The Transformation-Associated Recombination (TAR) cloning technique allows selective isolation of chromosomal regions and genes from complex genomes. The procedure requires knowledge of relatively small genomic sequences that reside adjacent to the chromosomal region of interest. This technique involves homologous recombination during yeast spheroplast transformation between genomic DNA and a TAR vector that has 5'and 3' gene targeting sequences. In this study, we examined the minimum size of specific hooks required for a single-copy gene isolation and compared the utility of different TAR vectors, radial and unique vectors, by cloning the same single-copy gene. The efficiency of TAR cloning of the hHPRT gene was same using hooks varying from 750 to 63 bp. The number of transformants decreased approximately 20-fold when the TAR vector contained two unique hooks versus using a radial vector, but the percentage of positive recombinants increased over 2-fold when a unique TAR vector was used. Therefore, we suggest that the two-unique TAR vector is suitable for general TAR cloning given its high selectivity, and the radial TAR vector is more suitable when genomic DNA is in limited quantity, for example, DNA isolated from pathological specimens. Moreover, we confirm the minimal length of a unique sequence in a TAR vector is approximately 60 bp for a single-copy gene isolation.
$Fe_4[Fe(CN)_6]_3$ coated on a mica or $TiO_2$/mica surface as infrared reflective blue pigment was prepared by a hydrothermal method. $Fe_4[Fe(CN)_6]_3$, used as coloring agent, was uniformly coated on mica or $TiO_2$/mica under the optimized condition of a 1.2 : 1 weight ratio between iron(III) chloride hexahydrate and potassium ferrocyanidetrihydrate at the initial pH level of 4.5 at $70^{\circ}C$. The infrared (IR)-reflective pigments were characterized by SEM, Zeta-potenial, FT-IR, and UV-VIS NIR spectrophotometry. Especially the CIE color coordinate and total solar reflectance(TSR) properties of the pigments were investigated in relation to variation of the coating and coated substrate thicknesses. Isolation-heat paint was prepared with 20 wt% blue pigments fully dispersed in acryl-urethane resin and several additives to coat the film uniformly. The films were also measured with CIE color coordinate, TSR, and the surface temperature was recorded by an isolation-heat measuring system. The pigments and films of $Fe_4[Fe(CN)_6]_3$ coated on mica and $TiO_2$/mica showed high TSR values compared with the TSR value of $Fe_4[Fe(CN)_6]_3$ itself. According to the increase of TSR value, the property of isolation-heat is effective. To realize the optimal blue color, we applied the the pigment to $TiO_2$ coated mica(TM(b)) which has blueish interference color. The pigment of $Fe_4[Fe(CN)_6]_3$ coated on TM(b) shows a strong blue color compared with that of $Fe_4[Fe(CN)_6]_3$ coated on $TiO_2$/Mmca(TM(w)), which has a whitish interference color.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.22
no.4
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pp.25-36
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2021
This study analyzed the causes of flood accidents, such as isolation and lost footing accidents in Dorimcheon, to provide legal and institutional improvements. For cause analysis, Field Investigation, Stakeholder Interview, Report, manual, Law et al. Review, Analysis of water level change characteristics, automatic alarm issuance standard level analysis, and evacuation time according to river control were evaluated. Dorimcheon has the characteristics of a typical urban river, which is disadvantageous in terms of water control. In addition, the risk of flood accidents is high because the section where fatal accidents occur forms sharply curved channels. Tripping and isolation accidents occur in the floodplain watch and evacuation stage, which is the stage before the flood watch and warning is issued. Because floodplain evacuation is issued only when the water level rises to the floodplain, an immediate response according to the rainfall forecast is essential. Furthermore, considering that the rate of water level rise is up to 2.62 cm/min in Sillimgyo 3 and Gwanakdorimgyo, sufficient evacuation time is not secured after the floodplain watch is issued. Considering that fatal accidents occurred 0.46 m below the standard water level for the flood watch, complete control is very important, such as blocking the entry of rivers to prevent accidents. Based on these results, four improvement measures were suggested, and it is expected to contribute to the prevention of Tripping and Isolation Accidents occurring in rivers.
