• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제6권2호
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• pp.97-104
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• 2002

대부분의 포유동물에서 수란관내로 배란된 난자는 정자에 의해 수정이 된 후 개체발생을 시작한다. 그러나 수정이 되지 못한 난자들은 난구세포와 함께 수란관내에서 퇴화하여 제거되는데, 그 기작에 대해서는 구체적으로 알려져 있지 않다. 따라서 본 연구는 포유동물의 수란관내 물질이 난자-난구 복합체에 미치는 영향을 알아보고자 사람의 난포액과 소의 수란관 조직 추출액을 생쥐의 난자-난구 복합체에 처리하고 난자의 생존율 및 난구세포의 세포자연사(apoptosis)를 조사하였다. 수란관 조직 추출액을 처리한 미성숙난자는 난포액만을 처리한 난자와 비교하여 난자의 성숙률에 차이를 보이지 않았다. 그러나 난구세포에서 난포액만을 처리한 경우 확장을 일으키면서 배양접시 바닥에 붙어서 배양 후 72시간까지 분열 증식을 계속하는 것이 관찰된 반면, 수란관 조직 추출액을 처리한 난구세포는 확장이 억제되며 72시간 배양 후 모두 죽었다. 한편 난포액과 수란관 조직 추출액을 함께 처리한 난구세포는 배양 후 24시간에 화장을 일으켰으나 72시간 후에는 수란관 조직 추출액 만을 처리했을 때 와 마찬가지로 모든 난구세포가 죽었다. 이러한 난구세포의 죽음이 세포자연사에 의한 것인지를 알아보기 위하여 DAPI로 핵을 염색한 후 관찰한 결과 세포자연사의 특징인 응축되고 분절화된 핵을 관찰 할 수 있었고, 특히 수란관 조직 추출액을 처리한 난구세포에서 많이 관찰되었다. 또한 TUNEL 방법으로 세포자연사를 확인한 결과 응축되고 분절화된 핵을 가진 난구세포에서 염색되는 것을 확인하였다. 본 연구의 결과들을 종합해 볼 때 소의 수란관 조직 추출액에 의한 생쥐 난구세포의 죽음은 세포자연사에 의한 것으로 판단되며, 이로 미루어 수란관 조직세포에는 난구세포의 세포자연사를 유도할 수 있는 물질을 포함하고 있는 것으로 사료된다.or teacher educators to re-conceptualize teacher education in Korea. 것이 필요하다.량은 264,000$m^2$, 79,200$m^3$이였으며, 우려기준의 40% 농도 이상의 경우 복원 면적과 물량은 779,000$m^2$, 233,700㎥, 배경치 농도 이상의 복원 목표 설정의 경우에는 각각 969,200$m^2$, 290,760$m^3$ 이였다. 토양오염 우려기준 농도의 40%를 복원 목표로 하는 경우와 배경치 농도를 복원 목표로 하는 경우, 복원 물량은 우려기준 농도를 복원 목표로 하는 경우의 3.0배와 3.7배정도 증가하는 것으로 나타나 복원 목표치 설정시 우려기준 농도의 40%와 배경농도의 차이에 다른 복원 물량의 차이는 적어서, 복원 목표 설정시 배경치 농도로 복원계획을 세우는 것이 가장 바람직한 것으로 판단되었다.amma}$D)안정동위원소값이 광화I시기에는 각각 11∼9.${\textperthansand}$, -92∼-86${\textperthansand}$, 광화 II시기에는 각각 0.3${\textperthansand}$(${\gamma}^{18}O_{H2O}$),-93${\textperthansand}$({\gamma}$D)이며, 리본-호상구조를 보이는 것으로 보아 대봉광상의 광화유체에 대한 기원과 진화과정을 두 가지로 생각할 수 있다. 1) 마그마유체로부터 광화작용이 진행됨에 따라 계속적인 순환수의 혼입이 있었으며 2) 조기 마그마${\pm}$변성유체에서 유체압력의 차에

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제10권2호
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• pp.1-11
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• 1983

