인슐린 유사 성장 호르몬 1과 2 (IGF-1 & IGF-2)는 착상 전 초기배아 발생을 조절하는 중요한 요소이다. 생쥐 착상 전 초기배아에서 IGF-1의 역할에 관한 연구를 위해, IGF-1과 IGF-1 수용체의 전사물의 존재 여부를 난자와 착상 전 초기배아에서 조사하였다. 새로이 고안된 IGF-1 primer를 이용하여 난자에서 전사물을 검출하였다. 그리고, PCR 산물을 제한효소인 Msp I으로 절단하여 확인하였다. 이 실험에서 IGF-1과 IGF-1 수용체의 전사물이 난자와 착상 전 초기배아에서 모두 검출됨을 보였다. GV-난자에 다량 존재하는 mRNA는 4- 혹은 8-세포기까지 지속적으로 감소하다가 이후에 다시 증가하는 양상을 보였다. GV-난자에서 IGF-1과 IGF-lR 전사물이 존재한다는 것은 초기배아에 존재하는 전사물이 모계유래 산물임을 암시한다. 또한, 난자와 착상 전 초기배아에 IGF-1과 IGF-1 수용체 전사물이 존재하는 것으로 보아 착상 전 초기배아에서 IGF-1은 자가 분비되어 IGF-1 수용체의 신호전달 경로를 통하여 배아발생에 작용하는 것으로 사료된다.
MT-GHR(Growth hormone receptor)와 MT-IGF-IR(IGF-1 receptor)유전자를 구축하고 micromani-pulator를 이용하여 토끼 수정란에 유전자를 주입하여 형질전환토끼를 생산하였다. 본 연구에서의 형질전환토끼의 생산효율은 약 3%를 나타내었고 Growth Hormone receptor(GHR)를 가진 형질전환 토끼와 IGF-1 receptor(IGF-lR)를 가진 형질전환토끼를 10마리 이상씩 생산하였다. 또한 정상 토끼와 교배시켜 F$_1$ 새끼를 얻어 유전자가 다음세대에도 전달되는 것을 확인하였다. GHR 이나 IGF-1R 형질전환토끼의 성장률은 정상토끼보다는 약15~25% 정도 빠른 경향을 나타냈고 특히 GHR 형질전환토끼의 성장률이 더 높은 것으로 드러나 GHR 및 IGF-lR유전자가 형질전환토끼에서 성장에 영향을 주었다는 것을 확인할 수 있었다.
목 적 : 신생아의 IGF-1 정상치를 설정하고 신생아 성장 및 질병상태와 IGF-1치의 연관성을 조사하여 신생아 성장 및 질병 경과를 추정하는 지표로 사용할 수 있는지 알아보고자 하였다. 방 법 : 2007년 3월부터 7월까지 5개월 동안 경북대학교 신생아 집중치료실에 입원한 환아들을 대상으로 입원 시 1회 채혈하여 RIA법으로 IGF-1를 측정하였다. 아울러 환아들의 의무 기록을 후향적으로 검토하여 출생 시 체중, 재태 주령, 분만 방법, 동반 질환 등을 조사하였다. 결 과 : 출생 직후 채혈이 가능했던 만삭아 22명과 미숙아 30명의 혈중 IGF-1은 각각 $53.4{\pm}40.0$, $31.6{\pm}27.3$ ng/mL로 미숙아에서 유의하게 낮았다(P<0.05). 건강한 만삭아와 질환을 동반한 만삭아의 IGF-1은 각각 $64.1{\pm}39.5$, $46.0{\pm}40.2$ ng/mL로 질병 동반 시 유의하게 낮았다(P<0.05). 건강한 미숙아와 질환 동반 미숙아의 IGF-1은 각각 $33.2{\pm}23.3$, $30.6{\pm}30.4$ ng/mL로 두군 사이에 유의한 차이를 보이지 않았으나 이들 모두 건강한 만삭아에 비해 의의 있게 낮았다(P<0.05). 출생 8일후 이후 입원, 채혈한 신생아는 27명으로 이들 중 입원 시 체중이 출생체중에 비해 감소한 환아의 IGF-1은 $13.3{\pm}19.9$ ng/mL, 입원 시 체중이 출생체중에 비해 증가한 환아의 IGF-1은 $70.8{\pm}36.2$ ng/mL로 체중 감소군의 IGF-1이 유의하게 낮았다(P<0.001). 성별 및 분만법에 따른 IGF-1의 차이는 관찰되지 않았다. 결 론 : 미숙아는 만삭아에 비해 출생 당일의 IGF-1치가 낮았으며, 출생 후 체중이 감소한 만삭아의 IGF-1은 체중이 증가한 만삭아에 비해 유의하게 낮았다. 이러한 소견으로 보아 신생아의 혈청 IGF-1은 재태 주령, 출생 후 체중 증가와 관련성을 가지는 것으로 보인다.
