Park, Yu-Ri;Kim, Eun-Mi;Han, Do-Hyun;Kang, Dae-Young;Yeo, Sang-Geon;Park, Choi-Kyu
Korean Journal of Veterinary Service
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v.40
no.1
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pp.15-20
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2017
A two-tube reverse transcription loop-mediated isothermal amplification (RT-LAMP) assay was designed for the rapid visual detection of the M gene of all subtypes of avian influenza virus (AIV) and the H5 gene of the H5 subtype of highly pathogenic AIV (HPAIV). The reaction carried out in two tubes in a single step at $58^{\circ}C$ for 40 min, and the assay results could be visually detected by using hydroxynaphthol blue dye. Using M or H5 gene-specific primers, the assay successfully detected all subtypes or H5 subtypes of AIVs, including the Korean representative H5N1 and H5N8 HPAIVs. The detection limit of the assay was approximately $10^{2.0}$$EID_{50}/reaction$ for the M and H5 genes of H5N1 HPAIV, respectively, and was more sensitive than that of previously reported RT-LAMP and comparable to that of real-time RT-PCR. These results suggest that the present RT-LAMP assay, with its high specificity, sensitivity, and simplicity, will be a useful diagnostic tool for surveillance of currently circulating H5 HPAIVs and other subtypes of AIV in bird population, even in under-equipped laboratories.
For last about 10 years, the Republic of Korea experienced 3 times of outbreaks of highly pathogenic avian influenza (HPAI) from 10 December 2003 to 30 April 2004 (a total number of 19 outbreaks), 22 November 2006 to 6 March 2007 (a total number of 7 outbreaks), and 1 April 2008 to 12 May 2008 (a total number of 33 outbreaks). Among the totally 59 outbreaks, the infected premises included 35 chicken farms, 17 duck farms, 1 quail farm, and 6 farms rearing mixed species. Control measures were applied according to the HPAI standard operation procedure including depopulation of all infected and suspected flocks, movement restrictions, and disinfection of the infected farms within a 500-meter radius. Including movement restrictions, stringent control measures were additionally applied to two designated zones: the protection zone was an area within a 3-kilometer radius of the outbreak farm, and the surveillance zone was an area between a 3- to 10-kilometer radius of the outbreak farm. Farms with dangerous contacts and/or all of poultry within the protection zone was subjected to preemptive culling. Epidemiological investigations were also carried out including trace-back and trace-forward investigations to identify possible sources of spread and dangerous contact farms. Investigation teams conducted on-site examination of farm premises and facilities, interview with farm owner and staff, and review of records. Genetic and pathogenic characteristics of the virus isolates, and the results of the various surveillance activities were also analyzed. HPAI surveillance conducted in Korea includes passive surveillance of investigating notified cases, and active surveillance of testing high risk groups and areas. HPAI is a notifiable disease in Korea and all suspect cases must be reported to the veterinary authorities. Cases reported for other poultry diseases that require differential diagnosis are also tested for HPAI. Active surveillance includes annual testing of breeder duck farms, broiler duck farms and wild bird surveillance, which is concentrated during the autumn and winter. Surveillance activities conducted prior to the outbreaks have shown no evidence of HPAI infection in Korea.
To search for anit-H5N1 influenza virus agent, the anti-viral activity of methanol and aqueous extracts from thirty medicinal plants were examined in this study. The plant material (30 g) was extracted with methanol (300 mL) for 24 hr at room temperature. Methanol extracts were filtered and evaporated, then freeze-dried. Aqueous extracts were prepared with dried plant material (30 g) and hot distilled water (300 mL). After 3 hr, the aqueous extracts were filtered and evaporated, then lyophilized. Extracts prepared from different plants were tested the antiviral activity against influenza viruses [A/vietnam/1194/04 (H5N1)-NIBRG-14] using the hemagglutination (HA) assay. Among the test plants, Asarum sieboldii was found to be a potent inhibitor of H5N1 influenza virus in MDCK cell culture. Virus titers were 7 log, whereas with methanol extract of Asarum sieboldii for 48 hr titers were 3 log, indicating that methanol extract of Asarum sieboldii inhibited the H5N1 influenza viruses from the infected cells.
