• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제25권6호
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• pp.829-832
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• 2004

The pure product of 2,3-diaminophenazine was prepared by the enzyme-catalyzed reaction of ophenylenediamine-$H_2O_2$-horseradish peroxidase and characterized by UV/Vis spectroscopy, IR spectroscopy and NMR spectroscopy. The electrochemical behaviour of 2,3-diaminophenazine on the glassy carbon electrode was studied. The interaction between 2,3-diaminophenazine and deoxyribonucleic acid was studied by cyclic voltammetry method and UV/Vis spectroscopy, which indicated that the interaction between them is intercalation. The influence of reacting time was also studied. The binding ratio of the 2,3-diaminophenazine-DNA complex is calculated to be 1 : 2 and the binding constant is to be $5.07{\times} 10^3L{\cdot}mol^{-1}$ at room temperature.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제24권2호
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• pp.148-153
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• 2009

본 연구에서는 심혈관계 질환의 표지인자인 콜레스테롤의 농도를 새롭게 개발한 형광 크로마토그라피 방법에 의하여 측정 하고자 시도하였다. 개발된 측정 시스템은 크로마토그라피 스트립이 들어 있는 카트리지, 발색제 AEC, 콜레스테롤 옥사데이즈 (Cholesterol Oxidase, CO), 콜레스테롤 에스트라아제(Cholesterol Esterase, CE), 호스래 디쉬페록시다아제 (Horseradish peroxidase, HRP)를 포함하는 효소혼합 수용액, 그리고 형광 판독기로 구성되어 었다. 콜레스테롤 농도 변화에 따른 형광 세기 변화로 얻은 상관계수 r= 0.968로 측정 가능한 농도 범위에서 신뢰할 만한 직선성 관계를 제시하여 주었다. 회복률과 Hitachi 747 검사기기와 비교 테스트에서는 각각 106.5-94%와 상관관계 r = 0.939 (p<0.001)로 비교적 높은 유의성을 보여주었다. 따라서 본 연구에서 개발된 새로운 콜레스테롤 농도 측정법은 빠른 반응 시간 (8분)과 적은 시료량 ($5\;{\mu}l$)을 사용하기에 시료를 실험실로 운반할 필요없이 클리닉에서 측정 가능한 준현장검사 플랫폼형으로 개발되었으며 기존의 고가의 자동화 장비를 사용하는 생화학적 진단방식 대체용으로의 응용이 기대된다.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제32권6호
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• pp.447-454
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• 2017

본 연구의 목적은 식품 제조 중 표백 및 살균에 사용되는 과산화수소($H_2O_2$)의 잔류 농도 검출에 활용 될 수 있는 유리탄소전극 기반의 바이오센서의 개발이다. 미국 FDA 및 국내 식품의학안전처 등 식품 용 과산화수소(food grade $H_2O_2$)는 국내외적으로 35% $H_2O_2$ 수용액으로 규정한다. 연구에서 개발한 바이오센서는 감응 물질로 사용된 horseradish peroxidase를 graphene oxide와 aniline과 함께 biocomposite를 형성시킨 후 중성 pH에서 본 연구에서 새롭게 개발된 전기화학적 증착법을 수행하여 개발되었다. 센서구조 및 특성 평가를 위하여 SEM, 순환 전압 전류법 등을 수행하였으며 본 연구에서 개발된 바이오센서는 $10-500{\mu}M$ 농도의 $H_2O_2$에 대하여 직선상의 농도 의존적인 반응을 나타내었으며 최저 검출 한계는 $0.12{\mu}M$으로 산출되었다. 본 연구에서 개발된 센서의 전략적 가치는 향후 오징어포, 건어물 등 널리 유통되는 식품 중에 함유된 식품용 $H_2O_2$ 미량을 현장에서 쉽게 분석 할 수 있어서 비용-효과적 측면에서 그 가치가 우수하다는 것을 제시한다.