황소의 정액에서 베타 굴룩유로니다아제를 부분적으로 정제하였다. 이 정제과정에는 $(NH_4)_2SO_4$ 의 분획분리법, 두개의 연속적인 DEAE-셀루로오즈 콜럼 및 등전초점화법(pH4-6) 및 세파덱스 G-200의 절여과 방법이 쓰여졌다. 등전초점화(lsoelectric focusing)법을 사용했을때 pH5.13에서 베타 굴룩유로니다아제는 한 형태의 단백질로 존재하였다. 고도로 정제된 베타 굴룩유로니다아제는 전기영동법에 의해 한개의 주된 띠와 약간의 불순물의 띠로 나타났고 특수활동도는 34Units/mg 단백질로 나타났다. 이 효소는 pH 5.2 와 $48^{\circ}C$ 에서 가장 높은 활동도를 나타냈다. 알부민이나 0.15M 소금용액에서 베타 굴룩유로니다아제는 활동도가 상승됐다. 페놀프타레인-모노-베타-굴룩 유로닉산을 기질로 사용했을때 km값은 2.9mM 이었고 Vmax값은 $0.8{\mu}$mole/min 이었다. 대두의 콘카나발린 A에 흡착하는 것으로 보아 이 효소는 당단백질임이 확인됐다. 토끼, 사람의 정자 아크롬좀 추출물 및 정액에서 이 효소는 높은 활성도를 나타냈다.

• 한국수정란이식학회지
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• 제24권3호
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• pp.189-197
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• 2009

Two-pore domain 칼륨($K_{2P}$) 통로는 흥분세포 및 비흥분세포의 안정막 전압을 일정하게 유지하는데 관여한다. 그러나 생식세포 및 생식기관에서 발현되는 $K_{2P}$ 통로의 분포영역 및 그 기능에 대해서는 연구자들에 의해 아직 정리되지 못하였다. 본 종설에서는 $K_{2P}$ 통로의 생식세포 및 생식기관에서 발현, 분포 및 생리학적 의의를 논하였다. $K_{2P}$ 통로는 인간 영양막세포, 자궁근층, 태반혈관계, 자궁평활근조직, 태반융모조직 및 임신자궁조직에서 발현되어 임신에 있어서 관련성을 제시되었다. 또한, $K_{2P}$ 통로는 마우스 전핵배, 원숭이 정자 및 한우의 난소, 정소, 난자, 정자 및 수정란에서 발현 변화를 보였다. 특히, $K_{2P}$ 통로는 체외배양 시 변화되는 온도, 산소분압과 같은 배양조건에 의해 조절되는 특징을 보임으로써 수정 및 배 발달에 영향을 줄 수 있는 인자로 제시되었다. 그리고 $K_{2P}$ 통로는 과산화수소에 의해 유도된 마우스 전핵배의 세포 사멸에 있어서 칼륨 이온의 유출에 관여함이 확인되었다. $K_{2P}$ 통로의 생식세포 및 생식기관 내 발현 형태와 생리학적 특징은 생식생리학에 있어서 이온 통로 관련 기능들을 이해하는데 도움이 될 것이다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제38권4호
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• pp.222-227
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• 2011

Objective: To evaluate the ability of serum anti-M$\ddot{u}$llerian hormone (AMH), FSH, and age to clinically predict ovarian response to controlled ovarian hyperstimulation (COH) in IVF patients with endometriosis. Methods: We evaluated 91 COH cycles, including 43 cycles with endometriosis (group I) and 48 cycles with male factor infertility (group II) from January to December, 2010. Patients were classified into study groups based on their surgical history of endometriosis-group Ia (without surgical history, n=16), group Ib (with a surgical history, n=27). Results: The mean age was not significantly different between group I and group II. However, AMH and FSH were significantly different between group I and group II ($1.9{\pm}1.9$ ng/mL vs. $4.1{\pm}2.9$ ng/mL, $p$ <0.01; $13.1{\pm}7.2$ mIU/mL vs. $8.6{\pm}3.3$ mIU/mL, $p$ <0.01). Furthermore, the number of retrieved oocytes and the number of matured oocytes were significantly lower in group I than in group II. In group II, AMH and FSH as well as age were significant predictors of retrieved oocytes on univariate analysis. Only the serum AMH level was a significant predictor of poor ovarian response in women with endometriosis. Conclusion: Serum AMH may be a better predictor of the ovarian response of COH in patients with endometriosis than basal FSH or age. AMH level can be considered a useful clinical predictor of poor ovarian response in endometriosis patients.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제42권4호
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• pp.149-155
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• 2015

