Objectives: The number of cases of hepatitis A virus (HAV) infections has sharply increased in Korea, especially among young adults. In this study, an HAV outbreak in a facility for disabled people was investigated, and we found epidemiological differences both between 2 different generations and between generally abled and disabled groups. Methods: We analyzed the incubation period and attack rate of an HAV outbreak and investigated the prevalence of HAV antibodies among the staff and residents of a facility for the disabled. We performed a retrospective cohort study during the HAV outbreak, which lasted from February 8 to 25, 2019, including examinations of HAV antibody tests and post-exposure HAV vaccination for the staff or residents of the facility. Results: There were 9 confirmed cases in 2 staff members and 7 residents. Among 53 people (30 staff and 23 residents), except for the 9 confirmed cases and 1 staff member with a known history of HAV infection, HAV seroprevalence was seen in 16.7% of the staff under 40 years of age and 95.2% of those over 40 years of age, while the corresponding rates in the residents were 0.0% and 58.8%, respectively. Conclusions: This result implies that it is necessary to prioritize HAV vaccination for vulnerable groups and workers of residential care facilities.
To elucidate structure of group "a" epitope, mouse antibodies that express idiotype monoclonal antibody and anti-idiotype monoclonal antibody against the group specific "a" determinant were purified by hydroxyapatite column. To obtain hepatitis B surface antigens (HBsAg). HBsAg positive blood was sequencially purified by ammonium sulfate precipitation, hydroxyapatite, sepharose 4B column chromatography and ultracentrifugation. The major protein (p25) and glycoprotein (gp30) of HBsAg were isolated by concanavalin-A-sepharose 4B. The ability of p25-gp30 among the HBsAg to inhibit the idiotype-anti-idiotype reaction was dependent on conformation, since reduced and alkylated p25-gp30 virtualy lost their inhibitory capacity when compared to native HBsAg. The data suggest that hepatitis B antigen is a conformational antigen critically dependent upon the disulfide bonds of p25-gp30.
Background: The seropositivity rate of hepatitis B surface antigen (anti-HBs) antibodies is known to be ≥95% after hepatitis B virus vaccination during infancy. However, a low level or absence of anti-HBs in healthy children is discovered in many cases. Recent studies in adults reported that a reduced anti-HBs production rate is related to obesity. Purpose: To investigate whether body mass index (BMI) affects anti-HBs levels in healthy children following 3 serial dose vaccinations in infancy. Methods: We recruited 1,200 healthy volunteers aged 3, 5, 7, or 10 years from 4-day care centers and 4 elementary schools. All subjects completed a questionnaire including body weight, height, and vaccine type received. Levels of serum hepatitis B surface antigen (HBsAg) and anti-HBs in all subjects were analyzed using electrochemiluminescence immunoassay. The standardized scores (z score) for each sex and age were obtained using the lambda-mu-sigma method in the 2017 Korean National Growth Charts for children and adolescents. Results: Our subjects (n=1,200) comprised 750 males (62.5%) and 450 females (37.5%). The overall anti-HBs seropositivity rate was 57.9% (695 of 1,200). We identified significant differences in mean BMI values between seronegative and seropositive groups (17.45 vs. 16.62, respectively; P<0.001). The anti-HBs titer was significantly decreased as the BMI z score increased adjusting for age and sex (B=-15.725; standard error=5.494; P=0.004). The probability of anti-HBs seropositivity based on BMI z score was decreased to an OR of 0.820 after the control for confounding variables (95% confidence interval, 0.728-0.923; P=0.001). Conclusion: There was a significant association between anti-HBs titer and BMI z score after adjustment for age and sex. Our results indicate that BMI is a potential factor affecting anti-HBs titer in healthy children.