Highly pathogenic avian influenza virus (HPAIV) is already panzootic in poultry and caused a considerable economic loss in poultry industry. In addition, HPAIV continues to cross species barriers to infect humans and other mammals, often with fatal outcomes. In this study, the virucidal efficacy of Citra-$Kill^{(R)}$ composed to quaternary ammonium chloride and citric acid was investigated against avian influenza H9N2 virus (AIV). A virucidal efficacy was determined with the viability of AIV contacted with the disinfectant in the allantoic membrane of chicken embryos. Citra-$Kill^{(R)}$ and AIV was reacted on the distilled water (DW), hard water (HW) or organic matter suspension (OM) condition. On DW condition, AIV was inactivated with 2,000 fold dilutions of Citra-$Kill^{(R)}$. When the antiviral effect on HW condition was evaluated, the antiviral activity of the disinfectant showed on 1,500 fold dilutions against AIV. With the investigation of the antiviral effect of the disinfectant on OM condition, AIV was inactivated on 500 fold dilutions of Citra-$Kill^{(R)}$. As Citra-$Kill^{(R)}$ possesses virucidal efficacy against AIV, the disinfectant solution can be used to limit the spread of animal viral diseases.
Highly Pathogenic Avian Influenza (HPAI) is a very acute systemic disease in poultry, particularly in chickens and turkeys caused by HPAI viruses. An outbreak of HPAI caused by subtype H5N1, was first reported in a broiler breeder farm on December 10, 2003 in Korea, although there had been twenty one outbreaks of the disease reported in the world before. Since mid-December 2003, eight Asian countries have confirmed outbreaks of HPAI due to the same subtype. The outbreak has also resulted in at least twenty three fatal human cases in Vietnam and Thailand as of May 17, 2004 according to the WHO. Regarding the first outbreak of recent Asian HPAI, it has been suspected that some Asian countries with the exception of Korea and Japan veiled the fact of HPAI outbreaks since the last half of 2003, even though it was first reported in Korea. There have been total nineteen outbreaks of HPAI among chicken and duck farms in 10 provinces in Korea since Dec. 2003 and approximately 5,280,000 birds were slaughtered from 392 farms for eradication of the disease and preemptive culling. The origin of the H5Nl HPAI virus introduced into the country are unknown and still under epidemiological investigation. Current status of outbreaks and characteristics of HPAI will be reviewed and discussed on the basis of genetic, virological, clinicopathological, and ecological aspect, as well as future measures for surveillance and prevention of the disease in Korea.
Highly pathogenic avian influenza (HPAI) is among the top infectious disease priorities in Korea and the leading cause of economic loss in relevant poultry industry. An understanding of the spatial epidemiology of HPAI outbreak is essential in assessing and managing the risk of the infection. Though previous studies have reported the majority of outbreaks occurred clustered in what are preferred to as densely populated poultry regions, especially in southwest coast of Korea, little is known about the spatial distribution of risk areas vulnerable to HPAI occurrence based on geographic information system (GIS). The main aim of the present study was to develop a GIS-based risk index model for defining potential high-risk areas of HPAI outbreaks and to explore spatial distribution in relative risk index for each 252 Si-Gun-Gu (administrative unit) in Korea. The risk index was derived incorporating seven GIS database associated with risk factors of HPAI in a standardized five-score scale. Scale 1 and 5 for each database represent the lowest and the highest risk of HPAI respectively. Our model showed that Jeollabuk-do, Chungcheongnam-do, Jeollanam-do and Chungcheongbuk-do regions will have the highest relative risk from HPAI. Areas with risk index value over 4.0 were Naju, Jeongeup, Anseong, Cheonan, Kochang, Iksan, Kyeongju and Kimje, indicating that Korea is at risk of HPAI introduction. Management and control of HPAI becomes difficult once the virus are established in domestic poultry populations; therefore, early detection and development of nationwide monitoring system through targeted surveillance of high-risk spots are priorities for preventing the future outbreaks.
