The present study were performed to analysis the hematocrit and the red blood cells content into the blood plasma of the transgenic pigs harboring recombinent human erythropoietin gene (rhEPO). Mouse whey acidic protein (mWAP) linked to rhEPO gene was microinjected into pronuclei of porcine one-cell zygotes. After delivered of offspring, PCR analyses identified one mWAP-rhEPO transgenic founder offspring(F$_{0}$). The first generation of transgenic pig (F$_{0}$) harboring mWAP-hEPO appeared to be a male, and the second generation (F$_1$) pigs were made by natural mating of F$_{0}$ with domestic swine, and male and female transgenic pigs (F$_1$) were identified by PCR. The blood samples from transgenic and normal pigs were collected for 50 days during lactation and were counted the red blood cell (RBC) numbers and Hematocrit (HCT) content into the blood. The transgenic pigs expressing rhEPO in their blood gave rise to higher RBC numbers and HCT contents than control animals. rhEPO was secreted both in the blood and milk of genetically engineered pigs harboring rhEPO gene. Therefore, this study provides a model regarding the production of transgenic pig carrying hEPO transgene for biomedical research.earch.
The purpose of this research is to assess hematological and biochemical status and the prevalence of iron deficiency of pregnant women by gestational age to provide the primary data about iron nutritional status of pregnant women. Pregnant women visiting public health centers in Ulsan participated in study and were divided into 3 trimester by last menstrual period(LMP). Hemoglobin (Hgb), hematocrit(Hct)and mean corpuscular volume(MCV) among iron status indices were not statistically different from normal distribution, however total iron binding capacity(TIBC) and serum ferritin were skewed to left and serum iron and transferrin saturation(TS) were skewed to right. Hgb was positively correlated with Hct(r=0.93, p<0.001) but TIBC was negatively correlated with all indices. Serum ferritin was also correlated with all indices, especially in 3rd trimester but not reached to 1st trimester level. Mean corpuscular hemoglobin(MCH), mean corpuscular hemoglobin concentration(MCHC), Red cell distribution width(RDW), serum iron and TS were not significantly different by trimester, however when serum serum iron was adjusted with hematocrit to correct the hemodilution, it significantly decreased in 2nd trimester. MCV increased in 2nd trimester and was maintained until late pregnancy, TIBC continued to increase throughout the trimester. The prevalence of anemic by CDC(Centers for Disease Control) Hgb criteria(Hgb <11.0g/dl in 1st and 3nd trimester, Hgb<10.5g/dl in 2nd trimester) was 2.8% in 1st trimester, 22.5% in 2nd trimester, 27.1% in 3rd trimester and was similar with prevalence by CDC Hct criteria(Hct < 33% in 1st and 3rd, Hct < 32% in 2nd). The prevalence of anemic of total subjects was 32.7% by WHO criteria(Hgb < 11.0g/dl). Although almost iron status indices increased in 3rd trimester, the prevalence of anemia by different criteria of all indices increased throughout the trimester, so iron nutritional status was considered as serious during late pregnancy. However, since factors other than iron deficiency, such as infection, infection, inflammation, other nutrient deficiency may also play a significant role, to differentiate the anemia due to mainly iron deficiency from the anemia due to other factors, serum ferritin is among the more useful indices in distinguishing the two conditions because it is depressed only in iron deficiency. Hgb<11.0g/dl and serum ferritin<12.0ug/L as the criteria of iron deficiency was suggested by CDC. 17.8% of all subjects were classified as iron deficient anemia, 14.9% as anemic from other reasons, 21.2% as iron deficiency any only 46.2% were in normal iron status.
Three different dogs who had immune-mediated hemolytic anemia (IMHA) were treated for more than two weeks with blood transfusion in an animal clinic. Despite this treatment and hospitalization, there was no clinical improvement in clinical signs as well as complete blood cell count (CBC) including hematocrit (HCT) and C-reactive protein (CRP). All cases were then injected two or three times with allogeneic stem cells through an intravenous route for treatment. Upon administrating stem cells to the IMHA dogs, clinical conditions and the indexes of HCT and CRP were clinically improved within or close to normal ranges.
