• 제목, 요약, 키워드: Hanwoo

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돼지 웅성 생식선 줄기세포의 체외배양기법 개발 (Development of In Vitro Culture System for Male Germline Stem Cells in Porcine)

  • 김용희;김병각;이용안;김방진;김기중;이명식;임기순;류범용
    • Reproductive and Developmental Biology
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    • v.33 no.3
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    • pp.171-177
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    • 2009
  • Spermatogonial stem cells(SSCs) only are responsible for the generation of progeny and for the transmission of genetic information to the next generation in male. Other in vitro studies have cultured SSCs for proliferation, differentiation, and genetic modification in mouse and rat. Currently, information regarding in vitro culture of porcine Germline Stem Cell(GSC) such as gonocyte or SSC is limited and is in need of further studies. Therefore, in this study, we report development of a successful culture system for gonocytes of neonatal porcine testes. Testis cells were extracted from $10{\sim}14$-day-old pigs. These cells were harvested using enzymatic digestion, and the harvested cells were purified with combination of percoll, laminin, and gelatin selection techniques. The most effective culture system of porcine gonocytes was established through trial experiments which made a comparison between different feeder cells, medium, serum concentrations, temperatures, and $O_2$ tensions. Taken together, the optimal condition was established using C166 or Mouse Embryonic Fibroblast(MEF) feeder cell, Rat Serum Free Medium(RSFM), 0% serum concentration, $37^{\circ}C$ temperature, and $O_2$ 20% tension. Although we discovered the optimal culture condition for proliferation of porcine gonocytes, the gonocyte colonies ceased to expand after one month. These results suggest inadequate acquirement of ingredients essential for long term culture of porcine GSCs. Consequently, further study should be conducted to establish a successful long-term culture system for porcine GSCs by introducing various growth factors or nutrients.

성별 특이 소 혈청이 세포 배양에 미치는 영향 (Effect of Gender-specific Bovine Serum Supplemented Medium on Cell Culture)

  • 이동목;최문석;우경일;신유미;이기호;전용필;전태훈;최인호
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • v.51 no.5
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    • pp.413-420
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    • 2009
  • 본 연구는 성체우의 FS, MS, C-MS를 배양액에 첨가하여 세포증식과 난포의 성장과 배란에 미치는 영향을 관찰하기 위하여 실시하였다. 세포증식은 세포수와 MTT assay을 실시하여 확인하였다. 그 결과 세포증식은 혈청첨가 배양액에 따라 유의적인 차이를 나타내었다. 특히 근육위성세포의 세포증식은 MS를 첨가한 배양액에서 높은 반면 면역세포의 증식은 FBS에서 배양한 세포에 비해 낮은 것을 확인하였다. 또한 난포의 성장 및 배란을 관찰한 결과 난포의 성장에 유의한 차이가 없었으나 군간 차이를 보였으며 배란율과 비례적이었고, 배란율은 FBS와 C-MS가 첨가된 배양액에서 유의적으로 높은 것을 관찰할 수 있었다(P<0.05). FBS군과 C-MS 군 간에는 차이가 없었다. 3T3-L1 세포에서 창상치유는 FS에서 배양한 세포에서 빠른 회복을 나타냈으며, 증식은 MS에서 높게 나타났다(p<0.001). 따라서 본 결과는 세포배양 과정에서 세포에 따른 혈청의 선택은 매우 중요하다는 근거자료를 제시 하였으며, 분리 된 성별 특이 한우 혈청은 FBS의 대체 물질로서 사용이 가능할 것으로 사료된다.

난황항체(IgY) 급여가 Holstein 송아지의 성장능력 및 면역관련 혈액 지표에 미치는 영향 (Effect of Immunoglobulin Y on Growth Performance and Blood Immunological Parameters in Holstein Calves)

