Chung, Han Young;Lee, Kyu-Ho;Ryu, Sangryeol;Yoon, Hyunjin;Lee, Ju-Hoon;Kim, Hyeun Bum;Kim, Heebal;Jeong, Hee Gon;Choi, Sang Ho;Kim, Bong-Soo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제26권12호
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pp.2030-2035
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2016
Bacillus cereus causes food-borne illness through contaminated foods; therefore, its pathogenicity and genome sequences have been analyzed in several studies. We sequenced and analyzed B. cereus strain FORC_021 isolated from a sashimi restaurant. The genome sequence consists of 5,373,294 bp with 35.36% GC contents, 5,350 predicted CDSs, 42 rRNA genes, and 107 tRNA genes. Based on in silico DNA-DNA hybridization values, B. cereus ATCC $14579^T$ was closest to FORC_021 among the complete genome-sequenced strains. Three major enterotoxins were detected in FORC_021. Comparative genomic analysis of FORC_021 with ATCC $14579^T$ revealed that FORC_021 harbored an additional genomic region encoding virulence factors, such as putative ADP-ribosylating toxin, spore germination protein, internalin, and sortase. Furthermore, in vitro cytotoxicity testing showed that FORC_021 exhibited a high level of cytotoxicity toward INT-407 human epithelial cells. This genomic information of FORC_021 will help us to understand its pathogenesis and assist in managing food contamination.
Gymnophallid metacercariae found in the Manila clam Ruditapes philippinarum ('Banjirak' in Korean) from Gochang-gun, Jeollabuk-do, Korea were morphologically and molecularly confirmed to be Parvatrema duboisi (Dollfus, 1923) Bartoli, 1974. The metacercariae were morphologically characterized by having a large oral sucker, small ventral sucker, genital pore some distance anterior to the ventral sucker, no ventral pit, and 1 compact or slightly lobed vitellarium, which were all compatible with P. duboisi. Some of the metacercariae were experimentally fed to mice, and adult flukes were recovered at day 7 post-infection. The morphology of the adult flukes was basically the same as that of the metacercariae except for the presence of uterine eggs; the uterus was filled with up to 40 eggs. The nucleotide sequences (1,193 bp) from ITS regions (ITS1, 5.8S rDNA, and ITS2) of the metacercariae showed 99.7% identity with P. duboisi and 75.7% identity with Gymnophalloides seoi deposited in GenBank. These results confirmed the presence of P. duboisi metacercariae in the Manila clam R. philippinarum in an estuary region of Gochang-gun, Korea.
A novel species, Metschnikowia cibodasensis, is proposed to accommodate eight strains (ID03-$0093^T$, ID03-0094, ID03-0095, ID03-0096, ID03-0097, ID03-0098, ID03-0099, and ID03-0109) isolated from flowers of Saurauia pendula, Berberis nepalensis, and Brunfelsia americana in Cibodas Botanical Garden, West Java, Indonesia. The type strain of M. cibodasensis is ID03-$0093^T$ (= NBRC $101693^T$ =UICC $Y-335^T$ = BTCC-$Y25^T$). The common features of M. cibodasensis are a spherical to ellipsoidopedunculate shaped ascus, which contains one or two needle-shaped ascospores, and lyse at maturity. Asci generally develop directly from vegetative cells but sometimes from chlamydospores. The neighbor-joining tree based on the D1/D2 domain of nuclear large subunit (nLSU) ribosomal DNA sequences strongly supports that M. cibodasensis (eight strains) and its closest teleomorphic species, M. reukaufii, are different species by a 100% bootstrap value. The type strain of M. cibodasensis, ID03-$0093^T$, differed from M. reukaufii NBRC $1679^T$ by six nt (five substitutions and one deletion) in their D1/D2 region of nLSU rDNA, and by 18 nt (five deletions, four insertions, and nine substitutions) in their internal transcribed spacer regions of rDNA, respectively. Four strains representative of M. cibodasensis (ID03-$0093^T$, ID03-0095, ID03-0096, and ID03-0099) showed a mol% G+C content of $44.05{\pm}0.25%$, whereas that of M. reukaufii NBRC $1679^T$ was 41.3%. The low value of DNA-DNA homology (5-16%) in four strains of M. cibodasensis and M. reukaufii NBRC $1679^T$ strongly supported that these strains represent a distinct species.