Background: To develop a novel treatment strategy for hepatitis B virus infection, a major cause of liver chirosis and cancer, we aimed to make human monoclonal antibodies inhibiting RNase H activity of P protein playing in important role in HBV replication. In this regard, phage display technology was employed and demonstrated as an efficient cloning method for human monoclonal antibody. So this study analysed the usability of human monoclonal antibody as protein based gene therapy. Methods: RNase H of HBV was expressed as fusion protein with maltose binding protein and purified with amylose resin column. Single chain Fv (scFv) phage antibody library was constructed by PCR cloning using total RNAs of PBMC from 50 healthy volunteers. Binders to RNase H were selected with BIAcore 2000 from the constructed library, and purified as soluble antibody fragment. The affinity and sequences of selected antibody fragments were analyzed with BIAcore and ABI automatic sequencer, respectively. And finally RNase H activity inhibiting assay was carried out. Results: Recombinant RNase H expressed in E. coli exhibited an proper enzyme activity. Naive library of $4.46{\times}10^9cfu$ was screened by BIAcore 2000. Two clones, RN41 and RN56, showed affinity of $4.5{\times}10^{-7}M$ and $1.9{\times}10^{-7}M$, respectively. But RNase H inhibiting activity of RN41 was higher than that of RN56. Conclusion: We cloned human monoclonal antibodies inhibiting RNase H activity of P protein of HBV. These antibodies can be expected to be a good candidate for protein-based antiviral therapy by preventing a replication of HBV if they can be expressed intracellularly in HBV-infected hepatocytes.
In a previous study we generated an anti-Hepatitis B Virus (HBV) preS1 humanized antibody (HzKR127) that showed in vivo HBV-neutralizing activity in chimpanzees. However, the antigen-binding affinity of the humanized antibody may not be sufficient for clinical use and thus affinity maturation is required for better therapeutic efficacy. In this study, phage display technique was employed to increase the affinity of HzKR127. All six amino acid residues (Glu95-Tyr96-Asp97-Glu98-Ala99-Tyr100) in the heavy (H) chain complementary-determining region 3 (HCDR3) of HzKR127 were randomized and phage-displayed single chain Fv (scFv) library was constructed. After three rounds of panning, 12 different clones exhibiting higher antigen-binding activity than the wild type ScFv were selected and their antigen-binding specificity for the preS1 confirmed. Subsequently, five ScFv clones were converted to whole IgG and subjected to affinity determination. The results showed that two clones (B3 and A19) exhibited an approximately 6 fold higher affinities than that of HzKR127. The affinity-matured humanized antibodies may be useful in anti-HBV immunotherapy.
We obtained the total protein antibodies of Saccharomyces cerevisiae KCTC 1720 and Escherichia coli K-12 from the rabbit and the guinea pig to determine the host-derived proteins which may be remained in biotechnological products. The protein concentration of rabbit antibodies was 4.05 mg/mι in the case of yeast, 7.14 mg/mι in the case of E. coli and that of guinea pig antibodies was 1.90 mg/mι in the case of yeast, 7.17 mg/mι in the case of E. coli, respectively. To determine remained host-derived proteins in biotechnological products which produced by the hosts, S. cerevisiae or E. coli, we used a sandwich enzyme linked immunosorbent assay method in 96 well microplate. When the method applied to determine the remained host-derived proteins in commercial biotechnological products, it detected less than 3.5 ng/vial in human growth hormone, less than 1 ng/vial in hepatitis B vaccine and interferon-${\gamma}$ and 2~23 ng/vial in interferon-$\alpha$. The method can be used to determine the remained host-derived protein in biotechnological products.
Park, Yu-Ri;Park, Ji-Young;Kang, Dae-Young;Han, Do-Hyun;Yoon, Hachung;Jeong, Wooseog;An, Dong-Jun;Yeo, Sang-Geon;Park, Choi-Kyu
Korean Journal of Veterinary Service
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v.39
no.4
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pp.267-270
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2016
We determined the nationwide seroprevalence of hepatitis E virus (HEV) infection in the wild boar population in Korea. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) results showed that 42% of the 528 wild boars that were hunted between 2013 and 2014 were anti-HEV antibody positive. Furthermore, all Korean provinces showed an HEV seroprevalence between 9.8% and 51.1%, suggesting that wild boar HEV infection occurs throughout the country. Importantly, infected wild boar could act as a potential reservoir for HEV and could aid transmission to other animals and humans.