  • 정희승;정근기;장인석
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • v.51 no.4
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    • pp.321-328
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    • 2009
  • 본 연구는 초유 급여를 마친 갓 태어난 Holstein 송아지 14두를 대조구(Con) 및 시험구(IgY)로 나누어 49일 동안 대용유를 급여하면서 난황항체(IgY구)를 1주일 동안 투여하여 사양성적, 분변 상태 및 미생물 균총, 혈액내 생화학적 성분 및 면역관련 지표인 백혈구 성상을 조사하여 가장 바람직한 송아지 포유 및 육성 방법을 조사하였다. 시험결과로서 포유 송아지에게 IgY 투여시 체중 및 증체는 대조구(Con) 및 시험구(IgY)간에 유의적 차이 없이 모두 비슷한 성적을 보였다. 송아지 분변의 대장균(E. coli) 및 유산균 총균수를 조사한 결과 IgY 투여에 따른 대장균 및 유산균 수의 차이가 나타나지 않았으나, 분의 상태는 시험구에서 7주째 유의적으로(P<0.05) 고형상태로 배설되었다. 송아지 혈액의 백혈구 감별계수(%)를 조사한 호중구, 림프구, 단핵구, 호염기구 등의 상대적 %는 모든 구에서 정상적인 백혈구 감별 계수를 보여 IgY 투여에 따른 면역 반응에는 차이가 없는 것으로 관찰되었다. 또한 혈액내 존재하는 총 단백질, albumin 및 IgG 등에서도 대조구 및 시험구 모두 비슷한 수준을 나타내었다. 결론적으로 포유 송아지에서 1주 동안 IgY 투여는 증체, 면역작용 및 분변 미생물의 균총에는 특이적 영향이 없는 것으로 사료되어, 송아지에게 생후 24시간 이내 초유를 정확하게 급여하고 사양관리에 충실 할 경우 송아지의 포유 및 육성은 성공적으로 이루어 질 수 있을 것으로 사료된다.

Effects of Carbon Precursors and Hormones on the Lipogenesis and Lipolysis of Hanwoo Cattle Adipose Tissues

  • Lee, S.C.;Lee, H.J.;Kim, D.W.;Park, J.G.;Han, In K.
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • v.13 no.3
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    • pp.300-306
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    • 2000
  • This experiment was carried out to determine the contributions of acetate, glucose, amino acids and amino acid metabolites as carbon precursors for the incorporation of radioisotope, in intramuscular and subcutaneous adipose tissue and the effects of insulin on lipogenesis and adrenergic agent, norepinephrine on lipolysis in both tissues. The rate of incorporation of $C^{14}$ labelled acetate, glucose, leucine, isoleucine and ${\alpha}$-ketoisocaproic acid into adipose tissue has been measured in subcutaneous and intramuscular adipose tissues. The rate of incorporation was greater (p<0.05) from acetate than glucose in both subcutaneous and intramuscular adipose tissue and the rate of incorporation of carbon precursors into adipose tissues was greater in subcutaneous than in intramuscular adipose tissues. In comparison of amino acids, the rate was highest (p<0.05) with leucine followed by isoleucine and ${\alpha}$-ketoisocaproic acid in subcutaneous adipose tissue, in which there were no differences. Also, in intramuscular tissue, leucine was highest (p<0.05), and the rate of incorporation decreased in the same order. The rates of carbon precursor incorporation appeared to be higher in subcutaneous than in intramuscular tissue. For incorporation of radio-labelled acetate and glucose into intramuscular adipose tissue. preincubated for 48 hrs with insulin and IGF-1, insulin was the most effective to stimulate the incorporation of precursors in both substrates but there was no difference between insulin and IGF-1 in glucose incorporation. For glyceride-fatty acid synthesis, acetate was significantly (p<0.05) greater than glucose in both subcutaneous and intramuscular adipose tissue, and glyceride-glycerol synthesis was greater (p<0.05) for glucose than acetate in both adipose tissues. The rates of lipogenesis from both precursors were slightly greater in subcutaneous than intramuscular adipose tissue. There was significant (p<0.05) site effect in insulin treatment for glyceride-fatty acid synthesis. But there were no significance in control and norepinephrine. For glyceride-glycerol synthesis, there was no site effect caused by hormonal treatment. Insulin was the most effective (p<0.05) in glyceride fatty acid synthesis, while norepinephrine was the same as control. Compared with control, glyceride-glycerol synthesis from acetate in insulin treatment was significantly (p<0.05) low in subcutaneous, but high in intramuscular tissue. At the same time, in both tissues, it was lower in norepinephrine treatment than in control. Glyceride-glycerol synthesis from glucose was highest (p<0.05) in norepinephrine treatment followed by insulin although there was no significance between insulin and control. Lipolysis was not affected by insulin but was increased by norepinephrine when added to adipose tissue incubations in vitro. Rates of basal lipolysis were greater in subcutaneous adipose tissue than in intramuscular adipose tissue.