ADRP 유전자가 24개월령 한우 등심조직에서 발현량이 급격히 증가하여 30개월령 등심조직에서는 발현량이 다소 감소하는 발현양상 분석결과로부터 이전 연구에서는 ADRP 유전자를 한우 성장단계 특이발현 유전자로 선정하였다. 본 연구에서는 ADRP 유전자의 발현조절 기작을 분석하기 위하여 promoter 영역을 포함하는 ADRP 유전자 전체영역을 cloning하였으며, 구조를 분석하고 promoter의 특성을 조사하였다. 한우 ADRP cDNA 단편을 probe로 합성하여 Southern blot 분석을 실시한 결과로부터 ADRP 유전자가 한우 genome 상에서 single copy로 존재하고 크기는 대략 12 kb에 해당하는 것을 확인하였다. Genomic DNA library screening을 실시하여 promoter 영역을 포함하는 ADRP 전체 유전자에 해당하는 clone을 확보하고 HwADRPg-1으로 명명한 후, 염기서열을 결정하고 분석하였다. 한우 ADRP 유전자, HwADRPg-1은 8개의 exon과 7개의 intron으로 구성되어 있으며 모든 exon-intron 경계는 GT/AG 원칙을 따르고 있었고, coding 영역은 7,633 bp로서 6개의 intron에 의해 7개의 exon으로 나누어져 있었다. HwADRPg-1의 promoter 영역에서는 TATAA box는 발견되지 않았으며, -70 위치에 근육 특이적 transcription activator인 Myo G 서열이 존재하였고, -629 위치에는 지방세포의 분화를 유도하는 것으로 알려진 C/EBP (CCAAT/enhancer binding protein) 서열이 존재하였다. HwADRPg-1의 조절영역에 있는 Myo G factor가 근육조직에서 ADRP 유전자가 발현될 수 있도록 하며, 근육의 발달정도를 신호로써 감지하여 근육조직에서 성장단계에 따른 ADRP 유전자의 발현량을 조절할 것으로 추정되고, 다른 종류의 지방세포 특이적인 전사인자 및 지방세포의 분화정도를 신호로 인식하는 전사단계 조절인자를 조사하기 위하여 promoter 영역의 추가분석이 이루어져야 할 것으로 사료된다.
4-chlorobiphenyl (4CB)의 분해균주인 Pseudomonas sp. strain DJ-12의 16S rDNA의 염기서열을 분석한 결과 Comamonas sp. strain DJ-12로 재분류 되었다. Pseudomonas sp. strain DJ-12로부터 4CB의 분해결과 생성되는 2,3-dihydroxybiphenyl을 계속 분해하는데 관여하는 pcbC1Dl 유전자를 이미 보고된 바 있다. 이번 연구에서는 Comamonas sp. strain DJ-12로부터 4CB 분해에 관여하는 pcbABC2D2 유전자를 클로닝하여 염기서열을 분석하였다. PcbAB 및 pcbCD 유전자들의 염기서열은 48, 65%, 추정 아미노산 서열은 33, 42%의 낮은 유사도를 보였다. 본 연구에서 얻어진 pcbC2D2 유전자는 이미 보고만 pcbCIDl 유전자와 염기의 개수와 서열의 유사도가 서로 다름을 보여 주었다. Comamonas sp. strain DJ-12의 두 가지 pcbCD유전자들은 Southern hybridization 결과에서도 유사성을 보이지 않았으며, 서로 다른 위치에 존재함을 보여주었다. 그러나 2,3-dihydroxybiphenyl의 분해 특성은 동일하였다. 이와 같은 결과는 Comamonas sp. strain DJ-12 균주가 2조의 pcbCD 유전자를 가지고 있다는 것을 의미하는 것이다.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제44권2호
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pp.55-64
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2022