Transactions of the Korean Society for Noise and Vibration Engineering
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v.13
no.5
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pp.375-383
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2003
For a performance analysis of vibration isolation systems, the concept of vibration power flow can be employed preferably when noise radiated from the supporting structure with finite impedances is of interest. The idea is basically simple to understand and formulas for precise estimation of the vibration power are easy to derive. However, It is often required to simplify the process of experimentation under several assumptions due to instrumental limitations. For an example, rotational degree of freedom has not been well treated in bending vibrations of beam or plate-like structures. Yet, several recent studies showed that the moments and rotations play an important role in power transmission and should be taken into consideration carefully as the frequency range of interest goes to audibly high. Therefore, it is readily agreed that reduction of the noise radiation over the high frequency range can be effectively accomplished by adjusting the rotational stiffness of the isolator without changing the vibration isolator efficiency in low frequency range relevant to the translational stiffness of the isolator In this paper, the vibration power flow approach is applied to an AC motor installed on a finite plate in order to illustrate the contribution of the rotational vibration power to the total vibration power transmission. The effects of rotational stiffness of the isolator on the vibration power transmission are investigated by inserting various shapes of Isolators with different rotational stiffness but with $ame translational stiffness between the motor and the plate. The resultant noise radiation from the plate is presented to verify the proposed approach.
Anthocyanins are water soluble plant pigments which are responsible for the blue, red, pink, violet colors in several plant organs such as flowers, fruits, leaves and roots. In recent years, anthocyanin-rich foods have been favored as dietary supplements and health care products due to diverse biological activities of anthocyanins including antioxidant, anti-allergic, anti-diabetic, anti-microbial, anti-cancer and preventing cardiovascular disease. High-performance countercurrent chromatography (HPCCC) coupled with reversed-phase medium pressure liquid chromatography (RP MPLC) method was applied for the rapid and efficient isolation of cyanidin 3-glucoside (C3G) and peonidin 3-glucoside (P3G) from black rice (Oryza sativa L., Poaceae). The crude black rice extract (500 mg) was subjected to HPCCC using two-phase solvent system composed of tert-butyl methyl ether/n-butanol/ acetonitrile/0.01% trifluoroacetic acid (TBME/B/A/0.01% TFA, 1 : 3 : 1 : 5, v/v, flow rate - 4.5 mL/min, reversed phase mode) to give enriched anthocyanin extract (37.4 mg), and enriched anthocyanin extract was sequentially chromatographed on RP-MPLC to yield C3G (16.5 mg) and P3G (8.7 mg). The recovery rate and purity of isolated C3G were 76.0% and 98.2%, respectively, and those of P3G were 58.3% and 96.3%, respectively. The present study indicates that HPCCC coupled with RP-MPLC method is more rapid and efficient than multi-step conventional column chromatography for the separation of anthocyanins.
Several methods were examined for purification of docosahexaenoic acid (DHA, 22:6n-3) from skipjack Euthynnus pelamis orbital tissue oil, a marine by-product, and a modified method for isolation of a high purity DHA was proposed. Skipjack orbital tissue contained $55.4\%$ of total lipid(TL), and DHA accounted for $23.7\%$ of the TL. Application of low-temperature crystallization and urea inclusion compound methods to the orbital fatty acid mixture resulted in increases of DHA concentrations to approximately $46\%\;and\;61\%$, respectively. These methods were suitable for large production of DHA with relative low purity because of the simple purification procedure. DHA of approximately $74\%$ in purity was obtained by silver nitrate aqueous solution method, but the method gave a very low recovery($<10\%$). Silver nitrate-impregnated silica column chromatography was suitable for purification of a high purity DHA(purity, $>98\%$ and recovery, $>90\%$) A modified method, silver nitrate-impregnated silica column chromatography combined with low-temperature crystallization(two step purication method) was proposed as the most effective method to obtain DHA with high purity($99.9\%$) from the skipjack orbital oil.