본 연구는 사람 조혈촉진유전자(hEPO)가 도입된 형질전환돼지 Fl 수컷과 암컷간 교배로 F2 생산시, Fl 모돈에 대한 임신기간(약 114일)내 혈액조성(적혈구, 백혈구, Hemoglobin, Hematocrit value, MCV, MCH, MCHC, 혈소판) 변화를 구명하기 위하여 실시하였다. 시험에 이용된 암퇘지는 형질전환 F1 암컷 2마리와 일반돼지 1마리였고 교배와 동시에 임신기간동안(114일) 5일 간격으로 5ml의 혈액을 경정맥(jugular vein)에서 채취하였으며 혈액조성분석은 Celltac MEK 5108K(Nihon Kohden, Japan)를 이용하였는데 얻어진 결과는 다음과 같다. 임신기간중 혈액내 백혈구의 변화는 일반돼지의 경우 13.8($\pm$2.4)$\times$$10^3$/ul 로임신기간내에 일정한 변화양상을 보였으나 형질전환돼지의 경우 29.4($\pm$19.4)$\times$$10^3$와 22.5($\pm$14.1)$\times$$10^3$/ul 으로 일반돼지보다는 높게 나타났으며 임신기간내에 매우 높은 변화 양상을 나타내었다. 또한 적혈구는 일반돼지(7.2$\pm$0.7 $\times$$10^{6}$/ul)에 비하여 형질전환돼지(11.5$\pm$0.5 와 11.9$\pm$0.5 $\times$$10^{6}$ul)에서 매우 높게 나타났으며 변화양상은 일반돼지와 마찬가지로 작게 나타났다. 적혈구와 함께 Hemoglobin(Hb)과 평균혈구용적율(Hematocrit value ;, HCT) 모두 형질전환돼지가 일반돼지보다 높게 나타났으며 변화양상 또한 작게 나타남으로서 사람 조혈촉진유전자(hEPO)가 형질전환된 돼지에서는 지속적으로 발현되어 조혈촉진이 이루어지고 있으며, 조혈촉진에 의해 헤모글로빈 및 적혈구가 생성되어 혈액내 높은 혈구용적율(HCT)을 이루고 있음을 알 수 있었다. 적혈구 평균용적(Mean Corpuscular Volume ; MCV), 평균적혈구혈색소량(Mean Corpuscular Hemoglobin ; MCH), 평균적혈구혈색소농도(Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration ; MCHC) 그리고 혈소판(Platelets) 분석결과 형질전환돼지가 일반돼지보다 약간 높은 수치를 나타냈으며 변화양상 또한 유사한 결과를 나타내었다. 이와 같은 시험분석결과를 토대로 사람 조혈촉진유전자(hEPO)가 형질전환된 돼지는 유즙으로 발현할 수 있도록 형질전환 되었음에도 불구하고 헤모글로빈 및 적혈구가 증가함으로서 형질전환돼지 개체의 혈장으로도 사람 조혈촉진인자가 분비하고 있음을 간접적으로 알 수 있었다. 정상돼지 보다 형질전환돼지가 약 30% 높은HCT 수준을 보였으며 이러한 현상은 사람에서는 적혈구증다증(erythrocytosis)으로 분류되고 있다. 이에 대한 고찰은 형질전환돼지 자체의 생리적 문제점(side effects)에 대한 해결과 더불어 기존의 인간질병에 대한 모델동물로서의 이용 가능성을 제시할 수 있는 것으로 사료된다.
Efficacy and in vivo bioassay of recombinant human erythropoietin (rh-EPO, DWP413) was investigated. Efficacy studies on erythropoiesis were conducted in normal, cisplatin-induced anemic rats and acute hemorrhage - induced anemic rats. Animals were treated intravenously with DWP413 for 5 days, the changes in the number of red blood cells (RBC), hematocrit value (Hct), hemoglobin concentration (Hb) and reticulocyte were examined. In normal rats, at the doses of 50, 250, and 1250 IU/kg/day, in cisplatin-induced anemic rats, at the doses of 50, 100 and 200 IU/kg/day, RBC, Hb, Hct and reticulocyte were increased dose-depen-dently. And in acute hemorrhage-induced anemic rats, DWP413 (150, 450 and 1350 IU/kg/day) significantly increased RBC, Hb, Hct and reticulocytes. In histopathological findings of kidney, cisplatin alone treated rats expressed severe glomerulus and tubular damage. But in the DWP413 treated rats after cisplatin treatment, these were not remarkable compared to cisplatin alone treated rats. In vivo bioassay, DWP413 had 102.43% of bioactivity compared to erythropoietin BRP(Biological Reference Product, European Directorate for the Quality of Medicines). These results suggest that DWP413 might be useful for the therapy of anemia induce by renal failure and acute blood loss.
자동혈구분석기(Technicon $H^*2$ )에 의한 혈액검체의 측정전 mixing횟수가 검사결과에 미치는 영향을 평가하기 위하여 19가지 parameter를 대상으로 초기측정치에 대한 반복측정치의 변화율을 종속변수로 하여 단순회귀분석을 실시하였다. Mixing횟수가 증가할수록 RBC, Hct, MCV는 통계적으로 유의하게 (p< .01)감소하였고, 호염기구 백분율은 유의하게(p< .05)증가하였으므로 평가된 19가지 parameter의 21%인 4가지 검사항목에서 변화가 있었다.
