Kim, Dong-Seok;Park, Seo-Hyoung;Kwon, Sun-Bang;Li, Kap-Sok;Youn, Sang-Woong;Park, Kyoung-Chan
Archives of Pharmacal Research
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제27권3호
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pp.334-339
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2004
In this study, the effects of (-)-epigallocatechin-3-gallate (EGCG) and/or hinokitiol (${\beta}-thujaplicin$) on melanogenesis were investigated. Our results showed that both EGCG and hinokitiol significantly inhibited melanin synthesis in a concentration-dependent manner, and that their hypopigmenting effects were stronger than that of kojic acid, which is known to inhibit melanin formation in melanocytes and melanoma cells. Interestingly, EGCG did not show any additive hypopigmenting effect in combination with kojic acid, though EGCG did show a synergistic effect in combination with hinokitiol. Several reports indicate that the activation of extracellular signal-regulated kinase (ERK) induces microphthalmia-associated transcription factor (MITF) degradation. Accordingly, the effects of EGCG and hinokitiol on the ERK signaling pathway were examined. EGCG and hinokitiol induced neither ERK activation nor MITF degradation. On the other hand, both EGCG and hinokitiol reduced the protein levels of MITF and of tyrosinase, the rate limiting melanogenic enzyme, whereas kojic acid had no effect. In addition, hinokitiol strongly downregulated the activity of tyrosinase, whereas EGCG or kojic acid had only a little effect. These results show that both EGCG and hinokitiol reduce MITF production, and suggest that reduced tyrosinase activity by hinokitiol explains their synergistic effect on melanogenesis.
암은 유전적, 대사질환적 그리고 감염성 질환 등에 의해 유발되는 생명을 위협하는 심각한 질환으로서, 세포의 성장이 정상적으로 통제되지 않으며, 공격적인 형태로 주변의 조직이나 장기로 침범하는 경향을 보이는 생명을 심각하게 위협하는 질병이다. 지난 수십 년 간, 인류의 건강을 위협하는 암을 정복하기 위한 지속적인 노력이 있었고, 암 신생 기전 및 항암제 연구가 항암제 내성에 대한 연구와 함께 다양한 연구주제로 다루어져 왔다. Hinokitiol (${\beta}$-thujaplicin)은 측백나무과 편백속에 속하는 나무에서 분비되는 terpenoid 물질로서, 항염증작용, 항균작용 및 몇몇 암세포 주에서 autophagy를 통한 항암효과가 있는 것으로 잘 알려져 있다. 본 연구에서는, hinokitiol이 세포 영양상태의 변화유무에 관계없이, transcription factor EB (TFEB)의 핵으로의 이동을 촉진한다는 것을 확인하였다. TFEB의 핵으로의 이동은 autophagy 및 lysosome관련 유전자의 발현을 촉진시키고, 세포질 내에 증가된 autosome과 lysosomal puncta의 관찰을 가능하게 하였다. Hinokitiol를 HCC827세포에 처리한 경우에서, 세포 내 autophagy의 증가와 더불어, mitochondria의 hyper-fragmentation과 mitochondria의 authophagic degradation (mitophagy)가 함께 증가되는 것이 관찰되었다. Hinokitiol은 자궁경부암 세포주인 HeLa세포와 비소세포 폐암 세포주인 HCC827에서 암세포 특이 독성을 나타내었다. 더욱이, TFEB 과발현을 통해 autophagy를 인위적으로 증가시킨 HeLa 세포에서 hinokitiol에 대한 세포독성은 더욱 강화된 것으로 나타났다. 이러한 결과들을 통해, hinokitiol은 TFEB의 핵으로의 이동을 촉발시키는 강력한 autophagy inducer임을 확인할 수 있었다. 본 연구에서 처음으로 확인된 hinokitiol에 의한 TFEB의 활성화 및 비소세포성 암세포에서 항암효과의 상승작용은 다양한 항암제 저항성 세포들에 대한 새로운 치료법 및 대체요법 개발과 관련된 의미 있는 결과로 향후, 분자수준의 작용기작에 대한 추가적인 연구가 수행되어야 할 것으로 사료된다.