Park, Da-Min;Jeon, Sang Kwon;Yang, Jin Yong;Choi, Sung Dae;Kim, Geon Joong
Bulletin of the Korean Chemical Society
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v.35
no.6
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pp.1720-1726
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2014
(S)-Alanine Racemase Chiral Analogue ((S)-ARCA) was used as an efficient adsorbent for the selective separation of D-amino acids (D-AAs), which are industrially important as chiral building blocks for the synthesis of pharmaceutical intermediates. The organic phase, containing (S)-ARCA adsorbent and phase transfer reagents, such as ionic liquid type molecules (Tetraphenylphosphonium chloride (TPPC), Octyltriphenylphosponium bromide (OTPPBr)), were coated on the surfaces of mesoporous carbon supports. For the immobilization of chiral adsorbents, meso/macroporous monolithic carbon (MMC), having bimodal pore structures with high surface areas and pore volumes, were fabricated. The separation of chiral AAs by adsorption onto the heterogeneous (S)-ARCA was performed using a continuous flow type packed bed reactor system. The effects of loading amount of ARCA on the support, the molar ratio of AA to ARCA, flow rates, and the type of phase transfer reagent (PTR) on the isolation yields and the optical purity of product D-AAs were investigated. D-AAs were selectively combined to (S)-ARCA through imine formation reaction in an aqueous basic solution of racemic D/L-AA. The (S)-ARCA coated MMC support showed a high selectivity, up to 95 ee%, for the separation of D-type phenylalanine, serine and tryptophan from racemic mixtures. The ionic liquids TPPC and OTPPBr exhibited superior properties to those of the ionic surfactant Cetyltrimethyl ammonium bromide (CTAB), as a PTR, showing constant optical purities of 95 ee%, with high isolation yields for five repeated reuses. The unique separation properties in this heterogeneous adsorption system should provide for an expansion of the applications of porous materials for commercial processes.
The Journal of the Institute of Internet, Broadcasting and Communication
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v.17
no.6
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pp.83-88
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2017
In this paper, a 3-port waveguide circulator of Ka-band millimeter-wave for isolation between transmit channel and receive channel at high power transmit mode is designed and fabricated for the seeker of the guided missile and circulator performance is verified through the S-parameter, high power and operation temperature test. At the configuration design, interface design between a seeker antenna and the circulator is considered and half-height of standard waveguide is applied for minimum and light weight body. The shape of permanent magnet and ferrite is optimized by simulation and tuning dielectrics at each port are placed for the best performance. In Fc(center frequency)${\pm}1000MHz$, designed waveguide circulator has below -20 dB return loss, below 0.5 dB insertion loss and below -23 dB isolation. It is found that circulator characteristics is similar to design results.
Transactions of the Korean Society of Mechanical Engineers B
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v.35
no.12
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pp.1309-1316
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2011
This paper presents a high-speed RNA microextractor for the direct isolation of RNA from blood lysate using magnetic oligo(dT) beads. The extraction is performed through lateral magnetophoresis, which is induced by a ferromagnetic wire array inlaid. With this RNA microextractor, more than 80% of the magnetic beads could be separated at a flow rate up to 20 ml/h, and the overall extraction procedure was completed within 1 min. The absorbance ratio of RNA to protein(A260/A280) was greater than 1.7, indicating that the extraction technique yields pure RNA. The feasibility of using this technique in reverse transcription polymerase chain reaction procedures was investigated by cDNA synthesis and PCR processes. The results confirmed that the RNA microextractor is a practical device for easy, fast, and high-precision RT-PCR using minimal amounts of reagent.
The Journal of Korean Institute of Electromagnetic Engineering and Science
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v.27
no.1
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pp.1-7
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2016
In this paper, the tunable filter based on high power cavity using mechanical switch for 1.5 GHz band is presented. The LPF is inserted to eliminate the spurious wave, coupler is embeded to extract the output power, and then the tunable filter system is configured using mechanical switch. The LPF obtains attenuation over 40 dB between 4 GHz and 12.75 GHz, Coupler is satisfied with coupling value 40 dB and coupling isolation over 55 dB. The tunable filter system using mechanical switch obtains insertion loss 0.88 dB at bypass mode between 1,495.9 MHz and 1,510. 9 MHz, 3.29 dB at fil mode between 1,495.9 MHz and 1,500.9 MHz. It is also satisfied with output power of 132 W at the center frequency 1,498.4 MHz, and switching time below 10 ms.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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