면역크로마토그래피 진단방법을 이용하는 B형간염 스크리닝 kit를 개발하기 위하여 두가지의 항체를 이용하였다. 표식자항체로 사용된 것은 단세포군항체 anti-HBs이고 포획항체는 goat anti-HBs 인데 포획항체는 니트로셀룰로즈 막에 고정되고 표식자항체는 금 입자에 결합된다. 혈청 검체를 well에 가하면 유리섬유 표면에 건조상태로 침착되어 있던 conjugate가 활성화되어 검체중의 HBsAg와 결합한다. 검체를 가한 지 5분 후 검사결과가 나타나는데 HBsAg와 conjugate가 결합된 복합체가 니트로셀롤로즈 막의 하단부에 붉은 색 선으로 나타난다. 본 kit의 검출한계는 표준 HBs-Ag 용액을 사용하여 시험하였을 때 2 ng/ml이었다.
Purpose: To evaluate the effect of gluten-free diet (GFD) on hepatitis B surface antibody (HBsAb) concentrations among previously immunized pediatric celiac disease (CD) subjects. Methods: We retrospectively evaluated pediatric CD subjects in serological remission who were previously immunized for hepatitis B virus as infants. The temporal relationship between HBsAb concentration, the amount of time on a GFD, and age were evaluated. Results: Overall, 373 CD subjects were analyzed: 156 with HBsAb sampled prior to GFD initiation and 217 after initiation of a GFD and in serological remission. Median age at HBsAb concentration measurement for those before and after GFD initiation was 5.3 years (interquartile range [IQR], 3.1-9.2 years) and 7.6 years (IQR, 5.4-10.9 years), respectively (p<0.001). There was no sex difference between the groups. The median time of HBsAb measurement was 2 months (IQR, 0-5.7 months) before and 12.8 months (IQR, 5.3-30.3 months) after initiation of GFD. The HBsAb concentration was low in 79 (50.6%) and 121 (55.7%) subjects before and after GFD initiation, respectively (p=0.350). Age was inversely associated with low HBsAb concentrations. Neither being on a GFD nor sex was associated with low HBsAb concentrations. Conclusion: Adherence to a GFD does not affect HBsAb concentration in children with CD. Age is inversely associated with HBsAb concentration.
B형 간염 표면항원(HBsAg)의 4가지 주요 아형 조사를 통해 HBsAg과 B형 간염표면항체가 모두 양성인 환자에서 항원과 항체의 아형이 다름을 밝힘으로 항원-항체 공존을 이해하게 되었으며, 감염경로를 추적하는 역학적 조사, 인구이동양상의 지표에 유용하게 사용될 수 있다. 현재까지 우리나라의 HBV 아형에 관한 연구는 전체적인 빈도의 조사나 HBsAg과 anti-HBs가 공존하는 경우에서 아형이 가지는 의미에 대한 것이 전부였다. 본 연구에서는 영남대학교 의과대학 부속병원에서 만성 간질환으로 진단받고 경과추적중인 HBsAg 양성인 환자 214명을 대상으로 혈청에 존재하는 HBsAg 아형을 단세포군 항체를 이용한 혈청학적 방법으로 조사하였다. 214명의 검체중 206명(93.9%)에서 adr, 6명(2.8%)에서 adw, 2명(0.9%)에서 ayr, 2명(0.9%)에서 ar, 3명(1.4%)에서 adwr로 나타났으며 ayw는 한 례에서도 발견되지 않았다. 아형과 질환의 중증도 사이에는 유의한 연관성은 발견되지 않았다. 결론적으로 만성 간질환 환자에서 adr이 가장 많고 질환의 중증도와 아형간에 유의한 연관성은 발견되지 않았지만, 아형이 만성 B형 바이러스 간염의 간경변증이나 간세포암으로의 진행과 예후에 영향을 미치는지 밝히기 위해서는 좀 더 연구를 진행하여야 할 것이다.
