 51.83 and 43.00 days in $T_1$, $T_2$, $T_3$ and $T_4$ respectively. There was significant reduction in days open in both $T_3$ and $T_4$ in comparison to $T_1$ group (127,130 Vs.146). All the vitamin E supplemented groups showed reduction in days open than their previous lactation performance. Supplementation of vitamin E at $1,500IU\;d^{-1}$ from 60 day prepartum to 30 day post partum to buffaloes exhibited beneficial effect on plasma ${\alpha}$-tocopherol level and TAA around parturition and continuation of its supplementation at $1,000IU\;d^{-1}$ from 30 to 60 days of lactation improved post partum reproductive performance of buffaloes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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