• 대한의생명과학회지
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• 제5권1호
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• pp.11-15
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• 1999

갑상선 질환의 진단에 필요한 갑상선 호르몬의 측정시 thyroxine (T$_4$)농도 측정방법이 가장 흔히 이용되고 있다. 과거에 많이 활용되어온 방사면역측정법 (RH)이 폐기물 처리 및 관리인원 등의 인적, 물적인 문제가 크게 대두되고 있는 점을 감안하면 효소결합면역측정법의 확립은 큰 의미가 있다고 하겠다. 본 연구에서는 thyroxine (T$_4$)에 대한 단클론 항체 (monoclonal antibody)를 이용하여 T$_4$에 horseradish-peroxidase를 화학적으로 결합시킨 microtiter plate에 HRP-conjugate T$_4$와 혈청내의 T$_4$간의 서로 경쟁적인 반응을 이용한 표준곡선을 얻었다. 그리고 이렇게 확립한 기법을 임상적인 갑상선질환 환자의 혈청을 기존의 chemiluminescence 방법을 이용하여 얻은 결과와 비교하여 본 실험에서 확립한 ELISA검사 수치의 유용성을 검토하였으며 이 방법의 임상이용 가능성을 검토하였다.

• 생명과학회지
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• 제20권1호
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• pp.1-8
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• 2010

본 연구자들의 앞선 연구에서는 햄스터 상구에서 AMPA 수용체의 아형인 GluR1과 GluR4의 분포와 눈 적출 이후 이들 수용체의 분포를 면역세포화학적 방법으로 연구하였다. 또한, 표지한 GluR1과 GluR4를 칼슘결합단백질인 calbindin D28K, calretinin, parvalbumin과 GABA로 표지하여 비교하였다. 본 연구에서 역행성이동추적물질(retrograde tracer)인 호스래디시퍼옥시다아제(horseradish peroxidase, HRP)를 상구의 각 주요 상행로와 하행로에 주입함으로써 GluR1- 면역반응 신경세포들과 GluR4- 면역반응 신경세포들이 투사신경세포(projection neurons)임을 밝혀내었다. Tecto-reticulospinal pathway (TRS)와 dorsal lateral geniculate nucleus (dLGN)으로 HRP 를 주입한후, 햄스터들은 회복을 위해 48시간 동안 살려둔 뒤 관류(perfusion)하였다. GluR- 면역반응 처리된 절편들은 역행성 표지된 신경세포를 지님을 확인하였다. HRP를 주입하였더니 단지 적은 수의 GluR1- 면역반응 신경세포들이 TRS (1.4%)와 dLGN (2.6%)으로 투사되었고, 반면에 많은 수의 GluR4- 면역반응 신경세포들이 TRS (32.7%)로 투사되었다. 사이/투사 신경세포(inter/projection neurons)들은 GluR 아단위들의 분류된 분포와 차별화된 양상을 보였고 이들의 이러한 분포는 칼슘결합단백질들과 GABA와는 겹쳐지지 않았으며, 일전에 발표했던 시각적 행동 반응에서 안구 적출 후 수용체 아단위들의 기능적 다양화와는 차별화된 양상을 보였다.

• Korean Chemical Engineering Research
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• 제51권1호
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• pp.111-115
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• 2013