Se과 Vit. E 투여가 한우 종빈우의 번식기능과 송아지의 발육성적에 미치는 효과 (Effects of Se and Vit. E Administration on Reproductive Function of Dams and Developmental Ability of Their Calves)

  • 황환섭;최재관;박동헌;김종복;박춘근;정희태;김정익;양부근
    • 한국가축번식학회지
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    • v.27 no.2
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    • pp.135-142
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    • 2003
  • 본 실험은 한우 종빈우의 임신말기에 Se과 Vit. E 투여가 종빈우의 번식기능에 미치는 요인과 종빈우에서 태어난 송아지의 발육능력을 조사하였다. 1 분만 1개월전 Se과 Vit. E을 투여한 구에서 송아지의 발육성적을 조사한 결과, 생시체중은 각각 23.33, 24.00, 24.00, 24.50, 24.00 및 25.60kg으로서 처리구가 대조구보다 다소 높은 성적을 나타냈다. 또한 이유시 체중과 일당증체량도 투여구가 대조구보다 다소 높은 성적을 나타냈으며, 이유시 일령은 투여구가 대조구보다 이유시 일령이 다소 적었으나 처리구간 유의적인 차이는 없었다(P>0.05). 2. 종빈우의 번식능력을 조사한 결과, 분만 후 초발정과 인공수정 휫수는 투여구가 대조구보다 초발정이 빨리 도래하였고, 수태당 인공수정 휫수도 적었으나 처리구간 유의적인 차이는 없었다(P>0.05). 3. Se과 Vit. E를 분만 2개월전에 4회 투여한 한우 종빈우에서 태어난 송아지의 생시체중, 이유시 체중 및 일당증체량은 투여구가 대조구보다 높은 성적을 나타냈으며, 이유시 일령은 투여구가 대조구보다 이유시 일령이 짧았으나 처리구간 유의적인 차이는 없었다(P>0.05). 4. 한우 종빈우의 번식능력을 조사한 결과, 분만 후 초발정은 유의적인 차이는 없었으며(P> 0.05), 수태 당 인공수정 횟수는 각각 2.00, 1.63, 1.25, 1.50, 1.33 및 1.46회로서 투여구가 대조구보다 인공수정 횟수가 적었으나 처리구간 커다란 차이가 없었다(P>0.05).

AMPKα, C/EBPβ, CPT1β, GPR43, PPARγ, and SCD Gene Expression in Single- and Co-cultured Bovine Satellite Cells and Intramuscular Preadipocytes Treated with Palmitic, Stearic, Oleic, and Linoleic Acid

  • Choi, S.H.;Park, S.K.;Johnson, B.J.;Chung, K.Y.;Choi, C.W.;Kim, K. H.;Kim, W.Y.;Smith, S.B.
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • v.28 no.3
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    • pp.411-419
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    • 2015
  • We previously demonstrated that bovine subcutaneous preadipocytes promote adipogenic gene expression in muscle satellite cells in a co-culture system. Herein we hypothesize that saturated fatty acids would promote adipogenic/lipogenic gene expression, whereas mono- and polyunsaturated fatty acids would have the opposite effect. Bovine semimembranosus satellite cells (BSC) and intramuscular preadipocytes (IPA) were isolated from crossbred steers and cultured with 10% fetal bovine serum (FBS)/Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) and 1% antibiotics during the 3-d proliferation period. After proliferation, cells were treated for 3 d with 3% horse serum/DMEM (BSC) or 5% FBS/DMEM (IPA) with antibiotics. Media also contained $10{\mu}g/mL$ insulin and $10{\mu}g/mL$ pioglitazone. Subsequently, differentiating BSC and IPA were cultured in their respective media with $40{\mu}M$ palmitic, stearic, oleic, or linoleic acid for 4 d. Finally, BSC and IPA were single- or co-cultured for an additional 2 h. All fatty acid treatments increased (p = 0.001) carnitine palmitoyltransferase-1 beta ($CPT1{\beta}$) gene expression, but the increase in $CPT1{\beta}$ gene expression was especially pronounced in IPA incubated with palmitic and stearic acid (6- to 17-fold increases). Oleic and linoleic acid decreased (p = 0.001) stearoyl-CoA desaturase (SCD) gene expression over 80% in both BSC and IPA. Conversely, palmitic and stearic acid increased SCD gene expression three fold in co-cultured in IPA, and stearic acid increased $AMPK{\alpha}$ gene expression in single- and co-cultured BSC and IPA. Consistent with our hypothesis, saturated fatty acids, especially stearic acid, promoted adipogenic and lipogenic gene expression, whereas unsaturated fatty acids decreased expression of those genes associated with fatty acid metabolism.