Bombyx shini Park & Sohn, 2002 (Lepidoptera: Bombycidae), which was listed as an endemic species in South Korea has recently been renamed as the East Asian silk moth Rotunda rotundapex Miyata & Kishida, 1990 (Lepidoptera: Bombycidae). In this study, we sequenced the complete mitochondrial genome (mitogenome) of the R. rotundapex to announce genomic characteristics and to clarify its validity with a new name. The 15,294-bp long complete mitogenome comprises a typical set of genes [13 protein-coding genes (PCGs), 2 rRNA genes, and 22 tRNA genes] and one major noncoding, A + T-rich region, with an arrangement identical to that observed in most lepidopteran mitogenomes. The A/T content of the whole mitogenome was 79.22%; however, it varied among the regions/genes as follows: A + T-rich region, 91.62%; srRNA, 84.67%; lrRNA, 83.01%; tRNAs, 81.43%; and PCGs, 77.46%. Phylogenetic analyses of 35 species in the Bombycoidea superfamily showed the sister relationship between the families Sphingidae and Bombycidae s. str., with the higher nodal support [bootstrap support (BS) = 78%]. The Saturniidae was placed as the sister to the two families, but the nodal support for this relationship was low (BS = 53%). Current R. rotundapex was placed together with previously reported con-species with the highest nodal support, forming a separate clade from Bombyx, validating that B. shini can have a new genus name, Rotunda. However, the Korean R. rotundapex showed a substantial sequence divergence at 5.28% to that originated from an individual of type locality Taiwan in 1,459-bp of COI sequences. Considering such a high sequence divergence an additional study, which includes morphological and DNA barcoding data from further extensive distributional range maybe is needed for further robust taxonomic conclusion.
국내에 분포하는 대표적 침입외래식물인 돼지풀과 단풍잎돼지풀이 나타내는 유전적 변이양상을 파악하기 위해 국내집단을 중심으로 돼지풀 157개체와 단풍잎돼지풀 46개체로부터 핵 rDNA의 ITS(Internal Transcribed Spacer)지역 염기서열을 분석하였다. 그 결과 돼지풀에서는 총 18개의 ITS 유형이, 단풍잎돼지풀에서는 4개의 유형이 각각 검출되었다. 돼지풀의 경우 각각의 ITS 유형간에는 1bp에서 7bp까지 차이가 나는 것으로 확인되었으며, 단풍잎돼지풀의 경우 각 유형 간에 1bp에서 2bp의 차이가 발견되었다. 돼지풀의 국내집단에서 18개에 이르는 다양한 ITS 유형이 검출되었다는 사실은 이 종이 우리나라에 여러 차례 반복해서 유입했기 때문인 것으로 풀이된다. 한편 일부 ITS 유형은 유전적 재조합에 의해 형성되었을 가능성이 있으며, 각각 한 개체에서만 발견된 12개의 소수 유형들은 점돌연변이 또는 그에 뒤이은 유전적 재조합에 의해 국내에서 독자적으로 기원했을 것으로 추정된다. 본 연구를 통해 침입과정에서 나타나는 돼지풀의 진화적 변화를 이해하는데 필요한 유용한 유전적 기초정보가 확보되었다.