Horseradish peroxidase 효소촉매를 이용하여 dioxane:수용액(80:20 v/v) 혼합용액에서 poly(p-phenylphenol) 수지를 합성하기 위한 최적 반응조건과 생성된 수지의 열분해 안정성과 가열특성을 thermogravimetric analysis (TGA)와 differential scanning calorimetry (DSC) 방법을 통해서 각각 조사하였다. 효소의 사용량이 0.25 mg/mL로 증가할 때 수지의 합성수율은 급격하게 증가하였으나 효소의 사용량이 0.25 mg/mL 이상으로 증가하더라도 수지의 합성수율은 크게 증가하지 않았다. 또한 sodium acetate (100 mM, pH 4~6)와 sodium phosphate (100 mM, pH 7~9) 완충용액을 수용액으로 사용할 경우 pH가 증가할수록 페놀수지의 합성수율이 증가하였다. 그러나 수용액의 pH가 6과 9일 때, 수지의 합성수율은 사용하는 완충염의 종류에 따라서 크게 좌우되었다. 즉 pH 6에서 sodium acetate 대신 sodium phosphate를 사용하면 합성 수율은 15% 정도 감소하였다. 또한 pH 9에서 sodium phosphate 대신 sodium bicarbonate를 사용할 경우 합성 수율이 약 20% 정도 크게 감소하였다. 수용액의 pH가 4~7 범위에서 2,2'-azinobis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonate) (ABTS)를 전자전달체로 사용하면(2 mM) 합성 수율이 약 10% 정도 향상되었다. TGA 실험결과 pH 9인 수용액에서 ABTS가 2 mM이 첨가된 합성수지의 $800^{\circ}C$에서의 잔류량(char yield)이 47%로 열분해 안정성이 가장 우수하였다. DCS 측정 결과 산성수용액에서 합성된 수지와 중성 및 염기성 수용액에서 합성된 수지의 구조특성은 서로 달랐다. 그러나 모든 합성수지는 열경화성 수지의 특성을 보여주었다.

• Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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• 제31권2호
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• pp.137-142
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• 2005

To analyze the developmental changes in soma diameters of digastric motoneurons, wheat-germ agglutinin conjugated horseradish peroxidase (WGA-HRP) was injected into the digastric muscle and visualized the retrogradely HRP-labeled motoneurons through tungstate/tetramethylbenzidine (TMB) and following diaminobenzidine (DAB) reactions. The results obtained from Sprague-Dawley rats at postnatal days 1 (P1), 10 (P10) and 30 (P30) indicated as follows: firstly, soma diameters of digastric motoneurons showed unimodal distribution in all postnatal days examined; secondly, the period of P1 to P10 (period 1) showed about 2 times faster growth rate than that of P10 to P30 (period 2); thirdly, the smallest soma examined in each postnatal day exhibited slower growth rate with that of the largest one (increase ratio in soma diameters from P1 to P30, smallest vs. largest = 1.62 : 1.93); Finally, relative growth rates a day showed again that period 1 had faster growth rate than that of period 2. Consequently, developmental changes in soma diameters of digastric motoneurons resulted in very different growth rates between both periods. This implies that the growth of the soma is almost completing within P10 and thereafter growing slowly. The period 1 and 2 are corresponding to sucking and sucking/masticatory period, respectively. Therefore present study providing morphological changes in soma diameters of digastric motoneurons suggests that both periods and their different growth rates of the motoneurons in each period may closely be related with each other.

• 대한전기학회:학술대회논문집
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• 대한전기학회 2011년도 제42회 하계학술대회
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• pp.1690-1691
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• 2011

본 논문에서는 H1N1 인플루엔자 A 바이러스(influenza A H1N1 virus) 검출을 위한 산화아연 나노구조(zinc oxide nano structure) 기반의 전기화학적 면역센서를 제작하고 그 특성을 분석하였다. H1N1 인플루엔자 A 바이러스는 빠른 전파 속도 때문에 정확하고 빠른 검출이 필요하다. 먼저, 2 $mm^2$의 표면적을 갖는 패턴된 금 전극 위에 열수방식(hydrothermal method)으로 성장시킨 산화아연 나노구조가 선택적으로 형성되도록 리프트-오프(lift-off) 방법을 사용하였다. 0.01 M phosphate buffered saline(pH 7.4)에서 2 ${\mu}g$/mL 농도의 1차 항체를 정전기력에 의해 산화아연 나노구조에 고정화한 후, 10 pg/mL ~ 5ng/mL 농도의 H1N1 항원을 적용하여 포획 항체에 결합시키고 HRP(horseradish peroxidase) 효소가 결합된 검출 항체를 항원에 결합시키는 샌드위치 ELISA법을 이용하였다. HRP와 반응하는 TMB(3,3', 5,5'-tetramethylbenzidine)와 과산화수소가 포함된 acetate buffered 용액(pH 5)을 전해질로 사용하고 순환전압전류 측정법(cyclic voltammetry)으로 센서의 특성을 분석하였다. 측정된 순환전압전류그래프(cyclic voltammogram)에서 H1N1 항원 농도 10 pg/mL ~ 5 ng/mL의 응답 전류는 276.47 ${\pm}$ 21.72 nA (평균 ${\pm}$ 표준편차, n=4) ~ 478.89 ${\pm}$ 6.21 nA로 측정되었고, logarithmic하게 증가하는 응답 전류 특성을 보였다.

