Ganglioside GM3 and sialidase activities in human fetal liver have been investigated. Gangliosides were extracted from fetal livers by the Folch-Suzuki method and analyzed by high-performance thin layer chromatography (HPTLC). GM3 increased, but lactosylceramide (LacCer) decreased predominantly over the developmental stages. Sialidase in human fetal liver was mainly localized in the lysosomal fraction and its activity was high in the earlier stages of development. The optimum pH for this enzyme was 4.3~4.4. Sialidase was more active with the ganglioside mixture than with GM3, sialyllactose or fetuin. Fetal liver sialidase was still active (20% activity) in the presence of 25% methanol. These results suggested that the changes of the ganglioside GM3 and sialidase activity may be involved in the regulation of cell growth in human fetal liver during development.
Hemopoiesis and morphogenesis of the human fetal liver through from 10 to 32 weeks of gestation were investigated by light and electron microscopy. The results obtained were as follows. Hemopoiesis of fetal liver tissue was found from 10 to 32 weeks of gestation, but the hemopoiesis was decreased at 32 weeks of gestation. At the 32 weeks of gestation, matured erythrocytes were observed in the sinusoid, and formation of liver cell cord and portal triad were established. Differentiation of hepatic cell was characterized by the increase of amount of cell organelles within cytoplasm, decrease of hemopoietic cell, morphological change of nuclear envelope from folding form to round form during the developmental period. These results suggest that human fetal liver plays a hematopoietic function until bone marrow and spleen play their function, but morphology of liver at 32 weeks of gestation was differed with structure observed in liver of adult.
The asialoglycoprotein receptor (ASGPR) was the first described mammalian lectin that mediates the specific binding and internalization of galactose/N-acetylgalactosamine-terminating glycoproteins by hepatic parenchymal cells. H1 and H2 are known as essential subunits of the functional ASGPR. There were close similarities in ASGPR H2 subunits between cultured cell line HepG2 and normal human liver cells including identical sequences at both termini. It was therefore expected that there may be some similarities between the subunits from normal liver cells and fetal liver cells. The two subunits of human fetal liver ASGPR. designated FL-H1 and FL-H2. were cloned from cDNA library by peR and the sequences were compared with the known HI and H2 sequences of HepG2, and the H1 sequence of nornal human liver cells. The results showed that FL-H1 was identical to H1 of HepG2. Whereas FL-H2 contains a 15-bp miniexon, but missing 57-bp at the near upstream from the membrane-spanning domain compared to H2 of HepG2 and normal human liver cells indicating that FL-H2 resulted from a differential splicing compared to HepG2 and normal liver cells.
Kim, Jae-Wha;Song, Jae-Chan;Lee, In-Ae;Lee, Young-Hee;Nam, Myoung-Soo;Hahn, Yoon-Soo;Chung, Jae-Hoon;Choe, In-Seong
BMB Reports
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v.28
no.5
/
pp.402-407
/
1995
Single-run Partial cDNA sequencing was conducted on 1,592 randomly selected human fetal liver cDNA clones of Korean origin to isolate novel genes related to liver functions. Each partial cDNA sequence determined was analyzed by comparing it with the databases. GenBank, Protein Information Resource (PIR) and SWISS-PROT Protein Sequence Data Bank. From a set of 1.592 cDNA clones reported here, 1,433 (90.0% of the total) were informative cDNA sequences. The other 159 clones were identified as DNA sequences which had originated from the cloning vector. Among 1,433 informative partial cDNA sequences, 851 (59.3%) clones were revealed to be identical to known human genes. These known genes have been classified into 225 different kinds of genes. In addition, 340 clones (23.7%) showed various degrees of homology to previously known human genes. Ninety four (6.6%) clones contained various repeated sequences. Twenty four (1.7%) partial cDNA sequences were found to have considerable homology to known genes from evolutionarily distant organism such as yeast, rice, Arabidopsis, mouse and rat, based on database matches, whereas 124 (8.7%) had no Significant matches. Human homologues to functionally characterized genes from different organisms could be classified as candidates for novel human genes of similar functions. Information from the partial cDNA sequences in this study may facilitate the analysis of genes expressed in human fetal liver.
Kim, Dae-Jin;Sim, Kyu-Min;Kim, Sung-Su;Lee, Won-Bok;Kim, Kyung-Yong
Applied Microscopy
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v.33
no.1
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pp.41-48
/
2003
The hemopoiesis in human fetal spleen was studied with transmission electron microscope. There were undifferentiated proerythroblast, basophilic erythroblast, polychromatophilic erythroblast, and acidophilic erythroblast. Besides, enucleated nuclei and mitoses were present. Groups of erythroblastic cells were surrounded by certain cell. The structure was identical to erythropoietic island found in fetal liver. So, erythropoisis in spleen was developing in a pattern similar to fetal liver. Megakaryobalst were found in spleen, but there was no mature cells, cells in mitosis nor platelet formation. It was not clear whether megakaryoblast in circulation was trapped in spleen or participated in megakaryopoiesis. In summary, erythropoiesis took place in fetal spleen in a pattern similar to fetal liver and bone marrow. But it was not certain whether megakaryopoiesis took place in fetal spleen.
