To investigate effects of chronic alcohol consumption and tocopherol on lipid peroxidation and mitochondrial respiration 48 male rats of Sprague-Dawley strain were divided into 4 groups. Each group received for 3 weeks one of 4 experimental diets: tocopherol deficient control (TDC), tocopherol deficient-ethanol (TDE), tocopherol-supplemented control (TSC) and tocopherol-supplemented-ethanol (TSE). Composition of the diets was based on the Lieber and Decarli liquid diet and $\alpha$-tocopherol was supplemented at the level of 30mg/liter of diet, and ethanol supplied 36kcal%. TDC and TSC were pair-fed to TDE and TSE, respectively. Increase of body weight of tocopherol deficient-ethanol group was the lowest and the effect was diminished with tocopherol supplementation. Respiration of liver mitochondria was depressed in ethanol-administered groups and the effect became larger with tocopherol deficiency. Hepatic lipid peroxide level was not influenced by ethanol, but hepatic tocopherol content decreased with ethanol treatment. The result indicated that, although lipid perroxide level was unchanged with chronic ethanol consumption, oxidative stress exists in tissues of rate administered ethanol and may be relieved by tocopherol supplementation.
When acetaminophen (25mM) was introduced into the perfused rat liver, the hepatic O2 uptake was rapidly inhibited first and then later slow-down. The rapid inhibition was found to be due to mitochondrial blockade, whereas the so-called slow inhibition" was associated with microcirulatory aberrations as evidenced by inhomogneous staining of the liver tissue by trypan blue infusion (0.1%). NaCN (0.5mM) also caused rapid and slow respiratory inhibitions, giving heterogeneous trypan blue staining.ning.
다섯 종류의 실험유지로 고등어유, 장어유, 콩기름, 채종유 및 쇠기름을 사용하여 먹이의 10%(w/w)되는 조제식이를 2주간 휜쥐에게 시행하여, 혈장, 심장, 지방조직의 lipoprotein lipase의 활성도, mitochondrial respiration측정하고, mitochondrial membrane matrix 지질의 지방산구성을 조사하였다. Lipoprotein lipase의 활성은 혈장에서는 쇠기름군이 식물유 및 어유군에 비해 약 60%정도 높고, 지방조직에서는 거의 3배가량 높았으나, 식물유와 어유군 간에는 차이가 없었다. 각 군간에 mitochondrial respiration율은 심장조직에서는 차이가 별로 없었고, 채종유군이 P/O ratio가 심장, 간장조직에서 모두 낮았고 어유(魚油)군의 간장조직mitochondrial respiration이 타조직에 비해 낮았다. Mitochondrial inner membrane matrix분획의 지질 지방산조성은 콩기름군에서 $C_{18:2}$, $C_{20:4}$ 함량이 높고 고등어유군은$C_{22:1}$가 간장조직에서 발견되는 반면 채종유군은 동일 지방산이 심장 mitochondria에서 발견되었다.
The present investigation was undertaken in vivo to determine whether the functional alterations of hepatic mitochondria induced by ethanol might be prevented by taurine. We examined the effects of supplementation of taurine on hepatic mitochondrial oxidative phosphorylation in the chronic ethanol-administered rats. Isolated hepatic mitochondria from three groups of rats were functionally tested by an analysis of $\beta-hydroxbutyrate-supported$ respiration and the coupling of this process to ATP synthesis in the presence of ADP. The three groups were control group(CO), ethanol(60g/L) administered group (AL), and ethanol (60g/L) + taurine (5g/L) supplemented group (AT). Ethanol and/or taurine were given in drinking water for 10 weeks. The mitochondria from AL group had lower state 4 respiratory rate, respiratory control (RC) ratio and ADP : O(P/O) ratio than those from CO and AT group. It showed that the ethanol administered rats were less coupled and thus less efficient with respect to mitochondrial ATP synthesis than both control rats and ethanol + taurine supplemented rats. It suggests that taurine supplementation might improve the impaired oxidative phosphorylation efficiency in mitochondrial dysfunction that is recognized as a cause of liver diseases in chronic ethanol consumption.
