• Environmental Analysis Health and Toxicology
• /
• 제20권3호
• /
• pp.215-221
• /
• 2005

Environmental polycyclic aromatic hydrocarbones (PAHs), which are formed during incomplete combustion of fossil fuels, are widely distributed in our environment. Human exposure to PAHs may occur through smoking, polluted air, food consumption and occupational contact. Urinary naphthols, 1-and 2-naphthol, have been suggested as route -specific biomarkers for exposure to airborne PAHs. Cytochrome p450 2E1 (CYP2E1) is known to be a great importance for the metabolism of organic solvents, which is a precacinogens with small molecular weight. This study describes the metabolic differences between PstI and RsaI polymorphisms (c1 allele: PstI-. RsaI+ ; c2 allele: PstI+, RsaI-) of CYP2E1 5-flanking region by genetically modified HepG2 cells, which overexpress the polymorphic regions. The results of CAT assay and western blot in the c2 allele overexpressed cells have higher activities than the cl allele over-expressing cells. However, the metabolism of naphthalene to 2-naphthol has no difference due to the two genotypes. In this study, we established the CYP2E1 polymorphic allele transduced HepG2 cells to screen susceptibility -differences in PAH exposure. In conclusion, the CYP2E1 polymorphism may hardly induce susceptibility differences in PAH exposure monitoring with urinary naphthols.

• BMB Reports
• /
• 제33권5호
• /
• pp.396-401
• /
• 2000

A differential display method is used to identify novel genes whose expression is affected by treatment with ferric ammonium citrate (FAC) or desferrioxamine (DFO), an iron chelating agent in the human hepatoblastoma cell line (HepG2). These chemicals are known to deplete or increase the intracellular concentration of iron, respectively. Initially, we isolated seventeen genes whose expressions are down- or up regulated by the treatment of the chemicals, as well as their four differentially expressed genes that are designated as clone-1, -2, -3, and -4. These are further characterized by cDNA sequencing and Northern blot analysis. Through the cDNA sequencing, as well as comparing them to genes published using the NCBI BLAST program, we identified the sequence of the clone-1 that is up-regulated by the treatment of DFO. It is identical to the human insulin-like growth factor binding protein-1 (IGFBP-1). This suggests that the IGFBP-1 gene in the HepG2 cell is up-regulated by an iron depletion condition. Also, the expression of the clone-3 and -4 is up-regulated by FAC treatment and their eDNA sequences are identical to the human ferritin-fight chain and human NADH-dehydrogenase, respectively. However, the sequence of the clone-2 has no significant homology to any other known gene. Therefore, we suggest that changes of the cellular iron level in the HepG2 cell affects the transcription of cellular genes. This includes human IGFBP-1, ferritin-fight chain, and NADH-dehydrogenase. Regulation of these gene expressions may have an important role in cellular functions that are related to cellular iron metabolism.

• 동의생리병리학회지
• /
• 제18권6호
• /
• pp.1825-1831
• /
• 2004

Phellinus linteus is known as a medicinal mushroom, which has the pharmaceutical activity on tumors and inflammatory diseases in traditional Oriental medicine. However, despite extensive pharmacological studies on P. linteus, the liquor of fermentation using mycelium of P. linteus(LFMP) has not been investigated. In the present study, it was examined the effect of the evaporating extract from LFMP(E-LFMP) on the expression of inflammatory proteins and the generation of reactive oxygen species in human hepatocarcinoma HepG2 cells. E-LFMP inhibited acetaldehyde-induced morphological change in HepG2 cells. Also, E-LFMP inhibits expression of inflammatory proteins including cyclooxygenase(COX)-1 and COX-2 through suppressing nuclear translocation of nuclear factor κB(NF-κB) and degradation of inhibitory κBα(IκBα). In addition, E-LFMP inhibits generation of reactive oxygen species(ROS) by hydrogen peroxide(H₂O₂) in HepG2 cells. These results suggest that LFMP has the pharmaceutical, especially anti-inflammatory, activity similar to P. linteus mushroom.