Background: In contrast to evidences of Ig H chain receptor editing in transformed cell lines and transgenic mouse models, there has been no direct evidence that this phenomenon occurs in human developing B cells. Methods: $V_HDJ_H$ rearrangements were obtained from genomic DNA of individual $IgM^-$ B cells from liver and $IgM^+B$ cells from bone marrow of 18 wk of gestation human fetus by PCR amplification and direct sequencing. Results: We found three examples of H chain receptor editing from $IgM^+$ and $IgM^-human$ fetal B cells. Two types of $V_H$ replacements were identified. The first involved $V_H$ hybrid formation, in which part of a $V_H$ gene from the initial VDJ rearrangement is replaced by part of an upstream $V_H$ gene at the site of cryptic RSS. The second involved a gene conversion like replacement of CDR2, in which another $V_H$ gene donated a portion of its CDR2 sequence to the initial VDJ rearrangement. Conclusion: These data provide evidence of receptor editing at the H chain loci in developing human B cells, and also the first evidence of a gene conversion event in human Ig genes.
The flavin-containing monooxygenases (FMOs) (EC 1.14. 13.8) are NADPH-dependent flavoenzymes that catalyze oxidation of soft nucleophilic heteroatom centers in a range of structurally diverse compounds including foods, drugs, pesticides, and other xenobiotics. In humans, FMOl appears to be the predominant form expressed in human fetal liver. cDNA-expressed human FMO and human liver microsomal FMO have been observed to N- and S-oxy-genate nucleophilic nitrogen- and sulfur-containing drugs and chemicals, respectively. In the present study, FMOl can be expressed in the baculovirus expression vector system at level of 2.68 nmol FMOl/mg of membrane protein. This isoform was examined for its capacity to metabolize methimazole to its S-oxide using thiocholine assay. Kinetic studies of its S-oxide by recombinant human FMO1 result in Km of 7.66 $\mu$M and Vmax of 17.79 nmol/min/mg protein.
The relationship between intravascular erythroblasts and Kupffer cells in the human fetal liver from 11 to 20 week gestation was studied ultrastructurally. The walls of the developing sinusoids consisted of two cell types devoid of basal lamina, the nonfenestrasted endothelial cells and Kupffer cells. Kupffer cells examined were easily identified by their content of phagosmes and their morphological features, and partially proliferated by mitotic division which was different way of proliferation from adult. Some extruded nuclei of acidophilic erythroblasts were trapped within Kupffer cells which exhibited various stages of intracellular digestion of the nuclei. During high activity of human fetal hepatic erythropoiesis, Kupffer cells were found in association with developing erythrob-lasts, which was similar with erythroblastic islands. The developing erythroblasts were partially surrounded by multilaminated membrane system of the Kupffer cell consisting erythroblastic island, or in contact with Kupffer cell via cytoptasmic processes in the sinu-soidal lumen. The presence of these islands was confirmed by transmission and scanning electron microscopic study. The results demonstrate that Kupffer cells in fetal heaptic erythropoiesis phagocytized expelled nuclei and contributed to erythropoiesis mechanically and physiologically by the hypertrophy and the formation of erythroblastic islands.
A primary culture of human fetal hepatocytes was obtained through a therapeutic abortion process at 26 weeks of gestation period. More than $10^8$ cells were seeded on a plastic plate. These hepatocytes were infected with hepatitis B virus (HBV). The HBV was purified from serum of one chronic HBV carrier. Transformed hepatocytes were subcultured in a 10% FBS-supplemented medium. The morphology of the transformed cell was epithelial-like. The cells from the first pass showed signs of early proliferation and had a latent period of more than 3 months after 6-7 passages. After the rest period, the transformed cell proliferated actively and they were subcultured every three days. Transformed hepatocytes were characterized by detection of the HBV transcript by RT-PCR. The secretion of virions from transformed cells was investigated by PCR with the cell medium. Two types of virions secreted into the culture medium were examined by using the transmission electron microscope. Another approach to study the secretion of virions in to culture medium was carried out with HBV antibody. HBsAg was detected in the culture medium of transformed cells using ELISA and Western blot analyses. These data suggested that the human fetal hepatocyte cell line has been established by infection of HBV, in which this cell line secreted viral particles into the culture medium.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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