흰쥐에서의 알콜섭취와 식이지방랴잉 성장과 간기능 및 혈액의 생화학적 특성에 미치는 영향을 조사하기 위하여 160g 내외의 Sprague-Dawley 종 숫쥐 48마리를 4군, 즉 고지방비알콜군, 고지방 알콜군, 저지방비알콜군, 저지방알콜군으로 나누어 3주간 6주간 사육하였다. 저지방과 고지방식이는 총 Calorie의 12%와 30%지방 Calorie로 하였고 알콜은 급수용 물에 1-% ethanol로 하였고 알콜은 급수용 물에 10% ethanol을 섞어 공급하였다. 만성적인 알콜섭취에서는 알콜 자체와 영양결핍이 상호작용하여 여러가지 생화학적 임상학적 변화를 초래하게 되므로, 본 연구에서는 식이에 lipotropic agents인 choline과 nethionine을 포함한 모든 필수영영소들을 충분히 제공한 상태에서 알콜과 식이지방의 효과를 측정하고자 하였다. 총 Calorie는 고지방알콜 군에서 21.86% 저지방알콜군에서는 23.61%에 해당 하여 moderate drinking에 해당하였다. 성장에 미치는 영향은 저지방알콜군이 유의하게 저조한 성장을 보였으며 낮은 식이효율을 나타냈다. 혈장내 triglyceride농도는 알콜섭취군에서 증가하였고 섭췻기간이 길수록 그 차이는 커진 반면에 식이지방 함량에 따른 차이는 보이지 않았다. 총 cholesterol과 Hdl-cholesterol농도는 군간의 차이를 보이지 않았으며 vitamin $B_1$상태를 나타내는 trighyceride 활성과 TPP effrct도 군가의 차이가 없었다. 간기능을 간접적으로 시사하는 혈청 GPT활성과 간 mitochondria의 respiration rate도 알콜섭취와 지방함량에 따른 차이를 보여주지 않았다.
The present work was designed to determine whether change in fluidity of the mitochondrial membrane affects mitochondrial {TEX}$F_{1}${/TEX}{TEX}$F_{0}${/TEX}ATPase characteristics in NIDDM-prone BHE/Cdb rat. Isolated mitochondria fom BHE/Cdb rat fed a 6% coconut oil or corn oil were functionally tested by an analysis of its respiration and the coupling of this process to ATP synthesis in presence of oligomycin, a specific inhibitor of oxidative phosphorylation (OXPHOS), that binds to the {TEX}$F_{1}${/TEX}{TEX}$F_{0}${/TEX}ATPase. Mitochondria from rats fed coconut oil were more responsive to the inhibitory action of oligomycin with respect to state 3 respiration, respiratory control (RC) ratio and ADP:P (P/O) ratio than were mitochondria from rats fed corn oil. In state 3 respiration, mitochondria from rats fed coconut oil consumed less oxygen than did mitochondria from rats fed corn oil. RC ratio was lower in the mitochondria from rats fed coconut oil than was mitochondria from rats fed corn oil. In P/O ratio, the mitochondria from rats fed coconut oil had a lower P/O ratio than did mitochondria from rats fed corn oil. The data showed that the chang influidity of the mitochondrial membrane by dietary fat affected mitochondrial {TEX}$F_{1}${/TEX}{TEX}$F_{0}${/TEX}ATPase characteristics. The present study on diet differences in {TEX}$F_{1}${/TEX}{TEX}$F_{0}${/TEX}ATPase characteristics provides considerable insight into the role diets play in the control of mitochondrial function, expecially OXPHOS in NIDDM with mitochondrial defects.
Disulfiram (tetraethylthiuram disulphid) is used in the treatment of chronic alcoholism since it causes an unpleasant aversive reaction to alcohol. It works by inactivating hepatic aldehyde dehydrogenase, leading to pronounced rise in the acetaldehyde concentration when ethanol is metabolized. Acetaldehyde causes alcohol sensitivity, which involve vasodilation associated with feeling of hotness and facial flushing, increased heart rate and respiration rates, lowered blood pressure, nausea, headache. One of its metabolites, diethyldithiocarbamate (DDC) can inhibit the enzyme dopamine $\beta$-hydroxylase (DBH), this may account for the profound refractory hypotension and hypothermia seen with the disulfiram-ethanol reaction (DER), resulting from norepinephrine depletion. This report is presents the case of a patient we met, who presented with hypothermia caused by the disulfiram-ethanol reaction, and along with a brief review of the subject.
