Hwang, Ok-Jin;Kim, Yu-Jeong;Sung, Nak-Sul;Ahn, Jun-Cheul;Kim, Sik-Eung;Hwang, Baik
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.10
no.4
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pp.243-248
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2002
The effects of basal media, carbon, nitrogen, phosphate and some major macro elements on growth and shikonin production in Lithospermum erythrorhizon hairy root culture were studied. Among examined media, growth of hairy root cultured in B5 liquid medium was rapid, whereas shikonin production was high in MS liquid medium. Under B5 basal medium, sucrose concentration for optimal growth and shikonin production was 9% and 4% respectively. The growth and shikonin production on pH changes in B5 medium resulted little effect in pH 5.8 to pH 8.8 ranges, whereas growth was decreased dramatically in both above 8.8 and under 5.8. Nitrogen source and concentration effected on the growth and shikonin production. The highest growth rate was in B5 medium (50 mM $KNO_3$ and 1 mM $NaH_2PO_4)$, whereas the highest shikonin production was in the condition supplemented with 5 mM $KNO_3$ and 10 mM $NaH_2PO_4$.
The synthesis of betalain in hairy root cultures of Phytolacca esculenta van Houtte required the light, but the growth of hairy roots was inhibited 5 times under light condition(1500 1X) compared to dark condition. To investigate the growth inhibition of hairy roots under light condition, we surveyed the effects of several antioxidants on growth and betalain production if suspension cultures of hairy roots was increased 1.2-1.4 times under dark condition and 1.3-1.9 times under light condition by the treatment of ascorbic acid, glutathione, $\alpha$-tocopherol, sodium pyrosulfate and propylgallic acid. The betalain production was increased 1.2-2.1 times by antioxidants under light condition. The combination treatment of antioxidants didn't have any significant effect on the growth of hairy roots and betalain synthesis. The antioxidants of the betalain production were more effect under blue light than others. It was discussed that the endogenous oxidants may be produced under blue light.
This experiment was carried out to investigate the effect of the mulching of hairy vetch and pig manure on the growth, yield and crude protein contents of the mulching of hairy vetch and application of animal slurry were treated and investigated in $2000{\sim}2002$. At the first year of cultivation, there were no differences among the treatments in plant height, but second year the growth of plants increased and continued over long times as the hairy vetch mulched and fertilized. The length and diameter of plant root were increased in the plot of hairy vetch mulching and the application of animal slurry. At first year of cultivation, no clear difference was found for among the treatments on dry weight and dry matter ratio in roots. At second year of cultivation, they were increased at in the plot of mulching and fertilizer treatment. The appearances of weeds in the field on Astragalus membranaces were much lower on the plots of live-mulching of hairy vetch than those on the control. The yield of root was 255kg highest in the plot of mulching and animal slurry application of 2-year-old roots. The root yield of Astragalus membranaces was increased about $8{\sim}10%$ compared to that with control, due to supply of nutrients. During the cultivation times, organic matters and N contents in soil increased by the mulching of hairy vetch and the application of animal slurry. The concentration of K, Ca concentration in soil showed a tendency to increase.
Codonopsis lanceolata (Campanulaceae) has been used in traditional medicines, as its roots contain several kinds of 3,28-bidesmosidic triterpenoid saponin with high medicinal values. In this study, we induced hairy root-derived transgenic plants of C. lanceolata and analyzed triterpenoid saponins from the leaf, stem and root. Transgenic plants were regenerated from the hairy roots via somatic embryogenesis. The saponins are lancemaside A, B and E, foetidissimoside A, and aster saponin Hb. Transgenic plants contained richer triterpenoids saponin than wild-type plants. Major saponin lancemaside A was the most abundant saponin in the stem from transgenic-plant, $4.76mg{\cdot}1^{-1}dry$ stem. These results suggest that transgenic plants of C. lanceolata could be used as medicinal materials for the production of triterpene saponins.