측백에 함유 된 히노키티올의 천연 보존료로서의 이용 가능성을 검토하고자 측백 히노키티올 추출물을 식빵 제조시 이용하여 self-life 연장효과 및 품질특성을 조사하였다. 측백에 함유된 히노키 티올은 수증기 증류로 추출했을 때 측백잎에서 12.06mg/100gdldjt고 측백열매 꼬투리에서 13.78mg/100g이었다. 측백 히노키티올 추출물은 식방의 저장 중 수분이나 pH에는 큰 영향 을 주지 못하였으나, 세균 중식 및 곰팡이 생성에는 억제효과를 보였다. 측백잎 50g 추출물 (히나키티올 함량 6.03mg)을 첨가한 식빵은 저장 2일까지 세균이 전혀 자라지 못하였으며 세균수가 104CUF/g 수준에 도달하는데 4일 걸렸다. 또한 곰팡이 생성은 대조구가 저장 3일 째에 관찰되었으나 측백잎 50g 추출물을 첨가한 것은 5일째 관찰되었다. 식빵의 관능적 품 질은 측백 히노키티올 추출물 첨가로 인하여 그다지 영향을 받지 않았다. 이러한 결과는 식 빵 제조시 식빵 제조시 히노키티올 추출물을 이용하면서 식빵의 shelf-life을 연장시킬 수 있음을 보여 주었다.
Supercritical fluid technology has been an alternative for purification and separation of biological compounds in cosmetic, food, and pharmaceutical products. Solubility information of biological compounds in supercritical fluids is essential for choosing a supercritical fluid processes. The equilibrium solubility of hinokitiol was measured in supercritical carbon dioxide with a static method in the pressure range from 8 to 40 MPa and at temperatures equal to 313.2, 323.2 and 333.2 K. The experimental data were correlated well by Peng.Robinson equation of state and quasi-chemical nonrandom lattice fluid model.
천연살균제나 식품보존제 개발을 위한 항균 및 항산화물질 검색을 목적으로, 느티나무 심재 에탄올 추출물을 용매 분획하여 얻은 석유에테르분획, 디에틸에테르분획, 에틸뭘아세테이트분획 충 항균활성이 가장 우수한 석유에테르분획으로부터 활성물질을 분리하였다. 이 물질의 화학구조는 EI-MS, $^1H$- 및 $^{13}C$- NMR 로 분석한 결과, 나프탈렌 구조를 기본 골격으로 하는 7-hydroxy-3-methoxycadalene으로 동정되었다. 그리고, 이 물질의 항진균활성은 배지점적법을 이용하여 hinokitiol과 비교 검정한 결과, 활성이 hinokitiol보다 우수한 것으로 나타났다. 그러나, 탁도측정법을 이용한 항세균 활성은 그람양성균의 경우 hinokiliol의 80%로 나타나, 세균보다 진균에 대한 항균활성이 우수한 것으로 판명되었다. 또한, 항산화활성을 과산화물가 및 프리라디칼 소거능을 측정하여 천연 항산화제인 ${\alpha}$-tocopherol 및 합성항산화제 인 butylated hydroxytoluene(BHT)과 비교 검정한 결과, ${\alpha}$-tocopherol보다 우수하였으며, BHT와 동등한 것으로 나타났다. 이상의 결과, 느티나무 심재로부터 단리된 7-hydroxy-3-methoxycadalene은 항균 및 항산화 활성이 우수한 물질로 판명되었다.
The oxidation-reduction potentials of cosmetic raw materials, showing tyrosinase inhibitory action, and phenolic compounds structurally similar to L-tyrosine were determined by cylcic voltammetry. The voltammograms obtained could be classified ito 4 patterns (patterns 1-4). Patterns 1, characterized by oxidation and reduction peaks as a pair, was observed with catechol, hydroquinone or phenol, and pattern 2 exhibiting another oxidation peak in addition to oxidation and reduction peaks as a pair was found with arbutin, kojic acid, resorcinol, methyl p-hydroxybenzoate and L-tyrosine as the substrate of tyrosinase. Pattern 3 with an independent oxidation peak only was expressed by L-ascorbic acid, and pattern 4 with a reduction peak only at high potentials, by hinokitiol. The tyrosinase inhibitory activity of these compounds was also evaluated using the 50% inhibitory concentration ($IC_{50}$) and the inhibition constant (Ki) as parameters. Hinokitiol, classified as patterns 4, showed the highest inhibitory activity (lowest $IC_{50}$ and Ki). Hydroquinone showing the second highest activity belonged to pattern 1, which also included compounds exhibiting pattern 2 was relatively low with Ki values being in the order of 10-4 M. Although there was no consistent relationship between oxidation-reduction potentials and tyrosinase inhibitory action, the voltammetry data can be used as an additional index to establish the relationship between the structure and the tyrosine inhibitory activity.