젖소 초유 유청을 ultrafiltration으로서 30kDa 사이의 IGF-I rich fraction을 분획하였다. 분획한 IGF-I rich fraction은 SDS-PAGE와 Western blotting으로 IGF-I이 존재하는 것을 확인하였고, sandwich ELISA로써 그 함량을 측정한 결과 fraction중 IGF-I의 함량은 단백질 mg당 10ng으로 나타났다. IGF-I rich fraction으로 IEC-6, Detroit 551, EL-4 및 L6 in vitro세포의 증식에 미치는 효과를 실험한 결과 IEC-6 cell은 IGF-I 기준으로 10ng, 1 ng, 0.1ng, 0.01ng에서 각각 대조구에 비해서 60%, 53%, 30 그리고 20%의 세포증식효과를 나타내었다. IEC-6의 증식은 ICF-I의 투여량이 증가할수록 세포의 증식효과가 더 높게 나타났다. Detroit 551 cell은 10ng과 1ng수준에서 각각 56%와 26%의 세포증식 효과를 나타내었다. 그리고 EL-4 cell과 L6 cell은 10ng 수준에서 각각 53%와 46%의 세포증식 효과를 나타내었다. 모든 세포주에서 IGF-I 함유농도가 10 ng 투여구에서 세포 증식율이 가장 높았으며 IEC-6 cell, Detroit 551 및 EL-4 cell은 모두 약 60%의 세포 성장률을 나타내었고 L6 cell은 약 50%의 성장률을 보였다.
Objectives: These experimental studies were designed to investigate the effects of antler's extracts on the expression of leptin, IGF-l and IGF-1 receptor on cultured 3T3-L1 cells. Methods: A mouse adipoblast cell line, 3T3-L1, was cultured with or without a differentiation medium containing Isobutylmethylxanthin, Dexametasone and Insulin before adding extracts of antler of various concentratio(10, 50, ]00, 200${\mu}g/ml$). The expression of leptin and IGF-1 receptor was measured by western blot assay, and expression of IGF-1 was determined by F ACS analysis. Results and Conclusion: The 3T3-L1 cells' differentiation did not show a significant induction by extracts of antler. The expression of leptin was significantly decreased depend on antler's concentration. The expression of IGF-1 showed a slightly increase by extracts of antler, whereas that of IGF-receptor showed a tendency to increase. The total amount of intracellular triglyceride showed a tendency to diminish as the concentration of antler's extract increase.
인체의 다양한 기능을 증진시키는 작용을 하는 것으로 알려진 IGF-I의 생체내 분비를 촉진시키기 위해 천연 생약재성분으로 구성된 YGF251을 개발하였고 YGF251의 효능을 측정하였다. 이중 맹검 시험 방식으로 40세에서 70세 사이의 성인 남녀 31명을 대상으로 IGF-I을 비롯하여 체중, 혈압, 간기능 검사 및 신장기능 검사를 실시하였다. YGF251 및 위약 투석 후의 IGF-I 함량변화에 대한 대응표본 검정결과는 YGF251 투여군에서 투여 전에는 245.6 ng/mL 이었는데 1개월 투여 후에는 269.3 ng/mL, 2개월 투여 후에는 275.6 ng/mL으로 유의하게 증가하였다 (p<0.05). 한편 위약 투여군에서는 투여 전에는 280.0 ng/mL이었으나 1개월 투여 후에는 239.2 ng/mL, 2개월 투여 후에는 230.2 ng/mL으로 유의하게 감소하는 결과를 보였다(p<0.05). 혈중 insulin함량은 실험군의 경우 YGF251 을 1개월 투여후 평균치로써 2배 정도의 증가를 보였으며 위약 투여군에서는 36% 정도 감소된 것으로 나타났다. 또한 YGF251투여에 의한 체중 및 혈압의 변화는 거의 나타나지 않았다. YGF251 투여에 의해 나타날수 있는 간기능 및 신장기능 변화를 관찰 하기 위해 여러 항목들의 수치는 측정 오차 범위내에서의 변화만을 나타내었다.
The growth of many breast tumors is stimulated by IGF-1, which activates signal transduction pathways inducing cell proliferation. $ER{\alpha}$ is important in this process. The aim of the study was to investigate relationships in vitro among inhibitory effects of luteolin on the growth of MCF-7 cells, IGF-1 pathway and $ER{\alpha}$. Our results showed that luteolin could effectively block IGF-l-stimulated MCF-7 cell proliferation in a dose- and time-dependent manner and block cell cycle progression and induce apoptosis evidenced by the flow cytometric detection of sub-G1DNA content. Luteolin markedly decreased IGF-l-dependent IGF-IR and Akt phosphorylation without affecting Erk1/2 phosphorylation. Further experiments pointed out that $ER{\alpha}$ was directly involved in IGF-l induced cell growth inhibitory effects of luteolin, which significantly decreased $ER{\alpha}$ expression. Knockdown of $ER{\alpha}$ in MCF-7 cells by an $ER{\alpha}$-specific siRNA decreased the IGF-l induced cell growth inhibitory effects of luteolin. $ER{\alpha}$ is thus a possible target of luteolin. These findings indicate that the inhibitory effect of luteolin on the growth of MCF-7 cells is via inhibiting IGF-l mediated PI3K-Akt pathway dependent of $ER{\alpha}$ expression.