목 적 : B형 간염 백신은 접종 후 시간이 경과하면서 항체가는 감소하나, 면역학적 기억은 약 10년 이상 유지되며, 항체가가 감소하더라도 임상적으로 의미있는 감염에 대한 예방효과가 있어 현재 정상 면역 기능을 가진 경우 3회 접종 후 예방 가능한 항체가 형성된 경우는 추가접종을 권장하고 있지 않다. 저자들은 최근 우리나라 중부지역 소아의 B형 간염 항체 보유율과 B형 간염 백신의 면역학적 기억에 대해 연구하고자 하였다. 방 법 : 2003년 3월부터 2005년 5월까지 단국대학교병원(병동, 외래)에서 간염 항원, 항체 검사(RIA, 혹은 EIA)를 받은 소아(6개월-18세)를 대상으로 하였고, 측정한 B형 간염 항체가가 10 IU/mL 이상인 경우를 양성으로 하였다. B형 간염 항체가가 음성인 소아 중 B형 간염 백신을 1회($Euvax^{(R)}$ 혹은 $Hepavaxgene^{(R)}$) 추가 접종한 후 1개월 후에 측정한 항체가가 10 mIU/mL 이상의 양전을 보인 경우를 면역기억반응이 있다고 정의하였다. HBsAg, anti-HBs를 검사받은 대상 중에서 $-20^{\circ}C$에 보관된 169명의 혈청에서 EIA로 IgG anti-HBc를 측정하였다. 결 과 : 총 3,448명이 RIA 또는 EIA로 HBsAg/anti-HBs 검사를 받았으며 그 중 3,277명(남아 1,923명, 여아 1,354명)을 연구 대상으로 하였다. 미숙아, 면역기능 저하자, 검사 전 수혈을 받았거나 면역글로불린을 투여 받은 소아를 제외한 3,277명 중에서 1,913명(58.4%)이 anti-HBs가 양성이었고, 그 중에서 남아는 1,115명(58.3%)이었다. HBsAg 양성은 29명(0.9%)였다. 나이에 따른 anti-HBs 양성률은 6-12개월까지는 78.6%(88/112명), 1-3세는 62.7%(455/726명), 4-6세는 51.9%(407/784명), 7-12세는 49.5%(441/890명), 13-15세는 63.4%(220/347명) 그리고 16-18세까지는 72.2%(302/418명)였다. 과거에 기본접종을 받았으나 HBsAg/anti-HBs 모두 음성을 보여 추가 접종을 받은 소아는 80명이었고, 1개월 뒤 측정한 간염 항체 검사 결과 양성률은 88.8%(71/80명), 무반응자는 9명이었다. IgG anti-HBc를 검사한 169명 중에서 5명(3.0%)이 양성을 보였고, 5명 모두 HBsAg이 음성이었다. 5명 중 anti-HBs가 음성인 소아가 4명으로 모두 1회 접종 후 항체 양전을 보였다. 결 론 : 우리나라 중부지역 소아의 B형 간염 항체 양성률이 나이가 들면서 감소를 보이고 있으나 1회 접종으로 10 IU/mL 이상으로 항체가 증가를 보여 이는 B형 간염 백신의 장기간의 면역학적 기억을 보여 주는 것으로 생각된다.
Plasmid DNA vaccines encoding the hepatitis B virus (HBV) surface and hepatitis C virus (HCV) envelope antigens, respectively, were constructed, and attempt were made to find the possibility of a divalent vaccine against HBV and HCV. The expression of each plasmid in Cos-1 cells was confirmed using immunocytochemistry. To measure the induced immune response by these plasmids in vivo, female BALB/c mice were immunized intramuscularly with $100\;{\mu}g$ of either both or just one of the plasmids. Anti-HBV and HCV-specific antibodies and related cytokines were evaluated to investigate the generation of both humoral and cellular immune responses. As a result, specific anti-HBV and anti-HCV serum antibodies from mice immunized with these plasmids were observed using immunoblot. The levels of IL-2 and RANTES showing a $Th_{1}$ immune response were significantly increased, but there was no change in the level of IL-4 ($Th_{1}$ immune response) in any of the immunized groups. Compared with each plasmid DNA vaccine, the combined vaccine elicited similar immune responses in both humoral and cell-mediated immunities. These results suggest that the combined DNA vaccine can induce not only comparable immunity experimentally without antigenic interference, but also humoral and $Th_{1}$ dominant cellular immune responses. Therefore, they could serve as candidates for a simultaneous bivalent vaccine against HBV and HCV infections.
목 적: 최근 HBsAb 및 HBcAb 양성인 공여자의 간이 식편을 이식 받은 수혜자에서 신생 B형 간염이 발생하는 것이 보고 되고 있으며, 저자들도 약 40%에서 신생B형 간염이 발생하는 것을 보고하였다. 한국인에서의 HBcAb 양성률은 50%가 넘는 것으로 보고하고 있는데, 이는 임상 간이식의 걸림돌이 될 수 있으며 저자들은 이를 예방하기 위한 일환으로써 본 연구를 시행하였다. 방 법: 1997년 11월부터 1998년 11월까지 12개월 동안 서울 아산병원에서 생체 간이식 공여자가 과거 B형간염과 C형 간염 감염의 증거가 없으면서 HBsAg 음성이면서 HBsAb 양성, HBcAb 양성인 성인 공여자 6명을 대상으로 하였다. 간이식 수술 시 동결 생검을 위하여 채취한 절편의 일부를 보관하여 실험에 사용하였다. 동결 절편 조직에서 DNA를 분리하여, HBV DNA의 표면 구역과 핵심 구역에 대한 시발체를 이용하여 이중 중합효소 연쇄 반응을 시행하여 검사를 시행하였다. 결 과: 공여자 6명의 조직에서 표면 구역이 모두 양성으로 관찰되었으며, 핵심 구역은 4명에서 양성으로 관찰되었다. 그 중 4명의 간을 이식받은 소아 수혜자는 모두 예방법을 시행하면서, 신생 B형 간염의 발생은 관찰되지 않고 있다. 결 론: 본 결과는 간이식 후 발생하는 신생 B형 간염의 원인으로 HBcAb 양성이 위험 인자임을 지지하고 있다. HBcAb 양성 공여자의 간이식편에서 핵심구역은 66%에서 양성으로 보여 이식 후 잠재 HBV 감염 혹은 신생 B형 간염의 발생을 막기 위해 예방적 치료가 필요할 것으로 사료된다.