The purpose of this study was to evaluate the clinical effects of Dipotassium glycyrrhizinate, Allantoin, Hinokitiol, Cetylpyridinium chloride containing gel($Dentheth^{(R)}$) on periodontitis. 41 patients with sites having pocket depth of 4-6mm were selected for the study. We classified 2 groups which consisted of 21 patients in the test group(exp.) and 20 patients in the control(placebo) respectively. Following a baseline examination, plaque and calculus were removed and then the experimental gel were handed out to the patients and topical application regimens were initiated. During the 4-week experimental period, pocket depth, bleeding on probing, gingival index, plaque index as a clinical parameters were measured in the baseline, 2 weeks, 4 weeks respectively. A questionnaire was delivered to each patients in 2 weeks, 4 weeks respectively. The results were as follows : 1. Probing pocket depth showed a significant difference in the Exp. group compared with the control group in the changes from baseline to 2 weeks(p<0.05), but there was no significant difference between the groups in the changes from baseline to 4 weeks, from 2 weeks to 4 weeks(p<0.05). 2. The Exp. group showed a significant difference compared with the control group in the changes from baseline to 2 weeks, from baseline to 4 weeks, from 2 weeks to 4 weeks in bleeding on probing(p<0.05). 3. The gingival index showed a significant difference compared with the control group in the changes from baseline to 2 weeks, from baseline to 4 weeks, from 2 weeks to 4 weeks after 4 weeks use of a gel(p<0.05). 4. The plaque index showed a significant difference in the Exp. group compared with the control group in the changes from baseline to 2 weeks(p<0.05), but there was no significant difference between the groups in the changes from baseline to 4 weeks, from 2 weeks to 4 weeks(p<0.05). 5. A questionnaire was consisted of 5 kinds as to bleeding, pus discharge, pain, burning sensation, patient's satisfaction and all of the questions showed a significant difference compared with the control group in the changes from 2 weeks to 4 weeks(p<0.05). 6. During the 4-week experimental period, important side-effects were not finded out, but each groups had one patient appealed nausea or discomfort respectively. These results indicate that application of periodontitis medical gel was useful as an additional aid of mechanical treatment.
Environment-friendly, commercially-available agricultural products were investigated for antimicrobial activity against Sclerotinia sclerotiorum, as a pathogen of sclerotium disease. Then ${\beta}$-thujaplicin from Chamaecyparis obtuse was investigated for antifungal activity against six kinds of pathogenic fungi. It showed a statistically significant (p <0.001) growth inhibition effect on Sclerotinia sclerotiorum as a pathogen of sclerotium disease, Rhizoctonia solani AG-4 as a pathogen of damping off, Phytophthora capsici as a pathogen of phytophthora blight, and Colletotrichum coccodes as a pathogen of anthracnose at a concentration of 50 ppm and on Stemphylium solani as a pathogen of spotting disease and Alternaria alternata as a pathogen of black mold at a concentration of 100 ppm. In conclusion, these results indicate that it may be possible to develop environment-friendly agricultural products using ${\beta}$-thujaplicin compounds.
218종의 목본식물 자원으포부터 높은 항율력올 보인 Schima wallichii subsp. liukiuellsis로부터 항균활성물질을 추출, 정제하였다. Schim$\alpha$의 향균물질 추출에 가장 적합한 용매는 70% 에탄올이었으며, 계젤에 따른 항균활성은 차이를 보이지 않았고, 부위별로는 가을에 채취한 수피가 가장 좋았다. 조추출물을 유가용매로 정제하여 최종적으혹 buthanol 분획올 얻었고, 이를 silica gel과 sephadex LH-20 및 HPLC분석을 통 하여 흰색결정의 항균물질 Compound I을 얻었다. 항균물질은 UV, IR, MS분석 결과 aglycone으로 ${\alpha}$-sitosterol에 rhamnose, galactose, glucose가 1:1:1로 결합된 물질로 추정되었다. Compound I의 미생물에 대한 MIC는 3종의 bacteria에 L 1.25 g/L, 2종의 fungi에 5.0 g/L로 나타났으며, 효모에 대한 MIC는 0.04 g/L로 매우 높게 나타났다. Compound I은 천연 보존제, 의약품 등으로의 향후 개발이 기대된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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