• Biomolecules & Therapeutics
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• 제22권6호
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• pp.553-557
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• 2014

Verapamil is used in the treatment of hypertension, angina pectoris, and atrial fibrillation. Recently, several studies have demonstrated that verapamil increased the optic nerve head blood flow and improved the retrobulbar circulation. All these show that verapamil is potentially useful for ophthalmic treatment. Thus, the aim of this study is to investigate whether verapamil could protect human lens epithelial cell (HLEC) from oxidative stress induced by $H_2O_2$ and the cellular mechanism underlying this protective function. The viability of HLEC was determined by the MTT assay and apoptotic cell death was analyzed by Hoechst 33258 staining. Moreover, Caspase-3 expression was detected by immunocytochemistry and flow cytometry analysis. We also detected Caspase-3 mRNA expression by reverse-transcription-polymerase chain reaction and the GSH content in cell culture. The results showed that oxidative stress produced significant cell apoptotic death and it was reduced by previous treatment with the verapamil. Verapamil was effective in reducing HLEC death mainly through reducing the expression level of apoptosis-related proteins, caspase-3, and increasing glutathione content. Therefore, it was suggested that verapamil was effective in reducing HLEC apoptosis induced by $H_2O_2$.

• 대한의생명과학회지
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• 제4권2호
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• pp.77-86
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• 1998

백내장 환자의 수정체낭에서 연령차이에 따른 아교질과 type IV 아교섬유의 면역화학 반응 양상, apoptosis현상 및 수정체 상피세포의 전자현미경적인 변화를 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. Van Gieson염색소견은 수정체낭의 앞층과 앞아래층에서 짙은 염색반응이 있었으나 나이가 많을수록 반응이 감소되었다. Type IV 아교섬유 면역화학반응은 수정체낭의 앞층과 상피세포 주위에서 현저하게 일어났으며 나이가 많을수록 반응이 감소되었다. Periodic acid skiff-alcian blue반응의 변화는 수정체낭의 앞층에서 나이가 많을수록 현저하게 감소되었다. 세포자연사 현상은 수정체낭 상피세포의 핵내에서 일어났으며 나이가 많을 수록 반응이 일어나는 세포의 수가 감소되는 경향을 보였다. 수정체 상피세포의 전자현미경적인 변화는 40대까지는 외측 세포막의 folding (이하 주름)과 세포질내 공포가 증가되고 골지복합체가 발달되었으나 60대에서는 부분적으로 돌기는 내지만 골지복합체는 관찰되지 않았다. 수정체 상피세포의 바닥막부분에서는 나이가 들수록 거친 섬유들이 수정체 상피세포와 수정체낭을 격리시키고 있었으며, 수정체낭와 중간층은 40대군은 특징적으로 과립상의 구조물들이 집단적으로 축적된 부분들이 관찰되었고 60대군에서는 선상의 섬유성구조들이 나타났으며 짙은 전자밀도를 가진 과립의 수가 감소하였다.

• 한국안광학회지
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• 제20권1호
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• pp.51-60
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• 2015

목적: 시판되고 있는 소프트콘택트렌즈용 다목적용액이 사람의 각막상피세포에 미치는 세포독성을 이미지 분석법을 이용하여 평가하고자 하였다. 방법: 각막상피세포를 6종류의 다목적용액(A~F)이 0.05~50% 포함된 배양액에서 각각 2시간, 12시간, 24시간, 48시간 동안 배양하였다. 배양 후 각막상피세포를 고정한 다음 Draq 5로 염색하고 공초점현미경과 ImageXpress $Ultra^{TM}$를 이용하여 세포형태를 관찰하고 세포생존율과 세포자살(apoptosis)을 비교하였다. 결과: 각막상피세포 생존율과 세포자살은 다목적용액을 2시간 처리한 경우에는 모든 제품에서 대조군과 차이가 없었으나, 12시간 이상 처리한 경우에는 B~F 제품에서 대조군의 52~75% 수준으로 감소하였고, 세포자살은 모든 제품에서 차이가 없었다. 24~48시간 처리한 경우에는 생존율이 29~73% 수준으로 감소하였고(p<0.05), 세포자살은 199~526% 증가하였다. 제품별로는 다목적용액 D, E, F가 A보다 각막상피세포 생존율을 감소시켰고 세포자살을 증가시켰다(p<0.05). 결론: 저농도의 다목적용액은 각막상피세포 독성에 영향을 미치지 않지만 고농도의 다목적용액은 각막상피세포의 자살을 유도하고 세포생존율을 저하시킬 수 있으므로 다목적용액의 성분은 소독기능이 우수하고 독성이 없는 성분으로 개발되어야 할 것으로 사료된다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제57권3호
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• pp.217-223
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• 2019

Acanthamoeba castellanii has ubiquitous distribution and causes primary acanthamoebic keratitis (AK). AK is a common disease in contact lens wearers and results in permanent visual impairment or blindness. In this study, we observed the cytopathic effect, in vitro cytotoxicity, and secretion pattern of cytokines in human corneal epithelial cells (HCECs) induced by A. castellanii trophozoites and/or cysts. Morphological observation revealed that panked dendritic HCECs co-cultured with amoeba cysts had changed into round shape and gradually died. Such changes were more severe in co-culture with cyst than those of co-cultivation with trophozoites. In vitro cytotoxicity assay revealed the highest cytotoxicity to HCECs in the co-culture system with amoeba cysts. A. castellanii induced the expression of $IL-1{\alpha}$, IL-6, IL-8, and CXCL1 in HCECs. Secreted levels of $IL-1{\alpha}$, IL-6, and IL-8 in HCECs co-cultured with both trophozoites and cysts were increased at an early incubation time (3 and 6 hr). These results suggested that cytopathic changes and pro-inflammatory cytokines release of HCECs in response to A. castellanii, especially amoebic cysts, are an important mechanism for AK development.