To evaluate iron nutritional status and to compare biochemical indices used for evaluation of iron nutriture, fasting blood sample was taken from 96 Korean female college student and hemoglobin(Hb) concentration, hematocrit(Hct), serum iron, total iron binding capacity(TIBC) and serum ferritin concentration were measured and transferrin(TF) saturation was calculated. Prevalence of iron deficiency varied from 4.2% when judged from Hb concentration and Hct to 38.5% and 40.6% when TIBC and serum ferritin concentration were used. TIBC was negatively correlated with serum ferritin(r=0.4561, p<0.001), while other indices showed positive but less significant correlations(p<0.05). Regarding iron status judged by serum ferritin was regarded as true iron status, the present cutoff points of Hb, Hct, serum iron, TF saturation were very insensitive in identifying the subjects with iron deficiency. Only TIBC was suitable for detecting iron deficiency in the study subjects. It is concluded from the study results that iron deficiency in young Korean adult women would be significantly underestimated with presently used biochemical measurements except TIBC and new cutoff points of these indices were proposed based on sensitivity, specificity measured prevalence, and positive and negative predictive values.
The purpose of this study is to investigate the iron nutritional status and anemia of university female students. Seventy female subjects in Ulsan city were evaluated with questionnaire, measurement of hematological indices. The mean height and weight of 70 subjects were 160.76±0.48cm, 52.80±0.72kg and BMI(body mass index: kg/m2), %IBW(ideal body weight) were 21.0±0.29, 100.2±12.41. The mean values of hemoglobin(Hgb), hematocrit(Hct), serum iron(S Fe), serum ferritin(SF), TIBC(total iron binding capacity), transferrin saturation(TS(%)) and RBC were 12.7±11.10g/dl, 39.0± 2.61%, 96.9±41.98 g/dl, 28.9±24.78 g/dl, 369.6±54.36 g/dl, 27.1±12.40% and 4.4± 0.27(106/mm3), respectively. Iron deficiency anemia among the subjects was estimated as 15.7% by using Hgb(<12g/dl), 11.4% by Hct(<36%), 22.9% by S Fe(<60 g/dl), 34.3% by SF(<15 g/dl), 48.6% by TIBC(>360 g/dl) and 20.0% by TS(%)(<15%). 15 subjective symptoms were measured and the high prevalence symptoms were 'cold hands and feet' and 'tired out easily'. The correlation between hemotological indices and subjective symptoms was evaluated. The hemoglobin level was negatively correlated with 'cold hands and feet', 'short breath when climbing', 'fragile nail', 'inflammed inner mouth', 'pale face' and 'scaly tetter'.
Efficacy and general pharmacology of recombinant human erythropoietin (rHu-EPO), were investigated. Efficacy studies were conducted in normal, cisplatin- and acute hemorrhage-induced anemic rats. Normal and anemic animals were treated intravenously with rHu-EPO for 5 days and the changes in the numbers of red blood cells (RBC), hemoglobin (Hb), hematocrit (Hct) and reticulocytes (Ret) were examined. In normal rats, rHu-EPO significantly increased RBC, Hb, Hct and Ret at doses of 50∼ 1250 IU/kg/day. Cisplatin-induced anemic rats showed significant increase of RBC, Hb, Hct and Ret in a dose-dependent manner after administration of rHu-EPO (50∼200 lU/kg/day). And in acute hemorrhage-induced anemic rats, rHu-EPO(4∼100 Iu/kg/day) accelerated recovery of anemia with significant increase in Ret. These changes disappeared gradually after cessation of the treatment. The general pharmacological effects of rHu-EPO were investigated in mice, rats, guinea-pigs, rabbits and cats. rHu-EPO had no influences on central nervous, cardiovascular, gastrointestinal and blood coagulation system. It also had no influence on the contraction of phrenic nerve-diaphragm preparation. rHu-EPO produced significant increase of urine volume at a dose of 7000 IU/kg. These results suggest that rHu-EPO might be useful for the therapy of anemia without serious side effect.
Kim, Dong-Hwan;Ahn, Byoung-Ok;Park, Jang-Hyeon;Lee, Sung-Hee;Kim, Won-Bae
Biomolecules & Therapeutics
/
제6권3호
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pp.312-316
/
1998
Efficacy and in vivo bioassay of recombinant human erythropoietin (rho-EPO), was investigated. Efficacy studies were conducted in normal, and cisplatin-induced anemic rats. Normal and anemic animals were treated intravenously with rhu-EPO for 5 days, and the changes in the number of red blood cells (RBC), hemoglobin concentration (Hb), hematocrit value (Hct) and percentage reticulocyte value (Ret, reticulocyte/RBC) were examined. In normal rats, rho-EPO significantly increased RBC, Hb, Hct and Ret at the doses of 50∼ 1,250 lU/kg/day in a dose-dependent fashion. Cisplatin-induced anemic rats showed significant increase of RBC, Hb, Hct and Ret after administration of rho-EPO (50-200 lU/kg/day) in a dose-dependent manner. These changes of hematological parameters disappeared gradually after cessation of the treatment. The in vivo bioassay results in polycythemic mice showed that rho-EPO had 90% of bioactivity compared to NIBSC standard rhu-EPO. These results suggest that rho-EPO might be useful for the therapy of anemia originated from renal failure and chemotherapy-induced anemia.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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