The study was conducted with funding from the government (Ministry of Agriculture, Food and Rural Affairs) in 2018 with support from the Agricultural, Food, and Rural Affairs Agency, 318069-03-HD040, and in based on artificial intelligence-based HPAI spread analysis and patterning. The model that is actively used in time series and text mining recently is LSTM (Long Short-Term Memory Models) model utilizing deep learning model structure. The LSTM model is a model that emerged to resolve the Long-Term Dependency Problem that occurs during the Backpropagation Through Time (BPTT) process of RNN. LSTM models have resolved the problem of forecasting very well using variable sequence data, and are still widely used.In this paper study, we used the data of the Call Detailed Record (CDR) provided by KT to identify the migration path of people who are expected to be closely related to the virus. Introduce the results of predicting the path of movement by learning the LSTM model using the path of the person concerned. The results of this study could be used to predict the route of HPAI propagation and to select routes or areas to focus on quarantine and to reduce HPAI spread.
The highly pathogenic avian influenza A (HPAI) viruses of the H5N1 subtype infect poultry and have also been spreading to humans. Although new antiviral drugs and vaccinations can be effective, rapid detection would be more efficient to control the outbreak of infections. In this study, a phage-display library was applied to select antibody fragments for HPAI strain A/Hubei/1/2010. As a result, three clones were selected and sequenced. A hemagglutinin inhibition assay of the three scFvs revealed that none exhibited hemagglutination inhibition activity towards the H5N1 virus, yet they showed a higher binding affinity for several HPAI H5N1 strains compared with other influenza viruses. An ELISA confirmed that the HA protein was the target of the scFvs, and the results of a protein structure simulation showed that all the selected scFvs bound to the HA2 subunit of the HA protein. In conclusion, the three selected scFVs could be useful for developing a specific detection tool for the surveillance of HPAI epidemic strains.
Foot-and-mouth disease (FMD) and avian influenza (AI) are highly pathogenic viral disease which affects the livestock industry worldwide. Outbreak of these viruses causes great impact in the livestock industry; thus, disease infected animals were immediately disposed. Burial is the commonly used disposal method for deceased animals. However, there is potential for secondary environmental contamination, as well as the risk that infectious agents persisting in the environment due to the limited environmental controls in livestock burial sites during the decomposition of the carcasses. Therefore, this study aimed to investigate the detection of FMD and AI viruses from animal carcass disposal sites using real-time reverse transcription PCR. Soil samples of more than three years post-burial from livestock carcass disposal sites were collected and processed RNA isolation using a commercial extraction kit. The isolated RNA of the samples was used for the detection of FMDV and AIV using qRT-PCR. Based on the qPCR assay result, no viral particle was detected in the soil samples collected from the animal disposal sites. This indicates that 3 years of burial and their carcass disposal method is efficient for the control or at least reduction of spread infections in the surrounding environment.
Jeong-Woong Park;Marc Ndimukaga;Jaerung So;Sujung Kim;Anh Duc Truong;Ha Thi Thanh Tran;Hoang Vu Dang;Ki-Duk Song
Journal of Animal Science and Technology
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v.65
no.1
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pp.183-196
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2023
Interferon-alpha inducible protein 6 (IFI6) is an interferon-stimulated gene (ISG), belonging to the FAM14 family of proteins and is localized in the mitochondrial membrane, where it plays a role in apoptosis. Transcriptional regulation of this gene is poorly understood in the context of inflammation by intracellular nucleic acid-sensing receptors and pathological conditions caused by viral infection. In this study, chicken IFI6 (chIFI6) was identified and studied for its molecular features and transcriptional regulation in chicken cells and tissues, i.e., lungs, spleens, and tracheas from highly pathogenic avian influenza virus (HPAIV)-infected chickens. The chIFI6-coding sequences contained 1638 nucleotides encoding 107 amino acids in three exons, whereas the duck IFI6-coding sequences contained 495 nucleotides encoding 107 amino acids. IFI6 proteins from chickens, ducks, and quail contain an IF6/IF27-like superfamily domain. Expression of chIFI6 was higher in HPAIV-infected White Leghorn chicken lungs, spleens, and tracheas than in mock-infected controls. TLR3 signals regulate the transcription of chIFI6 in chicken DF-1 cells via the NF-κB and JNK signaling pathways, indicating that multiple signaling pathways differentially contribute to the transcription of chIFI6. Further research is needed to unravel the molecular mechanisms underlying IFI6 transcription, as well as the involvement of chIFI6 in the pathogenesis of HPAIV in chickens.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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