Objective: Numerous studies have indicated that the apoptosis and proliferation of granulosa cells (GCs) are closely related to the normal growth and development of follicles and ovaries. Previous evidence has suggested that miR-126-3p might get involved in the apoptosis and proliferation of GCs, and phosphatidylinositol 3-kinase regulatory subunit 2 (PIK3R2) gene has been predicted as one target of miR-126-3p. However, the molecular regulation of miR-126-3p on PIK3R2 and the effects of PIK3R2 on porcine GCs apoptosis and proliferation remain virtually unexplored. Methods: In this study, using porcine GCs as a cellular model, luciferase report assay, mutation and deletion were applied to verify the targeting relationship between miR-126-3p and PIK3R2. Annexin-V/PI staining and 5-ethynyl-2'-deoxyuridine assay were applied to explore the effect of PIK3R2 on GCs apoptosis and proliferation, respectively. Real-time quantitative polymerase chain reaction and Western Blot were applied to explore the regulation of miR-126-3p on PIK3R2 expression. Results: We found that miR-126-3p targeted at PIK3R2 and inhibited its mRNA and protein expression. Knockdown of PIK3R2 significantly inhibited the apoptosis and promoted the proliferation of porcine GCs, and significantly down-regulated the mRNA expression of several key genes of PI3K pathway such as insulin-like growth factor 1 receptor (IGF1R), insulin receptor (INSR), pyruvate dehydrogenase kinase 1 (PDK1), and serine/threonine kinase 1 (AKT1). Conclusion: MiR-126-3p might target and inhibit the mRNA and protein expressions of PIK3R2, thereby inhibiting GC apoptosis and promoting GC proliferation by down-regulating several key genes of the PI3K pathway, IGF1R, INSR, PDK1, and AKT1. These findings would provide great insight into further exploring the molecular regulation of miR-126-3p and PIK3R2 on the functions of GCs during the folliculogenesis in female mammals.
Renchinkhand, Gereltuya;Son, Ji Yoon;Nam, Myoung Soo
Journal of Dairy Science and Biotechnology
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v.34
no.1
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pp.1-7
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2016
Colostrum, a nutrient-rich fluid produced by female mammals after giving birth, is the specific initial diet of mammalian neonates. Colostrum is important for the nutrition, growth, and development of newborn infants and contributes to the immunologic defense of neonates. It contains immunoglobulins, antimicrobial peptides, such as lactoferrin and lactoperoxidase, and other bioactive molecules, including growth factors, such as IGF (insulin-like growth factor), EGF (epithermal growth factor), $TGF-{\beta}$ (transforming growth factor), and FGF (fibroblast growth factor). Bovine colostrum is a rich source of growth factors, which play a central role in wound healing. The biological activities of colostrum emphasize the relevance of the synergistic activity of growth factors to stimulate keratinocyte proliferation and migration, which are essential for tissue repair. Colostrum increases the expression of early differentiation markers, such as keratin 1 and 10 and involucrin, and late differentiation markers, including loricrin and filaggrin. Additionally, colostrum increases granulation tissue volume in the dermis, suggesting that it has a beneficial effect on wound healing. The therapeutic use of colostrum or individual peptides present in colostrum has a positive and curative influence on various gastrointestinal diseases.
Recently, increased attention has been paid to the growth of the height of children and adolescents. To accelerate growth, velvet antlers are typically used in Oriental medicine. The present study investigated the effects of velvet antlers of velvet antlers on bone growth using the cell line of Human Osteosarcoma (Hos), derived from the bone-generating cells essential to bone growth. In order to give certain stress to this Hos, the medium contained 1% FBS was used for culturing for Hos cell instead of 10% in control. In this condition of which the proliferation had been significantly decreased, the ethanol extract of upper part of velvet antlers was added, As a result, the cells proliferation rate was significantly increased. Using Oligonucleotide DNA microarray, comparison and analyses were done to see what kind of specific genes would be differentially expressed. The result showed that as opposed to the control group, the stressed group indicated a decrease in the expressions of 6 kinds of genes such as, Id1, retinoid X receptor(RXRB) and 14-3-3 epsilon, etc. The velvet antler treated group, as opposed to the control group, showed a decreased in the expressions of 8 kinds of genes such as Id1, etc. and an increase in the expressions of 24 kinds of genes. The number of genes that showed differences in the velvet antler treated group compared with the stressed group was 7 the expression of 1 kind of gene was decreased, and the expressions of 6 kinds of genes were increased. Considering the mechanism by which velvet antlers affected the growth of osteoblast through reviewing the functions of these genes, the following results were attained. The constraint in the proliferation of Hos cells resulting from the medium contained 1% FBS seems to be caused by three important factors: 1) the decrease of the expression of 14-3-3 epsilon involved in the signal transduction and metabolism of growth, 2) the decrease of the expression of Id1 gene involved in the metabolism of bone formation, and 3) the decreased of expression of RXRB gene involved in the metabolism of retinoci acid. It is suggested that the improvement of the cell proliferating effects by velvet antler treatment, in stressed condition si mediated by increment of 6 genes particularly 14-3-3 epsilon, RXRB, and IGF2, with are the crucial factors for the cell growth and differentiation, metabolism of retinoic acid and osteoblast proliferation, respectively.