Assessment of cryopreserved sperm functions of Korean native brindled cattle (Chikso) from different region research centers of Korea

  • Ma, Lei;Jung, Dae-Jin;Jung, Eun-Ju;Lee, Woo-Jin;Hwang, Ju-Mi;Bae, Jeong-Won;Kim, Dae-Hyun;Yi, Jun Koo;Lee, Sang Moo;Ha, Jae Jung;Kwon, Woo-Sung
    • 한국동물생명공학회지
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    • v.36 no.2
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    • pp.106-115
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    • 2021
  • Sperm cryopreservation is an important method of assisted reproductive techniques and storing genetic resources. It plays a vital role in genetic improvement, livestock industrial preservation of endangered species, and clinical practice. Consequently, the cryopreservation technique is well organized through various studies, especially on Korean native cattle (Hanwoo). However, the cryopreservation technique of Korean native brindled cattle, which is one of the native cattle species in Korea, is not well organized. Therefore, it is necessary to develop a Supplementary Table technique for the cryopreservation of Korean native brindled cattle. For this purpose, it is important to first evaluate the quality of the currently produced cryopreserved sperm of Korean native brindled cattle. In this study, we randomly selected 72 individual Korean native brindled cattle semen samples collected from 8 different region research centers and used them to evaluate sperm functions. We focused on the quality evaluation of cryopreserved Korean native brindled cattle semen following the measurement of motion kinematics, capacitation status, intracellular ATP level, sperm motility, and cell viability. Then, the values of each of the eight groups were derived from various sperm parameters of nine individual samples, including sperm motility, kinematics, cellular motility, and intracellular ATP levels, which were used to compare and evaluate sperm function. Overall, differences in various sperm parameters were observed between most of the research centers. Particularly, the deviations of motility and motion kinematics were high according to the sample. Therefore, we suggest that it is necessary to develop a standard method for the cryopreservation of Korean native brindled cattle semen. We also suggest the need for sperm quality evaluation of the cryopreserved semen of Korean native brindled cattle before using artificial insemination to attain a high fertility rate.

팽이버섯 수확후배지 첨가가 수수 사일리지의 in vitro 반추위 발효특성 및 소화율에 미치는 영향 (Effects of spent mushroom (Flammulina velutipes) substrates on in vitro ruminal fermentation characteristics and digestibility of whole crop sorghum silage)

  • 문여황;장선식;김언태;조웅기;이신자;이성실;조수정
    • 한국버섯학회지
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    • v.13 no.3
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    • pp.163-169
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    • 2015
  • 본 시험은 팽이버섯 수확후배지 첨가비율(20, 40, 60%)에 따라 제조된 사일리지를 in vitro 반추위 발효실험을 통하여 버섯수확후배지의 적정 첨가수준을 규명하고자 수행되었다. In vitro 실험은 발효시간대를 3, 6, 9, 12, 24 및 48시간으로 설정하고, 각 처리구별로 3반복으로 발효 특성과 건물소화율이 측정되었다. In vitro 배양액의 pH는 배양시간이 길어짐에 따라 낮아지는 경향이었으며, 48시간 경과 시에는 버섯수확후배지 20%첨가구가 타 처리구에 비해 유의적(P<0.05)으로 낮았다. 가스발생량은 버섯 수확후배지 20%를 첨가한 S-20구의 6시간 및 12시간 발효구가 타 처리구에 비해 유의적(P<0.05)으로 높게 나타났다. 미생물 성장량은 배양시간이 경과함에 따라 줄어드는 경향이었으며, 발효 24시간대부터는 대체로 비슷한 수준에서 유지되었다. 건물소화율은 20-30%수준으로 버섯수확후배지의 첨가비율이 높을수록 낮았는데, S-40구의 경우는 발효 9시간이후로 지속적으로 증가되어 48시간 발효 시에는 S-20구와 비슷한 수준이 된 반면, S-60구에서는 전 발효기간 동안 건물소화율이 매우 낮은 상태에 있었다. 이전 보고에서 사일리지 발효상태는 S-40구가 좋았으나 in vitro 반추위 소화시험의 결과를 고려할 때, 수수 사일리지 제조 시 팽이버섯수확후배지 첨가비율은 20-30%수준으로 하는 것이 적당할 것으로 판단된다.