B형 간염은 B형 간염 바이러스(Hepatitis B virus ; HBV)에 의해 일어나는 감염으로 B형 간염 검사는 현재 여러 가지 검사 방법과 여러 종류의 Kit, 장비로 시행되고 있는데, 이에 따라 검사 결과간의 차이가 있을 수 있다. 이러한 차이를 관리하기 위해서는 특정 표준물질을 이용하여 검사시약, 검사 시스템의 성능을 평가하는 과정이 필요하다. 본 연구는 B형 간염 검사 국가 표준물질을 이용하여 여러 다른 검사법 시약과 비교 실험을 통해 본원 핵의학과에서 사용하고 있는 RIA법 시약이 동일한 결과로 정확하게 수행되고 있는지를 알아보는데 있다. 실험에 사용된 B형 간염 검사에 대한 식품의약품안전평가원의 생물의약품 국가 표준물질은 총 5가지로 항원물질 4가지와 항체물질 1가지로 구성 되어 있다. "B형 간염 바이러스표면 항원(혼합농도패널)", "B형 간염 바이러스 표면 항원(저농도 패널)", "B형 간염 바이러스 표면 항원 86.76 IU/vial", "B형 간염 사람 면역글로불린 95.45 IU/vial", "B형 간염 바이러스 표면 항원 표준물질 0.02~11.52 IU/mL"이며, 이를 본원에서 사용하고 있는 A사, B사 두 종류의 시약으로 각각 검사 방법에 따라 실험하였다. 보다 정확한 결과를 산출하기 위해 위의 모든 실험은 반복 측정하였다. "B형 간염 바이러스 표면 항원 (혼합농도패널)"은 S/CO단위를 기준으로 RIA법을 EIA 3가지 시약, CIA 2가지 시약과 비교한 일치율이 A사는 94.4%(17/18), 83.3%(15/18), B사는 88.9%(16/18), 77.8%(14/18)였다. "B형 간염 바이러스 표면 항원 (저농도 패널)" 의 결과 EIA 2가지 시약은 7개, CIA 3가지 시약은 11개가 양성 결과를 보였고 RIA법 A사는 3개, B사는 2개가 양성 결과를 보였다. 희석검사를 시행한 "B형 간염 바이러스 표면 항원 86.76 IU/vial"에서는 A사 시약은 600배(0.14 IU/mL), B사 시약은 300배(0.29 IU/mL)까지 양성 결과를 나타냈다. "B형 간염 사람 면역글로불린 95.45 IU/vial"의 경우에서는 A사 Kit는 10,000배(9.5 mIU/mL), B사 Kit는 4,000배(24 mIU/mL)까지 양성 결과를 보였다. "B형 간염 바이러스 표면 항원 표준물질 0.02~11.52 IU/mL"에 대한 실험 결과A사 시약은 0.38 IU/mL, B사 시약은 2.23 IU/mL 농도까지 검출하여 그 이상의 농도에서 양성 결과를 나타냈다. B형 간염 검사에 대해 국가 표준물질을 통해 비교해 보았을 때 여러가지 검사법 시약과 RIA 법 시약의 결과값 경향이 동일한 성향으로 나타나고 있으며, B형 간염 항원, 항체에 대한 역가 시험의 부분에 있어서도 항원은 최대 600배(0.14 IU/mL), 항체는 최대 10,000배(9.5 mIU/mL)까지 양성 결과를 얻을 수 있었다. 따라서 본원 핵의학과에서 시행 하고 있는 RIA 방법을 통한 B형 간염 검사의 검사시약과 검사시스템은 원활한 성능으로 정확한 결과보고가 수행되고 있다고 판단된다. 하지만 저농도 패널에서 다른 검사법 시약과의 낮은 일치율은 위양성과 민감도의 측면에서 해결되어야 할 숙제로 보이며, 또한 동일한 RIA 방법 일지라도 Kit간 민감도와 특이도의 격차는 계속해서 연구되고 개발 되어야 할 것으로 사료된다.