• 한국식품영양과학회지
• /
• 제38권2호
• /
• pp.154-159
• /
• 2009

알코올에 의해 유도된 간 손상에 대한 지구자 추출물의 보호효과를 연구하였다. HepG2/2E1 세포에서 알코올로 유도된 ROS 생성과 산화적 손상에 대한 지구자 추출물 보호효과를 확인하였다. C57BL/6마우스를 대조군(NC), 알코올군(ET), 알코올과 지구자 추출물 1 g/kg body weight 투여군(ET-HD)으로 나누었다. 5 g/kg body weight의 알코올을 1주일간 ET와 ET-HD군에 투여하였다. 알코올 투여는 혈청 alanine amintransferase(ALT), aspartate aminotransferase(AST) 및 alkaline phosphatase(ALP)를 증가시키고, 지구자 추출물은 이러한 간 기능 지표효소의 증가를 억제시켰다. 간조직의 항산화 효소 활성은 알코올 투여에 의해 감소되었고, ET-HD군에서 SOD 및 GST 활성은 ET군과 비교하여 통계적으로 유의하게 높아졌다. GSH 함량은 ET군에서 NC군에 비하여 유의적으로 낮아졌고, ET-HD군에서 ET군과 비교하여 통계적으로 유의하게 높아졌으며, NC군과 유사한 함량을 나타내어 간 보호 효과를 확인할 수 있었다. 지질과산화물 함량은 ET-HD군과 NC군이 유사한 함량을 나타냄으로써 알코올에 의해 유도된 지질과산화물 증가에 의한 간손상으로부터 지구자 추출물의 보호 효과를 보여 주었다. 이상의 결과로부터, 지구자 추출물은 세포 및 동물 모델에서 알코올로 유도된 간 손상으로부터 항산화 방어 대사의 증가와 지질과산화율의 감소에 의해 간세포 보호 활성을 나타냄을 확인하였다. 이에 지구자 추출물은 알코올성 간 손상으로부터 보호 효과를 갖는 소재로 활용될 수 있을 것으로 사료된다.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
• /
• 제15권8호
• /
• pp.3731-3736
• /
• 2014

Phytic acid (PA) has been reported to have positive nutritional benefits and prevent cancer formation. This study investigated the anticancer activity of rice bran PA against hepatocellular carcinoma (HepG2) cells. Cytotoxicty of PA (0.5 to 4mM) was examined by MTT and LDH assays after 24 and 48h treatment. Apoptotic activity was evaluated by expression analysis of apoptosis-regulatory genes [i.e. p53, Bcl-2, Bax, Caspase-3 and -9] by reverse transcriptase-PCR and DNA fragmentation assay. The results showed antioxidant activity of PA in Fe3+ reducing power assay ($p{\leq}0.03$). PA inhibited the growth of HepG2 cells in a concentration dependent manner ($p{\leq}0.04$). After 48h treatment, cell viability was recorded 84.7, 74.4, 65.6, 49.6, 36.0 and 23.8% in MTT assay and 92.6, 77.0%, 66.8%, 51.2, 40.3 and 32.3% in LDH assay at concentrations of 1, 1.5, 2.0, 2.5, 3.0, and 3.5mM, respectively. Hence, treatment of PA for 24h, recorded viability of cells 93.5, 88.6, 55.5, 34.6 and 24.4% in MTT assay and 94.2, 86.1%, 59.7%, 42.3 and 31.6%, in LDH assay at concentrations of 1, 2.2, 3.0, 3.6 and 4.0mM, respectively. PA treated HepG2 cells showed up-regulation of p53, Bax, Caspase-3 and -9, and down-regulation of Bcl-2 gene ($p{\leq}0.01$). At the $IC_{50}$ (2.49mM) of PA, the p53, Bax, Caspase-3 and-9 genes were up-regulated by 6.03, 7.37, 19.7 and 14.5 fold respectively. Also, the fragmented genomic DNA in PA treated cells provided evidence of apoptosis. Our study confirmed the biological activity of PA and demonstrated growth inhibition and induction of apoptosis in HepG2 cells with modulation of the expression of apoptosis-regulatory genes.