Soo Hyun Kim;Kyu-Sang Sim;Jung Yoon Cheon;Jae-Woong Jang;Su Jin Jeong;Ye Hei Seo;Hye Myoung Ahn;Bong-Geun Song;Gi-Seok Kwon;Jung-Bok Lee
Journal of Life Science
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v.33
no.3
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pp.234-241
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2023
At present, many countries around the world are legalizing cannabis and its products, and research on various treatments using cannabis is being actively conducted. However, the cannabis plant contains other compounds whose biological effects have not yet been established. We investigated the effect of cannabidiol (CBD) on hair growth in human dermal papilla cells (HDPCs). 2,2'-Azino-bis (3-ethylbenzothiazolin-6-sulfonic acid) (ABTS) and 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging assays were performed to determine the antioxidant activity of CBD. The HDPCs viability of CBD was examined via water-soluble tetrazolium salt (WST-1) assay. The expression of hair-loss-related markers in HDPCs by CBD treatment was analyzed by real-time PCR and western blotting. The DPPH, ABTS radical scavenging activity assay showed that CBD had superior antioxidant activities. In HDPCs, CBD increased cellular proliferation at concentrations without cytotoxicity. It also increased the expressions of fibroblast growth factor 1 (FGF1), fibroblast growth factor 7 (FGF7), vascular endothelial growth factor (VEGF), and insulin-like growth factor (IGF). These results correlated with a decrease in the expression of inhibition-related factors, such as androgen receptor (AR) and transforming growth factor beta 1 (TGF-B1). Moreover, CBD resulted in a significant increase in the phosphorylation of AKT and extracellular signal-regulated kinase (ERK). Therefore, it is suggested that CBD may be a potential remedy for the treatment of alopecia.
Gene expression profiling has offered new insights into postmortem molecular changes associated with meat quality. To acquire reliable transcript quantification, high quality RNA is required. The objective of this study was to analyze integrity of RNA isolated from chicken skeletal muscle (pectoralis major) and its capability of serving as the template in quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR) as a function of postmortem intervals representing the end-points of evisceration, carcass chilling and aging stages in chicken abattoirs. Chicken breast muscle was dissected from the carcasses (n = 6) immediately after evisceration, and one-third of each sample was instantly snap-frozen and labeled as 20 min postmortem. The remaining muscle was stored on ice until the next rounds of sample collection (1.5 h and 6 h postmortem). The delayed postmortem duration did not significantly affect $A_{260}/A_{280}$ and $A_{260}/A_{230}$ ($p{\geq}0.05$), suggesting no altered purity of total RNA. Apart from a slight decrease in the 28s:18s ribosomal RNA ratio in 1.5 h samples (p<0.05), the value was not statistically different between 20 min and 6 h samples ($p{\geq}0.05$), indicating intact total RNA up to 6 h. Abundance of reference genes encoding beta-actin (ACTB), glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase (GAPDH), hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase (HPRT), peptidylprolylisomerase A (PPIA) and TATA box-binding protein (TBP) as well as meat-quality associated genes (insulin-like growth factor 1 (IGF1), pyruvate dehydrogenase kinase isozyme 4 (PDK4), and peroxisome proliferator-activated receptor delta (PPARD) were investigated using qPCR. Transcript abundances of ACTB, GAPDH, HPRT, and PPIA were significantly different among all postmortem time points (p<0.05). Transcript levels of PDK4 and PPARD were significantly reduced in the 6 h samples (p<0.05). The findings suggest an adverse effect of a prolonged postmortem duration on reliability of transcript quantification in chicken skeletal muscle. For the best RNA quality, chicken skeletal muscle should be immediately collected after evisceration or within 20 min postmortem, and rapidly preserved by deep freezing.
Ferulic acid (FA) is a phytochemical with various bioactive properties. It has recently been proposed that due to its phytogenic action it can be used as an alternative growth promoter additive to synthetic compounds. The objective of the present study was to evaluate the growth performance, carcass traits, fiber characterization and skeletal muscle gene expression on hair-lambs supplemented with two doses of FA. Thirty-two male lambs (n = 8 per treatment) were individually housed during a 32 d feeding trial to evaluate the effect of FA (300 and 600 mg d-1) or zilpaterol hydrochloride (ZH; 6 mg d-1) on growth performance, and then slaughtered to evaluate the effects on carcass traits, and muscle fibers morphometry from Longissimus thoracis (LT) and mRNA abundance of β2-adrenergic receptor (β2-AR), MHC-I, MHC-IIX and IGF-I genes. FA increased final weight and average daily gain with respect to non-supplemented animals (p < 0.05). The ZH supplementation increased LT muscle area, with respect to FA doses and control (p < 0.05). Cross-sectional area (CSA) of oxidative fibers was larger with FA doses and ZH (p < 0.05). Feeding ZH increased mRNA abundance for β2-AR compared to FA and control (p < 0.05), and expression of MHC-I was affected by FA doses and ZH (p < 0.05). Overall, FA supplementation of male hair lambs enhanced productive variables due to skeletal muscle hypertrophy caused by MHC-I up-regulation. Results suggest that FA has the potential like a growth promoter in lambs.
Intense artificial selection has been imposed to Luzhong mutton sheep population in the past years. Improvements on growth and reproductive performance are two breeding goals in the present herd. Although some progresses were phenotypically observed possibly due to inbreeding induced by strong selection in terms of these traits, the genomic evaluation was poorly understood. Therefore, a high-density SNP array was used to characterize the pattern of runs of homozygosity (ROH), estimate inbreeding and inbreeding depressions on early growth performance and litter size based upon ROH, and scan positive selection signatures of recent population. Consequently, a low inbreeding level was observed which had negative effects on litter size, but not on early growth performance. And 160 genes were under selection, of which some were reported to be linked to several traits of sheep including body weight, litter size, carcass and meat quality, milk yield and composition, fiber quality and health, and the top genes were associated with growth (growth hormone [GH]- growth hormone receptor [GHR]- Insulin-like growth factor 1 [IGF1] axis) and litter size (bone morphogenic proteins [BMPs]-associated). The effectiveness of previous breeding measures was highlighted, but purging selection was proposed to alleviate the inbreeding depression on litter size, providing some genomic insights to breeding management of Luzhong mutton sheep.
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