To investigate the effect of culture conditions on growth and ginsenosides accumulation, we cultured the ginseng hairy root under three different media, white light or ultra-violet irradiation. The MS/B5 medium containning MS basal salt and B5 vitamin was good for the growth and ginsenoside accumulation. The light during the culture period of ginseng hairy root was irradiated. The growth was abundant in the ginseng hairy root cultured in dark. But the ginsenosides accumulation was higher than in the ginseng hairy root cultured in the light irradiation. When the ginseng hairy root was cultured in 20 L bioreactor, the ginsenosides accumulation was observed at 34% higher than the hairy root cultured in dark. UV irradiated the ginseng hairy root during the culture period. The long time irradiation of UV was caused decreasing the growth of ginseng hairy root, but the accumulation of ginsenosidess was increased as to the irradiated time.
The effects or polyamines on growth, anthocyanin contents and $\beta$-glucan synthetase(GSII) activity in carrot hairy root were studied. Growth of hairy root was stimulated somewhat when each polyamine concentration was treated, especially addition of 1mM spermidine resulted in about 20% increase. On the whole, the axial diameter of hairy root was increased in response to increase in concentration of polyamine. On the other hand, GSII activity was stimulated in response to increase in concentration of polyamine, especially addition of 1mM spermine resulted in about 100% increase of activity. Therefore increased activity of GSII stimulated growth and thickness of hairy root. Anthocyanin contents were not affected by the polyammine.
Hairy root cultures have demonstrated great promise in terms of their biosynthetic capability toward the production of secondary metabolites, but continue to constitute a major challenge with regard to large-scale cultures. In order to assess the possibility of conducting mass production of biomass, and the extraction of useful metabolites from Panax ginseng. P. ginseng hairy roots, transformed by Rhizobium rhizogenes KCTC 2744, were used in bioreactors of different types and sizes. The most effective mass production of hairy roots was achieved in several differently Sized air bubble bioreactors compared to all other bioreactor types. Hairy root growth was enhanced by aeration, and the production increased with increasing aeration rate in a 1 L bioreactor culture. It was determined that the hairy root growth rate could be substantially enhanced by increases in the aeration rate upto 0.5vvm, but at aeration rates above 0.5vvm, only slight promotions in growth rates were observed. In 20 L air bubble bioreactors, with a variety of inoculum sizes, the hairy roots exhibited the most robust growth rates with an inoculum size of 0.1% (w/v), within the range 0.1 to 0.7% (w/v). The specific growth rates of the hairy root decreased with increases in the inoculum size.
인삼모상근의 생장에 영향을 미치는 auxin과 CH의 효과를 규명하기 위하여 auxin류인 IBA, MA, NAA와 아미노산 화합물인 CH를 각각 농도별로 처리하여 MS 고체배지와 액체배지에서 50일간 배양후 수거하여 생중량과 건중량을 측정하여 농도별로 생장률을 측정한 결과, 인삼모상근의 생장에 미치는 auxin의 효과는 고체배양시에는 IBA를 1 mg/L의 농도로 암배양하는 것이 가장 효과적이었으며, NAA 1 mg/L의 농도로 광배양 하는 것도 효과적이었다. 반면에 IAA와 CH는 인삼모상근의 생장에 효과가 없었다. 액체배양시에는 IAA와 NAA를 처리했을 때 농도의 증가에 따른 생장의 증가는 보이지 않고 생장의 감소 없이 거의 일정하게 그 수준이 유지되었으며 IBA와 CH는 모두 인삼모상근의 생장을 오히려 억제하는 경향이었다.
Cultures of hairy root induced from ginseng(Panax C.A. Meyer) transformed with Agrobacterium rhizogenes (strain A4, ATCC 15834) were established and morphologically two different hairy root strains (HB1, HB2) were obtained. To determine the optimum growth rate, the hairy root (HB2) was cultured in various liquid medium supplemented with or without plant growth hormone. The growth rate of hairy root cultured on MS medium was 1.3-3.1 times higher than those cultured on other media, and the optimum sucrose concentration and pH were 3-6%, 5.5-6.5, respectively. Also, the growth rate of hairy root was increased when 0.02 M ammonium nitrate, 1.2 mM potassium phosphate (monobasic) and 0.5 mg/l IBA were supplied to liquid medium. The saponin patterns and contents of hairy root (HB2) were determined by TLC and HPLC. The crude saponin contents were 4.67% and the total saponin contents were 1.0%, on dry weight basis.