It has been well documented that animals exposed to cold show increased activity of thyroid gland. The calorigenic action of thyroid hormone has been demonstrated by a variety of in vivo and in vitro studies. According to Edelman et al., the thyroid thermogenesis is due to activation of energy consuming processes, especially the active sodium transport by the hormone in target tissues. If so, the increase in thyroid activity during cold exposure should induce increased capacity of sodium transport in target tissue and the change in tissue metabolism should be precisely correlated with the change in Na+_K+_ATPase activity of the tissue. This possibility was tested in the present study: in one series, changes in oxygen consumption and Na+_K+_-ATPase activity of liver preparations were measured in rats as a function of thyroid status, in order to establish the effect of thyroid hormone on the tissue respiration and enzyme system in another series, the effect of cold stimulus on the serum thyroid hormone level, hepatic tissue oxygen consumption and Na+_K+_ATPase activity in rats. The results obtained are as follows: 1. The Na+_dependent oxygen consumption of liver slices, the oxygen consumption of liver mitochondria and the Na+_K+_ATPase activity of liver preparations were significantly inhibited in hypothyroidism and activated in hyperthyroidism. Kinetic analysis indicated that the Vmax. of Na+_K+_ATPase was decreased in hypothyroidism and increased in hyperth)'roidism. 2. In cold exposed rats, the serum triiodothyronine (T₃) level increased rapidly during the initial one day of cold exposure, then declined slowly to the control level after two weeks. The serum thyroxine (T₄) level decreased gradually throughout the cold exposure. Accordingly the T₃/T₄ratio increased. The mitochondrial oxygen consumption and the Na+_dependent oxygen consumption of liver slices increased during the first two days and then remained unchanged thereafter The activity of the Na+_K+_ATPase in liver preparations increased during cold exposure with a time course similar to that of oxygen consumption. Kinetic analysis indicated that the Vmax. of Na+_K+_ATPase increased. 3. Once the animal was adapted to cold, induction of hypothyroidism did not significantly alter the hepatic oxygen consumption and Na+_K+_ATPase activity. These results indicate that: 1) thyroid hormone increases capacities of mitochondrial respiration and active sodium transport in target tissues such as liver; 2) the increased T₃level during the initial period of cold exposure facilitates biosynthesis of Na+_K+_ATPase and mitochondrial enzymes for oxidative phosphorylation, leading to enhanced production and utilization of ATP, hence heat production.
This study examined the metabolism of free radicals in hepatic mitochondria of goats induced by lipopolysaccharide (LPS), and investigated the effects of melatonin (MT). Forty-eight healthy goats ($10{\pm}1.2\;kg$) were randomly selected and divided into four groups: saline control, LPS, MT+LPS and MT. The goats within each group were3 sacrificed either 3 or 6 h after treatment and the livers removed to isolate mitochondria. The respiration control ratio (RCR), the ADP:O ratio, the oxidative phosphorylation ratio (OPR), the concentration of $H_2O_2$ and the activities of Complex I-IV were determined. The mitochondrial membrane potential ($\Delta\psi_m$) was analyzed by flow cytometry. The results showed that RCR, O/P and OPR of the LPS group decreased (p<0.05), as well as activities of respiratory complexes, whereas the generation of $H_2O_2$ in Complex III increased (p<0.05) after 3 h, while Complex II and III increased after 6 h. Also, it was found that the mitochondrial membrane potential of the LPS group declined (p<0.05). However, pre-treatment with MT attenuated the injury induced by LPS, which not only presented higher (p<0.05) RCR, O/P, OPR, and respiratory complex activities, but also maintained the $\Delta\psi_m$. Interestingly, it is revealed that, in the MT+LPS group, the generation of $H_2O_2$ increased firstly in 3 h, and then significantly (p<0.05).decreased after 6 h. In the MT group, the function of mitochondria, the transmenbrane potential and the generation of $H_2O_2$ were obviously improved compared to the control group. Conclusion: melatonin prevents damage caused by LPS on hepatic mitochondria of goats.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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