• 생명과학회지
• /
• 제20권10호
• /
• pp.1505-1510
• /
• 2010

본 연구에서는 갑각류에 속하는 따개비를 각 용매 별로 분획하여 항균효과, 암세포 증식 억제 및 QR 유도 활성 효과를 알아보았다. 따개비의 각 분획물 AAMH, AAMB, AAMM 및 AAMA층을 식중독 원인균인 Staphylococcus aureus (ATCC 25923), E.coli (ATCC 21990) 및 Salmonella enteritidis (ATCC 13076)와 단백질 부패 원인균인 Proteus mirabilis (ATCC 25933)의 4가지 균주에 처리하여 항균 활성을 조사한 결과 부탄올 분획층인 AAMB층에서 가장 높은 항균 활성 효과를 나타내었다. 또한 HepG2와 B16-F10 세포주에 대한 암세포 증식 억제효과를 알아 본 결과 메탄올 분획층인 AAMM에서 높은 암세포 성장 억제 효과를 나타내었다. 그리고 quinone reductase를 가지고 있는 간암 세포인 HepG2세포주를 이용한 QR 유도 활성 효과의 결과에서도 암세포 성장 억제 효과의 결과에서와 마찬가지로 메탄올 분획층인 AAMM층에서 가장 높은 QR 유도 활성 효과를 나타내었다. 대조군을 1로 하여 비교한 결과 20, 40, 60, 80 및 100 ${\mu}g$/ml의 시료 농도 첨가 시 AAMM층에서 그 효과가 농도 의존적으로 유의성 있게 증가하였으며, 각각 1.20, 1.54, 1.59, 1.82 및 2.04 배의 QR유도 활성 증가 효과를 나타내었다. 따라서 본 연구결과는 앞으로 따개비를 이용한 항균, 항암관련 기능성 식품에 대한 개발 가능성이 보이며, 이를 위한 부탄올 및 메탄올 분획물에 대한 집중적인 연구가 요구되어진다. 그리고 해양 동물 중의 하나인 갑각류에 속하는 따개비에 대한 활성 연구에 있어 기초자료가 될 것으로 예상되며, 해양생물이 크게 대두되고 있는 요즈음 유사 종의 갑각류인 새우나 게에 비해 그 활용도가 극히 낮은 따개비에 대한 소비촉진에 영향을 끼칠 것으로 기대되어진다.

• 동아시아식생활학회지
• /
• 제12권1호
• /
• pp.15-22
• /
• 2002

식품재료인 메주와 다시마 그리고 이들 재료를 사용하여 자연발효에 의해 제조한 전통 막장에 대한 일반성분을 분석한 결과 기존의 막장에 비해 무기물의 함량이 증가하였다. MNNG에 대한 항돌연변이 효과(400$\mu$g/plate)에서 S. typhimurium TA100 균주에 대해 다시마 분말 5% 첨가 막장이 다른 첨가 농도보다 높은 95.0%의 강한 억제효과를 나타내었다. 4NQO에서도 5%의 다시마 분말을 첨가한 막장이 TA98과 TA100 두균주에 대해서 400$\mu$g/plate에서 각각 81.4%와 88.8%로 다른 첨가 군보다 높은 억제효과를 나타내었다. B($\alpha$)P에 대한 억제효과에서는 동일농도에서 TA98, TA100 두균주에 대하여 다시마 분말 5% 첨가 막장이 각각 85.3%와 91.0%로 다른 첨가군보다 높은 억제활성을 나타내었으며, Trp-P-1에 대해 두균주에 대해서는 96.5%와 92.0%로 다른 농도보다 높은 억제효과를 나타내었다. 암세포 성장 억제효과를 검토한 결과에서는 5%다시마 분말 첨가 막장이 1.0mg/ml시료농도에서 A549가 61.2%, KATOIII는 61.8%, 그리고 HepG2는 66.8%의 성장억제 효과를 나타내었다.

