Park, Da Som;Kim, Soseob;Koo, Deog-Bon;Kang, Man-Jong
Journal of Animal Reproduction and Biotechnology
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v.34
no.3
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pp.148-156
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2019
The Transgenic livestock can be useful for the production of disease-resistant animals, pigs for xenotranplantation, animal bioreactor for therapeutic recombinant proteins and disease model animals. Previously, conventional methods without using artificial nuclease-dependent DNA cleavage system were used to produce such transgenic livestock, but their efficiency is known to be low. In the last decade, the development of artificial nucleases such as zinc-finger necleases (ZFNs), transcription activator-like effector nucleases (TALENs) and clustered regulatory interspaced short palindromic repeat (CRISPR)/Cas has led to more efficient production of knock-out and knock-in transgenic livestock. However, production of knock-in livestock is poor. In mouse, genetically modified mice are produced by coinjecting a pair of knock-in vector, which is a donor DNA, with a artificial nuclease in a pronuclear fertilized egg, but not in livestock. Gene targeting efficiency has been increased with the use of artificial nucleases, but the knock-in efficiency is still low in livestock. In many research now, somatic cell nuclear transfer (SCNT) methods used after selection of cell transfected with artificial nuclease for production of transgenic livestock. In particular, it is necessary to develop a system capable of producing transgenic livestock more efficiently by co-injection of artificial nuclease and knock-in vectors into fertilized eggs.
Pituitary-specific transcription factor (PIT1) 유전자는 동물의 성장을 조절하고 근육 형성에 관여하는 유전자로서 최근에는 단일염기다형성 변이가 한우를 비롯한 동물에서 관찰되었으며, 한우의 경제 형질과 연관성이 보고되었다. 본 연구는 PIT1 유전자의 단일염기다형성 변이가 한우에서 성장 인자에 미치는 영향과 경제 형질에 대한 유전자형간 육종가와의 상관성에 대해 알아보고자 하였다. 도체 성적을 보유하고 있는 한우 후보종모우 집단 268두를 대상으로 PIT1 유전자 A1256G 다형성을 조사하여 유전자형의 빈도를 분석하였고 각각의 유전형에 따른 기본적인 검정 성적을 바탕으로 경제 형질과의 연관성을 비교 분석하였다. 268두의 한우에서 PIT1 유전자의 A1256G 유전자형 빈도는 MseI 제한 효소를 사용했을 때 A 유전자 빈도(0.37)보다 G 유전자 빈도(0.62)가 높게 나타났다. 통계적 분석을 통하여 각 유전자형에 대한 경제 형질과의 관련성을 분석한 결과, 각 유전자형 간에 12개월령 체중 (body weight 12, BW12)에서 유의한 차이를 보였고, 등지방 두께 육종가 (Backfat thickness-estimated breeding value, BF-EBV)와도 유의한 차이가 있었지만 (p<0.05), marbling score (MS), carcass weight (CW), M. longissimus dorsi area (LDA) 등 다른 경제 형질과는 통계학적으로 유의한 차이가 없었다. PIT1 유전자의 A1256G 다형성은 한우의 성장과 도체체중에 관여하는 인자로 작용하는 것으로 보여진다.
Seo, Gi-Beom;Lee, Yong-Seung;Lee, Kyung-Jin;Yu, Han-Jun;Cheong, Hee-Tae;Yang, Boo-Keun;Lee, Seung-Hwan;Lee, Jin-Woo;Park, Choon-Keun
Reproductive and Developmental Biology
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v.35
no.3
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pp.363-367
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2011
The purpose of this study was to improve of frozen-thawed sperm using magnetized water in Korean native cattle. Before cryopreservation, without egg-yolk Triladyl$^{(R)}$ solution was flowed though magnet [0, 2000, 4000 and 6000 Gauss(G)] for S min. The freezing of dilluted semen added with Triladyl containing 20% egg-yolk. Analysis of frozen-thawed sperm was estimated viability with SYBR14/PI double stain, membrane intact with hypoosmotic swelling test (HOST), acrosome reaction with FITC-PNA, mitochondria membrane function with Rhodamin 123 by flow- cytometry. Sperm viability was significantly higher in 4000G group than other groups (p<0.05). However, the Hypoosmotic Swelling Test(HOST) was significantly higher in fresh, 4000 and 6000G than 0 and 2000G (p<0.05). In addition, mitochondria membrane damage and acrosome damage were significantly lower in 6000G group than other groups (p<0.05). in conclusion we suggest that magnetized water could be improve ability of sperm on cryopreservation in Korean native cattle.