Kim, Kang-in;Lee, Hanbyul;Jung, So Yoon;Lee, Dong Hwan;Lee, Jeongho
Journal of Genetic Medicine
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v.15
no.2
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pp.92-96
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2018
Chronic mucocutaneous candidiasis (CMC) is characterized by increased susceptibility to chronic and recurrent infections of the skin, mucous membranes, and nails by Candida species. It is a primary immunodeficiency disorder that is difficult to diagnose because of its heterogeneous clinical manifestations and genetic background. A 20-month-old boy who did not grow in height for 3 months was diagnosed as having hypothyroidism and he had hepatitis which was found at 5 years old. He presented with persistent oral thrush and vesicles on the body, the cause of which could not be identified from laboratory findings. No microorganism was detected in the throat culture; however, the oral thrush persisted. Immunological tests showed that immunoglobulin (Ig) subclass IgG and cluster of differentiation (CD)3, CD4, and CD8 levels were within normal limits. We prescribed oral levothyroxine and fluconazole mouth rinse. The patient was examined using diagnostic exome sequencing at the age of 6 years, and a c.1162A>G (p.K388E) STAT1 gene mutation was identified. A diagnosis of CMC based on the STAT1 gene mutation was, thus, made. At the age of 8 years, the boy developed a malar-like rash on his face. We conducted tests for detection of antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies, which showed positive results; therefore, systemic lupus erythematosus (SLE) was also suspected. Whole exome sequencing is important to diagnose rare diseases in children. A STAT1 gene mutation should be suspected in patients with chronic fungal infections with a thyroid disease and/or SLE.
Human pathogenic viruses such as hepatitis A and E virus (HAV and HEV), which lead to acute liver failure and death, are foodborne pathogens associated with the consumption of virus-contaminated meats, filter-feeding bivalves, fruits, and salads. Two of the three swine farms examined in this study had HAV and HEV positive stool samples in a nested RT-PCR assay. The use of the immunomagnetic separation (IMS) facilitated the separation of HAV through interactions between the ligand on the virion surface and the antibody from the swine feces containing both HAV and HEV. The nested RT-PCR analysis was performed for the detection of HAV obtained from hepatocarcinoma cell line (PLC/PRF/5) contaminated with eluent fraction of IMS. This indicated that IMS has the potential to simultaneously isolate and concentrate target viruses by changing antibodies linked on the magnetic beads.
Plasmid DNA vaccines encoding the hepatitis B virus (HBV) surface and hepatitis C virus (HCV) envelope antigens, respectively, were constructed, and attempt were made to find the possibility of a divalent vaccine against HBV and HCV. The expression of each plasmid in Cos-1 cells was confirmed using immunocytochemistry. To measure the induced immune response by these plasmids in vivo, female BALB/c mice were immunized intramuscularly with $100\;{\mu}g$ of either both or just one of the plasmids. Anti-HBV and HCV-specific antibodies and related cytokines were evaluated to investigate the generation of both humoral and cellular immune responses. As a result, specific anti-HBV and anti-HCV serum antibodies from mice immunized with these plasmids were observed using immunoblot. The levels of IL-2 and RANTES showing a $Th_{1}$ immune response were significantly increased, but there was no change in the level of IL-4 ($Th_{1}$ immune response) in any of the immunized groups. Compared with each plasmid DNA vaccine, the combined vaccine elicited similar immune responses in both humoral and cell-mediated immunities. These results suggest that the combined DNA vaccine can induce not only comparable immunity experimentally without antigenic interference, but also humoral and $Th_{1}$ dominant cellular immune responses. Therefore, they could serve as candidates for a simultaneous bivalent vaccine against HBV and HCV infections.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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