To assess the contribution of tumor necrosis factor $(TNF){\beta}$ +252 polymorphisms to risk and prognosis of hepatocellular carcinoma (HCC), we enrolled 150 pairs of sex- and age-matched patients with HCC, patients with cirrhosis alone, and unrelated healthy controls. $TNF{\beta}$ +252 genotypes were determined by polymerase chain reaction with restriction fragment length polymorphism. Multivariate analysis indicated that $TNF{\beta}$ G/G genotype [odds ratio (OR), 3.64; 95%CI, 1.49-8.91], hepatitis B surface antigen (OR, 16.38; 95%CI, 8.30-32.33), and antibodies to hepatitis C virus (HCV) (OR, 39.11; 95%CI, 14.83-103.14) were independent risk factors for HCC. There was an additive interaction between $TNF{\beta}$ G/G genotype and chronic hepatitis B virus (HBV)/HCV infection (synergy index=1.15). Multivariate analysis indicated that factors associated with $TNF{\beta}$ G/G genotype included cirrhosis with Child-Pugh C (OR, 4.06; 95%CI, 1.34-12.29), thrombocytopenia (OR, 6.55; 95%CI, 1.46-29.43), and higher serum ${\alpha}$-fetoprotein concentration (OR, 2.53; 95%CI, 1.14-5.62). Patients with $TNF{\beta}$ G/G genotype had poor cumulative survival (p=0.005). Cox proportional hazard model indicated that $TNF{\beta}$ G/G genotype was a biomarker for poor HCC survival (hazard ratio, 1.70; 95%CI, 1.07-2.69). In conclusion, there are independent and additive effects between $TNF{\beta}$ G/G genotype and chronic HBV/HCV infection on risk for HCC. It is a biomarker for poor HCC survival. Carriage of this genotype correlates with disease severity and advanced hepatic fibrosis, which may contribute to a higher risk and poor survival of HCC. Chronic HBV/HCV infected subjects with this genotype should receive more intensive surveillance for early detection of HCC.
Al-Kubaisy, Waqar Abd Al Qahar;Obaid, Kadhim Jawad;Noor, Nor Aini Mohd;Ibrahim, Nik Shamsidah Binti Nik;Al-Azawi, Ahmed Albu-Kareem
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제15권18호
/
pp.7725-7730
/
2014
Hepatocellular carcinoma (HCC) is the third most common cause for cancer death in the world, now being especially linked to chronic hepatitis C virus (HCV) infection. This case-control study consisting of 65 HCC patients and 82 patients with other malignant tumours as controls was conducted to determine the association of HCV markers with HCC. Serum of each participant was obtained for detection of HCV Ab and RNA by DNA enzyme immunoassay (DEIA). Twenty six per cent (26.0%) of HCC patients had positive anti-HCV which was significantly greater than the control group (p=0.001). HCC patients significantly have a risk of exposure to HCV infection almost 3 times than the control group (OR=2.87, 95% C.I=1.1-7). Anti-HCV seropositive rate was significantly (p=0.03) higher among old age HCC patients and increases with age. Males with HCC significantly showed to have more than 9 times risk of exposure to HCV infection (OR=9.375, 95 % CI=1.299-67.647) than females. HCV-RNA seropositive rate was (70.8%) significantly higher among HCC patients compared to (22.2%) the control group (p=0.019). The most prevalent genotype (as a single or mixed pattern of infection) was HCV-1b. This study detected a significantly higher HCV seropositive rate of antibodies and RNA in HCC patients.
본 연구에서는 높은 민감성을 가진 측방유동면역분석(lateral flow immunoassay) 스트립 센서를 제작하기 위하여 mercaptoundecanoic acid (MUA)와 L-lysine 단분자를 사용하여 금나노입자 표면을 개질할 수 있는 합성법을 개발하였다. 균일한 사이즈의 금나노입자를 합성하기 위하여 Turkevich-Frens 합성법을 이용하였으며 $16.7{\pm}2.1nm$ 크기의 금나노 입자를 제조하였다. 기능화된 금나노입자의 특성을 확인하기 위하여 투과전자현미경(TEM), 자외선-가시광선 분광광도계(UV-vis spectroscopy), X선 광전자분광기(XPS), 푸리에 변환 적외선 분광기(FT-IR)를 사용하여 분석하였다. 금나노입자와 항체 간의 안정적인 접합(conjugation)을 위한 pH 및 항체의 농도 조건은 pH 7.07, 항원의 농도 $10{\mu}g/mL$로 최적화되었다. B형간염 표면항원을 검출하기 위하여 측방유동면역분석 스트립 센서를 제작하였으며, 표면개질된 금나노입자로 제작된 면역스트립 센서에서 10 ng/mL로 낮은 검출한계를 나타내었으며, 이는 기능화되지 않은 금나노입자 기반 면역스트립센서의 100 ng/mL보다 높았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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