Park, Hee-Bok;Han, Sang-Hyun;Yoo, Chae-Kyoung;Lee, Jae-Bong;Cho, Sang-Rae;Cho, In-Cheol
Journal of Embryo Transfer
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v.31
no.4
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pp.313-318
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2016
The aim of this study was to identify quantitative trait loci (QTLs) influencing teat number traits in an $F_2$ intercross between Landrace and Korean native pigs (KNP). Three teat number traits (left;right;and total) were measured in 1105 $F_2$ progeny. All experimental animals were genotyped with 173 informative microsatellite markers located throughout the pig genome. We detect that seven chromosomes harbored QTLs for teat number traits: genome regions on SSC1;3;7;8;10;11;and 13. Six of fourteen identified QTL reached genome-wide significance. In SSC7;we identified a major QTL affecting total teat number that accounted for 5.6 % of the phenotypic variance;which was the highest test statistic (F-ratio = 61.1 under the additive model;nominal $P=1.3{\times}10^{-14}$) observed in this study. In this region;QTL for left and right teat number were also detected with genome-wide significance. With exception of the QTL in SSC10;the allele from KNP in all 6 identified QTLs was associated with decreased phenotypic values. In conclusion;our study identified both previously reported and novel QTL affecting teat number traits. These results can play an important role in determining the genetic structure underlying the variation of teat number in pigs.
To facilitate the widespread application of somatic cell cloning, improvements in blastocyst production efficiency and subsequent fetal viability are required. Area where technical improvements are needed include donor cell treatments, starvation and passage numbers. This study was carried out to investigate the effect of serum-starvation and passage on the development of ear skin fibroblast cells cloned embryos. A skin biopsy was obtained from the ear of a 2-year-old Korean Hanwoo female. The cells were cultured in 10% FBS+DMEM up to 2-3 months(up to 10 passages) and then used. In Experiment 1, the Korean bovine Ear Skin Fibroblast cells (KbESF) were either serum starved (culture in 0.05% FBS+DMEM) or serum fed (10% FBS+DMEM) for 4-7 days Prior to NT In Experiment 2, the KbESF cells used for nuclear transfer in these experiments were from passages 2 to 10. The development of 208 nuclear transfer (NT) embryos reconstructed from either serum starved or serum fed ear skin fibroblast was assessed. NT embryos reconstructed from serum starved and serum fed cells showed the same developmental rate (cleavage 80.16 vs. 85.37%; blastocyst 20.63 vs. 19,51%). The development of 590 nuclear transfer (NT) embryos reconstructed from passage 2 to 10 was assessed. We observed the same developmental rates for embryos derived from later Passages as compared with those embryos from early passages(blastocyst from 16.69 to 27.91%, average 20.17%). There was no significant difference between serum-fed and serum-starved donor cells. We observed no difference in developmental rates for embryos derived from 2 to 10 passages. These data show that prolonged culture and serum starvation does not affects the cloning competence of adult somatic cells.
Background: Very limited information exists on the ruminal degradation kinetics of nutrients in garlic stalk. The present study aimed to survey the annual yield of garlic stalk in Korea and determine its feed-nutritive value for ruminants. Methods: In Experiment 1, garlic stalk was incubated in situ in the rumen of two Hanwoo steers ($360{\pm}15kg$ body weight) and removed after 12, 24, or 48 h to determine the ruminal degradation kinetics of DM and NDF. Rice straw was also included for comparison. In Experiment 2, In Experiment 2, six male Corriedale sheep were randomized to two dietary treatments to determine the apparent digestibility of nutrients in garlic stalk. Diets included a control ration without garlic stalk (60% concentrate mix +40% ryegrass) or a treatment ration (70% control diet +30% garlic stalk). Results: The Korean national yield of garlic stalk (sun-dried basis) in 2016 was estimated to be 31,910 tons, with the southern coastal regions producing the highest quantity. Compared with rice straw, garlic stalk had lower NDF, higher ADF, and greater effective degradabilities of DM and NDF, resulting in a greater TDN value (56.3%), which was higher than that obtained for rice straw (43.7%). Conclusion: These results provide basic information on the ruminal DM and NDF degradation kinetics of garlic stalk, which would be helpful for the efficient utilization of this by-product in ruminant diets
In this study, we have investigated sequence variants in the PRNP gene of 20 individuals belonging to the Korean cattle, and have analyzed and compared genetic features between varieties of other cattle breeds. Of the 73 sequence variants identified in Korean cattle, 27 were identified for the first time in this study, whereas 46 of these polymorphisms had previously been isolated. We discovered a 2.6 kb SNP hot spot region localized on the putative promoter region of the PRNP gene. Furthermore, the copy numbers of the octapeptide repeat (24 bp indel) which is detected on the coding sequence (CDS) of the PRNP exhibited a completely homozygous 6/6 genotype which is dominant in other cattle breeds. We also characterized a new 19 bp/10 bp allele located on the putative promoter region of the PRNP gene, which represented 0.71 in allele frequency. To the best of our knowledge, this report is the first to address polymorphisms of the PRNP gene structure in Korean cattle in which BSE has yet to be discovered. Therefore, our findings may prove useful with regard to our current understanding of allelic diversity in bovine species, and may also provide new insights into the genetic factors associated with susceptibility or resistance to BSE.