• Parasites, Hosts and Diseases
• /
• 제35권4호
• /
• pp.251-258
• /
• 1997

톡소포자충. RH주 tachyzoite의 항원성 난백질에 대하여 알아보고자 마우스 복강 내 또는 in uipo에서 Hep-2 cell에 계대한 톡소포자충과 감염마우스의 복팡앤으로 SDS-PAGE/immunoblot을 시행하였다 또 lmnoanity chromatoaphy를 이용하여 톡소포자충 항원을 징제한 후 SDS PAGE/immunoblot을 시행하여 항원을 분리하였으며. 톡소포자충 조항원 및 정제항원으로 면역시킨 마우스 혈청을 이용하여 IgG-ELISA를 시행하였다. 톡소포자충 용해물을 면역시킨 노끼의 항혈 청으로 immunoblot을 시행하였을 때 마우스 복강 내로 계대한 톡소포자충에서 76 kDa. 70 kDa. 64 kDa. 53 kDa 46 kDa. 44 kDa. 35 kDa. 25 kDa. 18 kDa 및 13 kDa의 항원대가 관찰되었으며. in vitro에서 Hep-2 cell에 배양한 톡소포자충은 70 kDa. 64 kDa. 53 kDa 35 kDa. 25 kDa 및 13-10 kDa의 항원대가 관찰되어 마우스 복강 내에 계대한 톡소포자충에서 더 많은 항원대가 관찰되었다. 마우스 복강 계대한 tachyzoite 용해물을 immunoaffinity글 시행하여 부분 정제한 후 떤역시킨 초기의 항혈청으로 immunoblot을 하였을때 E-1에서는 97 kDa. 63 kDa. 53 kDa 및 35 kDa이 E-2에서는 53 kDa 및 35 kDa이 나타났다. 한편 감염 마우스 복강 액에서는 76 KDa 53 KDa. 35 kDa 및 29-28 kDa의 항원대가 관찰되었으며. 정상 마우스 복강 액에서도 약하게 76 kDa .35 kDa 및 29-28 kDa의 반응대가 관찰되었다. 감염 마우스 복강앤을 IgG-Sepharose column을 통과시킨 후 시행한 immunoblot에서 E-1은 84 kDa. 76 kDa. 5,B kDa 및 29 kDa이 . E-2에서 53 kDa 및 45 kDa의 항원대가 관찰되었다. 이 실험에서 immunoawnity chromatography를 이용하여 톡소포자충 용해물 및 분비물에서 76 kDa. 63 kDa. 53 kDa. 35 kDa 및 29 kDa의 항원을 불리하였다. 톡소포자충의 조항원과 정제항원 (감염 마우스 복강액. E-1)으로 IgG-ELISA를 시행한 결과. 조항원의 경우 2차 면역 후 1주 후부터 IgG 항체가 증가하였고 정제 항윈은 2차 면역 후 3주 후부터 IgG항체가 증가하였다 (p<0.05).

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
• /
• 제13권3호
• /
• pp.1025-1029
• /
• 2012

Objective: To determine the killing effects on extracorporeal HepG2 cells under different temperatures, pressures of permeability and lengths of treatment time. Method: According to different temperatures, pressures of permeability and lengths of treating time, extracorporeal HepG2 cells of human hepatoma cell-line were grouped to 80 groups. Cell index (CI) as the measurement of killing effect were calculated by monotetrazolium (MTT) methods, i.e., CI =1- (the OD value in treated group - the OD value in blank control group) / (mean of untreated control group - mean of blank control group). According to the factorial design, data were fed into SPSS 10.0 and analyzed by three-way ANOVA (analysis of variance). Result: Temperature, pressure of permeability and length of treating time all had effects on the CI (cell index) level. Length of treating time was the most influential factor of the three. Additionally, any two of them all had statistically significant interactive effects on the CI level. When treated for 5-30 min, destilled water at $46^{\circ}C$ stably generated the highest CI. Conclusion: The "$46^{\circ}C$-destilled water-60 min" was considered as the optimal combination of conditions which lead to highest CI. We suggest exerting celiac lavage for 15 min with stilled water at $40^{\circ}C-43^{\circ}C$ in surgical practice as a hyperthermia treatment to achieve ideal killing effects on free cancer cells, which is feasible, practical, and clinically effective.

• Natural Product Sciences
• /
• 제19권2호
• /
• pp.155-159
• /
• 2013

Honokiol, a naturally occurring neolignan mainly found in Magnolia species, has exhibited a potential anti-proliferative activity in human cancer cells. However, the growth inhibitory activity against hepatocellular carcinoma cells and the underlying molecular mechanisms has been poorly determined. The present study was designed to examine the anti-proliferative effect of honokiol in SK-HEP-1 human hepatocellular cancer cells. Honokiol exerted anti-proliferative activity with cell-cycle arrest at the G0/G1 phase and sequential induction of apoptotic cell death. The cell-cycle arrest was well correlated with the down-regulation of checkpoint proteins including cyclin D1, cyclin A, cyclin E, CDK4, PCNA, retinoblastoma protein (Rb), and c-Myc. The increase of sub-G1 peak by the higher concentration of honokiol ($75{\mu}M$) was closely related to the induction of apoptosis, which was evidenced by decreased expression of Bcl-2, Bid, and caspase-9. Hohokiol was also found to attenuate the activation of signaling proteins in the Akt/mTOR and ERK pathways. These findings suggest that the anti-proliferative effect of honokiol was associated in part with the induction of cell-cycle arrest, apoptosis, and dow-nregulation of Akt/mTOR signaling pathways in human hepatocellular cancer cells.