A commensal thermophile, Symbiobacterium toebii, isolated from hay compost (toebii) in Korea commensally interacted with a thermophilic Geobacillus toebii sp. nov., which was a new species within the genus Geobacillus on the basis of the phenotypic traits and molecular systematic data. S. toebii required the crude extracts and/or culture supernatant of the Geobacillus toebii for axenic growth and could grow on the temperature between 45 and $70^{\circ}C$ (optimum: $60^{\circ}C$; 2.4 h doubling time) and pH 6.0 and 9.0 (optimum: pH 7.5). The G+C content of the genomic DNA was $65 mol\%$, and the major quinones were MK-6 and MK-7. A phylogenetic analysis of its 16S rDNA sequence indicated that Symbiobacterium toebii was closely related with solely reported Symbiobacterium thermophilum. The presence of the commensal thermophile 16S rDNA and accumulation of indole in all the enriched cultures indicate that Symbiobacterium toebii is widely distributed in the various soils. The genome of S. toebii constituted a circular chromosome of 3,280,275 base pairs and there was not an extra-chromosomal element (ECE). It contained about 4,107 predicted coding sequences. Of these protein coding genes, about $45.6\%$ was encoded well-known proteins and annotated the functional assignment of 1,874 open reading frames (ORFs), and the rest predicted to have unknown functions. The genes encoding thermostable tyrosine phenol-lyase and tryptophan indole-lyase were cloned from the genomic DNA of S. toebii and the enzymatic production of L-tyrosine and L-tryptophan was carried out with two thermostable enzymes overexpressed in recombinant E. coli.
거제도 장목항에서 분리한 Akashiwo sanguinea의 형태와 계통학적 특성을 명확히 하고, 여러 온도와 염분구배에 따른 성장조건을 파악하고자 하였다. A. sanguinea의 세포는 오각형이었고, 세포의 길이는 54.7~70.3 ㎛, 폭은 31.5~48.5 ㎛로 나타났다. 핵은 세포의 중심에 위치하였고, 엽록체는 황갈색으로 세포 전체에 퍼져있었다. 상추구는 알파벳 e 모양이었다. 계통분석 결과 장목항에서 분리한 본 배양주는 ribotype A에 포함되었다. 온도 및 염분구배에 따른 성장 실험은 5℃ 이하의 온도를 제외한 모든 온도구배에서 성장이 나타났다. 그리고, 최대성장속도는 온도 20℃, 염분 20 psu에서 0.50 day-1로 나타났고, 최대세포밀도는 온도 25℃, 염분 30 psu에서 1,372 cells mL-1였다. 이 결과는 A. sanguinea가 가을철에 한국 연안에서 최대 증식을 보일 수 있다는 것을 나타낸다.
Kim, Seung-Hwan;Chung, Oon-Chan;Woo, Im-Sun;Shin, Jae-Ho;Rho, Dong-Hyun;Rhee, In-Koo;Park, Heui-Dong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제10권6호
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pp.776-783
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2000
Various alcohol yeast strains have been isolated from main mashes of Korean traditional liquors, and their genetic diversities were previously reported [23]. In this study, the strain SHY111, showing the highest alcohol production, was tested for its fermentation and sporulation characteristics. Additionally, its haploid cells were isolated and tested for their growth and fermentation patterns. The strain was identified as Saccharomyces cerevisiae based on its morphological and physiological characteristics. The sequences of the ITS(internal transcribed spacer) and 5.8S rDNA regions of S. cerevisiae SHY111 were found to be identical to those of S. cerevisiae that was obtained from through the yeast genome project. The maximum fermentation ratio obtained by the strain SHY111 (96.7%) was almost the same as that by S. cerevisiae Balyun No. 1 (96.5%) that was a little higher than that by S. cerevisiae KCCM11215(95.8%). The strain was induced for sporulation in a sporulation liquid medium using log phase cells grown in different types of pre-sporulation media, and its haploid cells were obtained by spore dissection using a micromanipulator. The majority of the spores formed a small colony on a YPD agar plate, and the haploid yeast cells derived from the strain SHY111 showed a variety of growth and alcohol fermentation patterns. It was proposed that the fermentation patterns were related to their growth phenotypes in the most haploid strains, but possible not in some strains.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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