Two day-old male and 1 month-old female Hanwoo calves presented to Chonbuk Animal Medical Center in Chonbuk National University. Two calves were stepped by mother cow and had right (2 day-old male) and left (1 month-old female) forelimb lameness. The male calf was diagnosed as right radius-ulnar fracture through physical and radiographic examination. The other female calf was diagnosed as left third and fourth metacarpal bone fracture by the same examinations as male calf. Acrylic frame external fixator was used to reduce the fractures. Arcrylic frame external fixator in two calves lasted for 5~6 weeks. After removing the acrylic frame external fixator, radiographic evaluation and physical examination were performed. Fractured radius-ulnar and metacarpal bones were unionized and the calves were able to stand and bear weight. In these two calves, application of acrylic frame external fixator in calf fracture was effective. Acrylic frame external fixator should be considered for the repair of radius-ulnar and metacarpal bone fracture in calf.
Kim, Hanwoo;Park, Indal;Lee, Sangjun;Shin, Dongyoung;Kim, Jiyeun Kate
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2018.10a
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pp.113-113
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2018
Endophthalmitis is a disease that causes ocular inflammation and has a catastrophic effect on eyesight. Recent studies show that Enterococcus faecalis is rapidly increasing causative bacterium of endophthalmitis. It is predicted that the increased endophthalmitis by E. faecalis is presumable due to the high resistance of E. faecalis to moxifloxacin (MFX), which is a common antibiotic used for eye drop. Because of the need for therapeutic agents to overcome this problem, this study sought to explore the feasibility of developing a combination therapy using Orostachys japonicus. The ethylacetate fraction of O. japonicus (OJA) used in this study. Antimicrobial activity was tested 13 E. faecalis strains including one E. faecalis standard strain, eight clinically isolated E. faecalis strains and four quinolone resistant E. faecalis strains using CLSI antibiotic susceptibility test method. Minimal Inhibitory Concentration (MIC) of OJA was confirmed to be $500{\mu}g/ml$ for all 13 strains. Then we tested for the synergistic effect of OJA to MFX using checkboard test method. The MIC of MFX was $0.25{\mu}g/ml$ for the standard strain and 8 for the clinical isolates, and $16{\sim}64{\mu}g/ml$ for the quinolone - resistant strains. When OJA was mixed with MFX, no synergistic effect was observed in all strains, but the antibacterial activity of OJA remained unchanged. Most ocular other strains can be removed by MFX except the MFX resistant E. faecalis, which can be removed by OJA in combination therapy. Therefore, OJA can be a potential candidate for the combined treatment endophthalmitis.
Journal of the Korean Data and Information Science Society
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v.26
no.3
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pp.581-592
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2015
In the GORRAM, the estimation of resource requirements for wartime equipment is based on the ELCON of the USA. The number of vulnerability groups of ELCON are 22, but unfortunately it is hard to determine how the 22 groups are classified. Thus, in this research we collected 505 types of basic items used in wartime and classified those items into new vulnerability groups using AHP and cluster analysis methods. We selected 11 variables through AHP to classify those items with cluster analysis. Next, we decided the number of vulnerability groups through hierarchical clustering and then we classified 505 types of basic items into the new vulnerability groups through K-means clustering.This paper presents new vulnerability groups of 505 types of basic items fitted to Korean weapon systems. Furthermore, our approach can be applied to a new weapon system which needs to be classified into a vulnerability group. We believe that our approach will provide practitioners in the military with a reliable and rational method for classifying wartime equipment and thus consequentially predict the exact estimation of resource requirements in wartime.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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