고도 및 수송거리별 출하 한우의 도체특성 및 표면육색의 변화 (Changes of Carcass Traits and Surface Meat Color of Korean Cattle (Hanwoo) Reared Different Altitudes or Transferred from Different Distance)

  • 장용설;최장근;이정우;곽돈규;성철완;안준상;박병기;이종인;신종서
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • v.54 no.1
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    • pp.51-58
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    • 2012
  • 본 연구는 고도 차이 혹은 수송 거리의 차이가 한우(거세우 및 암소)의 도체특성, 표면육색 및 혈중 cortisol 농도 변화에 미치는 영향을 검토하기 위해 실시되었다. 공시동물은 총 190두로 이중 거세한우는 118두 암소는 72두였다. 자료는 사육 고도(100, 200, 300, 400 및 500 m) 혹은 수송 거리(50, 100, 150, 200 및 250 km)에 따라 분석하였다. 사육 고도의 차이가 거세한우 및 암소의 육량 및 육질 형질 변화에 미치는 영향은 적었으며, 수송 거리의 차이가 거세한우 및 암소의 육량 형질에 미치는 영향은 없는 것으로 나타났다. 또한 수송 거리의 차이가 거세한우 및 암소의 근내지방도, 육색 및 지방색에 미치는 영향과 사육 고도 혹은 수송 거리의 차이가 거세한우 및 암소 등심의 명도, 적색도, 황색도, 선명도 및 색상색에 미치는 영향은 낮은 것으로 나타났다. 암소의 경우 사육고도 100 m에서 200 m에 비해 등심의 명도가 증가되었으며(p<0.05), 거세한우의 경우 수송 거리 250 km 그리고 암소의 경우에는 200 km에서 등심의 명도가 낮아지는 경향을 보였다. 한편, 혈중 cortisol 농도는 낮은 사육 고도에 비해 높은 사육 고도에서 낮아지는 경향을 보였으나, 통계적인 유의차는 없었다. 수송 거리가 거세한우 및 암소의 cortisol 농도에 미치는 영향은 없었다. 따라서 본 연구의 결과에서 사육 고도 혹은 수송 거리가 한우의 생산성에 미치는 영향은 적은 것으로 판단된다.

Saponin 함유 식물 추출물의 첨가가 반추위 발효성상과 메탄생성에 미치는 영향 (Effects of Saponin Contained Plant Extracts on Ruminal Fermentation Characteristics and Methane Production)

  • 옥지운;백열창;김경훈;이상철;설용주;이강연;최창원;전체옥;이상석;이성실;오영균
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • v.53 no.2
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    • pp.147-154
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    • 2011
  • 본 연구는 saponin 함유 식물 추출물을 이용하여 반추위 발효성상과 메탄생성에 미치는 영향을 알아보고자 실시하였다. 반추위액은 볏짚과 농후사료를 5:5 비율로 급여한 거세한우 2두의(체중: $803{\pm}0.5$ kg) 반추위 cannula를 통하여 채취하였다. 채취한 반추 위액은 buffer와 1:2 (V/V)의 비율로 혼합하여 배양액으로 사용하였으며, 15 ml 배양액에 옥수수 전분 0.2 g를 첨가하고, saponin 함유 식물 추출물 (비누풀, 오가피, 유카, 인삼 및 차나무)을 0.5% 첨가하여 $39^{\circ}C$에서 24시간동안 배양하였다. 반추위 발효성상에 있어서 pH 값은 배양 시간동안 모든 처리구가 대조구에 비해 유의적(p<0.05)으로 낮게 나타났으며, 총 휘발성 지방산의 함량은 배양 12시간부터 모든 처리구에서 유의적 (p<0.05)으로 높았다. Acetate의 농도는 배양 6시간부터 처리구에서 낮았고, propionate의 농도는 높아 역의 관계를 나타내었다. 암모니아의 농도는 최종 발효시간인 24시간에 오가피와 유카추출물 처리구는 대조구와 비슷한 수준이었지만, 다른 처리구는 유의적(p<0.05)으로 낮았다. 반추위 protozoa의 수는 비누풀 추출물 처리구를 제외한 모든 처리구에서 대조구에 비해 유의적(p<0.05)으로 적었다. 총 가스 발생량은 배양 12시간부터 처리구에서 높은 경향이었지만, 메탄 발생량은 오가피와 비누풀 추출물 처리구를 제외한 나머지 처리구에서 낮게 나타났다. 따라서 본 시험 결과를 볼 때 saponin의 첨가에 의해 메탄 발생량이 감소하는 것은 반추위 protozoa의 감소에 의해 나타난 것으로 생각된다.