신체성장은 세포수가 증가하고 세포의 크기가 커지면서 신체의 크기가 증가하는 것으로서 몸을 구성하는 성분인 단백질이 증가를 수반하고 골격과 근육이 커지며 이득의 기능도 강화된다. 사람의 키가 커진다는 것은 팔과 다리의 긴 뼈가 늘어나야 하는 것인데 이와같은 성장은 호르몬의 작용에 의해서 이루어진다. 본 연구에서는 이와같은 성장에 미치는 영향을 검토하기 위해 성장호르몬 및 IGF-1의 분비촉진 여부를 확인하였다. 체외 래트 성장호르몬의 분비량은 88 - 99 ng/mL으로 대조군에 비해 약 6배 이상의 성장호르몬이 분비되었다. 또한 생체내 IGF-1 분비촉진 효과실헐에서는 YGF 투여 후 8시간에서 1140 ng/mL 정도로 대조군에 비해 현저하게 높은 혈중 IGF-1의 농도가 유지되었다. YGF를 장기 복용시킨 경우 실제로 대퇴부 배의 길이성장이 약 6% 정도 이루어졌음을 확인할 수 있었다. 따라서 본 실험을 통해 확인된 성장호르몬 및 IGF-1 분비촉진을 유발하는 식물 추출물 YGF에 대해 좀더 연구개발하여 키 성장이 저조한 어린이 및 청소년에게 신체성장에 도움이 될 수 있도록 되었으면 한다.
Jin, Eun-Jung;Kim, Inae;Lee, C. Young;Park, Byung-Chul
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제19권10호
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pp.1508-1513
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2006
Myostatin (MSTN) and insulin-like growth factors (IGFs) are a known inhibitor and stimulators of proliferation and differentiation of muscle cells, respectively. The present study was performed to investigate the relationship of MSTN-induced growth inhibition to expression of the IGF system components and myogenin, a muscle cell-specific transcription factor, in rat L6 myoblasts. The L6 cells transfected with a green fluorescent protein-MSTN plasmid expression construct had a 47% less cell number than mock-transfected cells after 3-d serum-free culture, accompanied by delayed differentiation which was suggested by inhibited aggregation of cells. Moreover, cells transfected with the expression construct had decreased expression of IGF-II and myogenin genes, but not IGF-I or its receptor genes, as examined by reverse transcription-polymerase chain reaction. The reduced mitosis of the L6 cells transfected with the MSTN-expression construct increased following an addition of either IGF-I or IGF-II to the culture medium, but not to the level of mock-transfected cells. By contrast, myogenin gene expression in these cells increased after the addition of either IGF to the level of mock-transfected cells. Collectively, these results suggest that the inhibitory effect of MSTN on L6 cell proliferation and differentiation is likely to be partly mediated by serially suppressed expression of IGF-II and myogenin genes, not IGF-I gene.
Background: Serum-based parameters are considered non-invasive biomarkers for cancer detection. In human studies, insulin-like growth factor-I and II (IGF-I and IGF-II) and insulin-like growth factor binding protein-3 (IGFBP-3) are useful as diagnostic or prognostic markers and potential therapeutic targets. Objectives: This study examined the diagnostic utility of circulating IGF-I, IGF-II, and IGFBP-3 levels in healthy dogs and dogs with tumors. Methods: The serum concentrations of these biomarkers in 86 dogs with tumors were compared with those in 30 healthy dogs using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Results: The ELISA results showed no difference between healthy dogs and dogs with tumors in the serum IGF-II concentrations. On the other hand, there was a significant difference in the circulating IGF-I and IGFBP-3 levels between healthy dogs and dogs with tumors. The concentrations of serum IGF-I (median [interquartile range], 103.4 [59.5-175] ng/mL) in dogs with epithelial tumors were higher than those (58.4 ng/mL [43.5-79.9]) in healthy dogs. Thus, the concentrations of serum IGFBP-3 (43.4 ng/mL [33.2-57.2]) in dogs with malignant mesenchymal tumors were lower than those (60.8 ng/mL [47.6-70.5]) in healthy dogs. Conclusions: The serum IGF-I and IGFBP-3 levels can be used as diagnostic biomarkers in dogs with tumors.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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