Hairy roots induced from stems of Rubia cordifolia var. pratensis were cultured in the liquid medium under a variety of auxins to find the optimal condition for the growth and production of pigments. Culture of the hairy roots on NN liquid medium containing NAA 0.5 mg/l was best for growth of hairy roots. Production of yellow anthraquinone derivatives and purpurin in hairy roots was enhanced by the culture on NN liquid medium without auxins. Effects of L-phenylalanine, L-tyrosine and juglone, synthesized via the shikimic acid pathway, on growth and production of pigments in hairy roots were studied in the present study. Concentration of exogeneous L-phenylalanine. L-tyrosine and juglone in liquid culture system of hairy root containing NAA 0.1 mg/l was decreased quickly in its early stages of the culture period. Addition of juglone to NN liquid medium containing NAA 0.1 mg/l enhanced the productivity of pigments in hairy roots.
The hairy roots of Crotalaria sessiliflora were induced from the tissue segments infected with Agrobacterium rhizogenes ATCC 15834. The induced hairy roots were subjected to paper electrophoresis fro the detection of opine-positive clones which were considered to have been transformed. Mannopine and agropine were presented in hairy root clones while mannopine was presented in two hairy root clones. Eight hairy root clones were selected and cultured in MS, B5 and WP media. Each of hairy root clones was showed a difference in branch pattern and growth rate. The best culture medium and culture conditions of hairy roots were in $\frac{1}{2}$MS(3% sucrose, pH 5.7) liquid medium at 25$^\circ C$, 70 rpm under dark, the growth rate in $\frac{1}{2}$MS liquid medium was increased with 210-fold more than that of inoculated hairy roots and with 2-fold more than that in MS liquid medium. Also, the adequate condition for hairy root growth was such that concentration of KH$_2PO$_4 was 1.25mM and the ratio of NH${_4}{^+}$ : NO${_3}{^-}$ was 1 to 3 in MS medium. The presence of pyrrolizidine alkaloids, monocrotaline, in the hairy roots was detected by TLC.
Hairy roots were induced from Korean ginseng (Panax ginseng C. A. Meyer) root explants and studied for their gene expression. A total of 3,000 ESTs (expressed sequence tags) from ginseng hairy root were determined and about 2,700 ESTs have a length of readable sequence, which result in 1,352 unique ESTs sequences. The 879 ESTs showed significant similarities to known nucleotide or amino acid sequences in other plant species, which were divided into eleven categories depending upon gene function. The remaining 473 sequences showed no significant matches, which are likely to be transcripts or to be matched to other organisms. The results indicated that the analysis of the ginseng hairy root ESTs by partial sequencing of random cDNA clones may be an efficient approach to isolate genes that are functional in ginseng root in a large scale. Our extensive EST analysis of genes expressed in ginseng hairy root not only contributes to the understanding of the dynamics of genome expression patterns in root organ but also adds data to the repertoire of all genomic genes.
Pueraria lobata is a perennial legume plant that produces a variety of isoflavones, such as puerarin, daidzin and daidzein. These are metabolized to equol via dihydrodaidzein and tetrahydrodaidzein by the bacterial fermentation of natural isoflavone sources in the human intestines. In this study, we described the growth and accumulation of isoflavone in the hairy root of the Korean wild arrowroot according to the culture period, as well as dihydrodaidzein biosynthesis in hairy root extracts fermented with Pediococcus pentosaceus. Daily proliferation was best in DY1 cultured for 1 week. DY1 showed significant differences in daily production of puerarin and daidzin+daidzein, as compared to DJ7; furthermore, both were best in DY1 cultured for 1 week. The hairy root extract was fermented successfully with P. pentosaceus with confirmed production of dihydrodaidzein, an equol precursor formed by biotransformation. The results indicated that the growth of hairy roots and isoflavone accumulation in the hairy roots is best 1 week after culture. These results are expected to contribute to the mass production of hairy root and isoflavones as equol precursors from the Korean wild arrowroot and provide a basis for equol production by biotransformation in vitro.
Seo, Weon-Taek;Lee, In-Kyoung;Yoo, Ick-Dong;Park , Young-Hoon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제5권4호
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pp.234-237
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1995
Production of new flavanol derivatives with cytotoxic activity, gericudranin A and B, was studied by using hairy root cultures of Cudrania tricuspidata. Schenk and Hildebrandt (SH) medium was chosen for root growth and gericudranin production. After 35 days culture in a half-strength liquid SH medium containing $30g^{glucose}$/l, hairy root growth reached $138g^{FW}$/I and gericudranin A and B were produced at concentrations of 27mg/l and 21 mg/l, respectively. It was also observed that the contents of gericudranin A and B in hairy root were eight and six times higher than those of cudraniae radix, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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