Objective: The goal of this study was to investigate the relationship between serum progesterone (P4) levels on the day of human chorionic gonadotropin (hCG) administration and the pregnancy rate among women undergoing controlled ovarian stimulation for in vitro fertilization (IVF) or intracytoplasmic sperm injection-embryo transfer (ICSI-ET) using a flexible antagonist protocol. Methods: This prospective study included 200 IVF and ICSI-ET cycles in which a flexible antagonist protocol was used. The patients were divided into five distinct groups according to their serum P4 levels at the time of hCG administration (0.80, 0.85, 0.90, 0.95, and 1.00 ng/mL). The clinical pregnancy rate (CPR) was calculated for each P4 interval. Statistically significant differences were observed at a serum P4 level of 0.9 ng/mL. These data suggest that a serum P4 concentration of 0.9 ng/mL may represent the optimal threshold level for defining premature luteinization (PL) based on the presence of a significant negative impact on the CPR. Results: The CPR for each round of ET was significantly lower in the PL group defined using this threshold (25.8% vs. 41.8%; p=0.019), and the number of oocytes retrieved was significantly higher than in the non-PL group ($17.3{\pm}7.2$ vs. $11.0{\pm}7.2$; p=0.001). Elevated serum P4 levels on the day of hCG administration were associated with a reduced CPR, despite the retrieval of many oocytes. Conclusion: Measuring serum P4 values at the time of hCG administration is necessary in order to determine the optimal strategy for embryo transfer.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제40권3호
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• pp.131-134
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• 2013

Objective: To evaluate the effect of the addition of estradiol to luteal progesterone supplementation in GnRH antagonist cycles for infertile patients undergoing IVF/ICSI. Methods: One hundred and ten infertile patients, aged 28 to 39 years, were recruited for this prospective randomized study. They were randomly assigned to receive vaginal progesterone gel (Crinone) along with 4 mg estradiol valerate (group 1, n=55) or only Crinone (group 2, n=55) for luteal support. A GnRH antagonist multiple dose protocol using recombinant human FSH was used for controlled ovarian stimulation (COS) in all of the subjects. The COS results and pregnancy outcomes of the two groups were compared. Results: Group 1 and 2 were comparable with respect to the patient characteristics. The COS and IVF results were also comparable between the two groups. There were no differences in the clinical pregnancy rate (PR) and multiple PR between the two groups. However, the embryo implantation rate were significantly higher in group 1 than that in group 2 (22.2% vs. 13.3%, p=0.035). The incidence of luteal vaginal bleeding (LVB) was significantly lower in group 1 (7.4% vs. 27.8%, p=0.010). Conclusion: The addition of estradiol to luteal progesterone supplementation in GnRH antagonist cycles reduces the incidence of LVB and increases the embryo implantation rate in infertile patients undergoing IVF/ICSI.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제30권4호
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• pp.333-340
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• 2003

Objective: This study was performed to examine the maturation and the development to the blastocyst stage of immature oocytes collected from patients with high risk of ovarian hyperstimulation syndrome (OHSS). Materials and Methods: Cumulus-oocyte complexes (COCs) were collected following only HCGpriming for non stimulated IVF-ET cycles of the patients. At the time of oocyte collection, COCs were classified into three groups in accordance with their appearance (Group I: oocytes with dispersed cumulus cells; Group II: oocytes with compacted cumulus cells; Group III: oocytes with sparse cumulus cells). The in vitro maturation and blastocyst development rates of the COCs were compared among these groups. From August 2001 to June 2002, 48 IVM/IVF-ET cycles from 42 patients (mean age: $32.4{\pm}3.8$ years) were performed. To prevent the occurrence of OHSS, the patients were primed with 10, 000 IU HCG alone 36 h before oocyte collection without gonadotropin stimulation. Oocytes were aspirated on cycle days from 7 to 13. The normal COCs were classified into three groups according to their appearance. The aspirated immature oocytes were cultured in YS maturation medium containing 30% (v/v) human follicular fluid (HFF), 1 IU/ml FSH, 10 IU/ml HCG and 10 ng/ml rhEGF. Fertilization was induced by intracytoplasmic sperm injection (ICSI). All zygotes were co-cultured with cumulus cells in $10{\mu}l$ YS medium containing 10% HFF until day 7 after oocyte collection. Blastocyst transfer was performed on day 5 after ICSI. Results: Th e mean number of oocytes cultured in the IVM/IVF cycles was $24.7{\pm}10.6$. Of 1185 COCs, those assigned to Group I, II and III were 470 (39.7%), 414 (35.0%) and 301 (25.4%), respectively. The maturation rate (94.5%, 444/470, p<0.05) in Group I was significantly higher than those of Group II (62.8%, 260/414) and Group III (73.1%, 220/301). Especially, 30.9% of COCs in Group I (145/470) was matured on the day of oocyte aspiration. There were no differences in the rates of fertilization and cleavage among the three groups. The development rate to the blastocyst stage in Group I (54.6%, 206/377, p<0.05) was also significantly higher than those in Group II (33.0%, 68/206) and Group III (30.1%, 52/173). Twenty-four clinical pregnancies (50.0%) was obtained and 22 pregnancies (45.8%) are ongoing. Implantation rate in the present study was 24.6%. Conclusion: These results suggest that there is a positive correlation between the appearance of COCs and the developmental competence of the immature oocytes in non stimulated IVM/IVF cycles.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제24권2호
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• pp.225-232
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• 1997