• International Journal of Oral Biology
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• 제40권4호
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• pp.175-182
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• 2015

Previous studies suggested that myelinated axons innervating rat molar pulps undergo morphological changes in their peripheral course. However, little information is available on the morphological feature of the parent axons at the site of origin. We therefore investigated the size of the myelinated parent axons and their morphological features at the proximal sensory root of the trigeminal ganglion by horseradish peroxidase (HRP) injection into rat upper molar pulps and subsequent light and electron microscopy. A total of 248 HRP-labeled myelinated axons investigated were highly variable in the size. Fiber area, fiber diameter, axon area (axoplasm area), axon diameter (axoplasm diameter), and myelin thickness were $11.32{\pm}8.36{\mu}m^2(0.80{\sim}53.17{\mu}m^2)$, $3.99{\pm}1.53{\mu}m(1.08{\sim}9.26{\mu}m)$, $8.70{\pm}6.30{\mu}m^2(0.70{\sim}41.83{\mu}m^2)$, $3.13{\pm}1.13{\mu}m(0.94{\sim}7.20{\mu}m)$ and $0.43{\pm}0.23{\mu}m(0.07{\sim}1.06{\mu}m)$, respectively. The g-ratio (axon diameter / fiber diameter) of the labeled axons was $0.79{\pm}0.05$ (0.61~0.91). Axon diameter was highly correlated with myelin thickness (correlation coefficients, r=0.83) but little correlated with g-ratio (r=-0.33) of individual myelinated parent axons. These results indicate that myelin thickness of the myelinated parent axons innervating rat molar pulps increase with increasing axon diameter, thus maintaining a constant g-ratio.

• The Korean Journal of Physiology
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• 제25권1호
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• pp.87-99
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• 1991

In order to elucidate whether capsaicin applied topically acts as a pain-producing subastance or as a tastant, neuronal activities of the chorda tympani nerve(CN), lingual nerve(LN), solitary tract nucleus(STN), and trigeminal nucleus(TGN) were recorded while thermal and taste stimuli, and capsaicin were being applied topically, and algesics intra-arterially to the tongue of cats anesthetized with ${\alpha}-chloralsoe$. In addition, the STN neurons were examined after wheat germ agglutinin-horseradish peroxidase(WGA-HRP) was applied to the CN. The CN fibers responded to taste and thermal stimuli, algesics, and capsaicin. Responses to capsaicin were significantly correlated with those to taste and thermal stimuli. The LN fibers mainly responded to mechanical and thermal stimuli, algesics, and capsaicin. Responses to capsaicin were significantly correlated with those to algesics. The STN neurons responded to taste and thermal stiumli, algesics, and capsaicin. Responses to capsaicin were significantly correlated with those to taste and thermal stiumli in somewhat different fashion from those of the CN fibers. The TGN neurons mainly responded to mechanical stimuli, algesics, and capsaicin. Correlations between responses to capsaicin and any others were not significant. After WGA-HRP was applied to the CN, the STN neurons which receive input from the CN were identified largely in the medio-ventral portion to the solitary tract. These results suggest that capsaicin produce taste as well as pain sensation. Sensory information evoked by capsaicin can be conveyed to the STN, especially medio-ventral portion, via the CN as gustatory information on the one hand, and to the STN or TGN via the LN as noxious information on the other. In addiation, the noxious information may be conveyed to the STN via the CN.