폐색성 혹은 비폐색성 무정자증에서 부정소 정자채취법 등이 부적절하다고 여겨질때는 정소 조직을 일부 절제하여 그 조직으로부터 정자를 직접 채취하게 되는데 일반적으로 이렇게 정소로부터 추출한 정소정자는 운동성이 전혀 없거나 매우 약한 운동성을 보이는 경우가 많다. 본 연구의 목적은 이러한 정소정자를 Vero cell과 공배양을 시킴으로써 운동성을 획득시키거나 향상시키고 이를 수정시키는 시기까지 지속시킴으로써 정소정자추출술 (TESE)을 시행하는 환자나 의료진들에게 보다 편안하고 융통성있는 시간대를 부여하고, 아울러 정자직접주입술 (ICSI)을 보다 용이하게 하여 성공적인 수정률과 임신율을 얻음에 있다. 또한 ICSI를 시행한 후, 운동성이 향상된 잉여의 정소정자를 냉동보존함으로써 차후에 TESE을 다시 시행치않고도 시험관 아기 시술을 시도할 수 있는 부가적인 잇점도 있다고 할 수 있다. 대상환자군은 정관폐색증(n=11) 혹은 비정관폐색증(n=2)을 보이는 13명의 무정자증의 남성불임환자였으며 난자회수예정일 3일전에 TESE를 시행하여 정소정자를 얻은 후 이를 정자직접주입술이 시행되는 당일까지 Vero cell과 공배양을 실시하였다. Vero cell과의 공배양에 의하여 운동성이 있는 정소정자의 수는 공배양전과 비교하여 평균 3.3배가 증가하였으며, 특히 공배양전에 운동성이 있는 정소정자의 수가 50,000/ml이하의 미약한 운동성만을 보였던 경우 (n=5)에는 공배양 후에 운동성이 있는 정소정자 수의 평균증가율이 7.7배였다. 공배양전 정자운동성이 전혀 없었던 2례의 비정관폐색증환자중 3일간의 공배양을 통하여 1례에서 운동성을 획득한 정소정자를 얻을 수 있었으며 (14,300/ml), 정자직접주입술을 통하여 성공적인 수정 및 임신에 도달할 수 있었다. Vero cell과 공배양을 하고 ICSI했던 결과, 평균 수정률은 75.0% 이었으며 임신율은 61.5%였다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제45권3호
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• pp.129-134
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• 2018

Objective: In frozen and thawed embryos, the zona pellucida (ZP) can be damaged due to hardening. Laser-assisted hatching (LAH) of embryos can increase the pregnancy rate. This study compared thinning and drilling of the ZP before frozen embryo transfer (FET). Methods: Patients were randomly allocated into two groups for LAH using thinning or drilling on day 2 after thawing. Twenty-five percent of the ZP circumference and 50% of the ZP thickness was removed in the thinning group, and a hole $40{\mu}m$ in diameter was made in the drilling group. Results: A total of 171 in vitro fertilization/intracytoplasmic sperm injection FET cycles, including 85 cycles with drilling LAH and 86 cycles with thinning LAH, were carried out. The thinning group had a similar ${\beta}$-human chorionic gonadotropin-positive rate (38.4% vs. 29.4%), implantation rate (16.5% vs. 14.4%), clinical pregnancy rate (36.0% vs. 25.9%), miscarriage rate (5.8% vs. 2.4%), ongoing pregnancy rate (30.2% vs. 23.5%), and multiple pregnancy rate (7.0% vs. 10.6%) to the drilling LAH group. There were no significant differences in pregnancy outcomes between subgroups defined based on age (older or younger than 35 years) or ZP thickness (greater or less than $17{\mu}m$) according to the LAH method. Conclusion: The present study demonstrated that partial ZP thinning or drilling resulted in similar outcomes in implantation and pregnancy rates using thawed embryos, irrespective of women's age or ZP thickness.