An efficient protocol for cryopreservation of madder hairy root cultures has been developed using droplet-vitrification. In previous study, combining loading solution C4 (35% PVS3) and vitrification solution B5 (80% PVS3) was the most effective method. In this study, we tried three types of vitrification solution, B5, A3 (90% PVS2, on ice), and A5 (70% PVS2, on ice). Combining loading solution C4 and vitrification solution A5 (on ice) showed the best regeneration rate in this study. Histological changes of the cells within the hairy root of madder were also observed in different steps. The cells from the hairy roots of the control treatment were full and intact with different size of vacuoles and obvious cell nucleus having a dark nucleolus. After the stage of preparing for cryopreservation (after preculturing, loading, followed by dehydration solution A5 or B5), intercellular spaces had become distinct, and within cells, the cytoplasms had become denser and week plasmolyses had appeared. The cell plasmolyses were much more apparent and we measured the degree of plasmolysis by calculating, the area of cell/the area of cytoplasm. The value of plasmolysis degree was the highest in the combination of preculture, loading solution C4, and dehydration solution A5, 1.97. Because the highest regeneration rates appeared in the treatment of A5 for 20 min, we could assume that the optimal degree of plasmolysis for cryopreservation might be around 1.97. The changes in cell structure during cryopreservation might be a useful basis for the development of a proper long-term preservation method for madder germplasms.
An, Jun-Chul;Yang, Sun-Ju;Pyo, Byung-Sik;Choi, Ji-Won;Hwang, Baik
Korean Journal of Plant Tissue Culture
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v.25
no.1
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pp.21-25
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1998
The effects of sucrose concentration and some absorbents on growth and tropane alkaloid production in hairy root cultures of Scopolia parviflora were investigated. The maximum effect on growth and tropane alkaloid production in hairy root clone SP11 was obtained for 1/2 B5 medium containing 5% sucrose. The production pattern of tropane alkaloid in hairy roots was some different from that of rhizome of mother plant, particulary showing high littorine contents, which was not found in ordinary roots. Among absorbents examined, charcoal 0.01% and XAD-II 1% made a slight growth promotion effect, whereas the other concentration of charcoal, XAD-II and absorbents (amberlite and chitosan) showed inhibition or no significant effect. The addition of hydroxyapatite enhanced the production of tropane alkaloids significantly than control cultures.
We have investigated the effect of culture conditions on tropane alkaloids (scopolamine, hyoscyamine) production in hairy root cultures of Hyoscyamus niger L. induced by Agrobacterium tumefaciens $A_4$T. SH medium was the best for tropane alkaloids production from the hairy root clones, HN18 and HN57. The optimum culture peroid was 5 weeks for HN18 clone and 6 weeks for HN57 clone, respectively. The optimum sucrose and dextrose concentrations in tropane alkaloids productivity were 3% and 2%, respectively. The growth of both HN18 and HN57 clones increased with as sucrose concentration increase up to 7% sucrose, but tropane alkaloid contents was significantly decreased. In the HN18 clone, the optimum concentration of sucrose for alkaloids productivity was 5% and those of dextrose was 2%. The productivity of tropane alkaloids for HN57 clone under dextrose treatments was quite a low level compared to sucrose treatments.
Chung, Kyung Ho;Park, Young Goo;Noh, Eui Rae;Chun, Young Woo
Journal of Korean Society of Forest Science
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v.78
no.4
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pp.372-380
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1989
The widely cultivated hybrid poplar Populus alba ${\times}$ P. glandulosa in Korea was transformed with Agrobacterium rhizogenes agropine type strain A4. Genetic transformation was confirmed by the presence of agropine. Alteration in growth rate of hairy roots was seen following changes in the dilution rate of medium and concentration of sucrose, suggesting that improved growth might be achieved by more precise manipulation of the nutrient medium. Plant regeneration occurred from transformed hairy roots on MS medium supplemented with 0.5 mg/l BAP. Transformed plantlets grown in vitro exhibited a more developed root system characterized by fast growth behavior in comparison to normal plantlets. This work demonstrates that the root transformation would be useful in improving plantlet establishment and growth through the effective root system.
In order to investigate the effects of elicitors on the growth and ginsenoside biosynthesis of ginseng hairy roots, we treated Panax ginseng hairy root with various concentrations of Haliotidis concha according to different time course. Haliotidis concha supplement increased the biomass and ginsenoside accumulation at 10 mg/L concentration. The growth rate of hairy root under a lighter concentration was greater than hairy root treated with a denser concentration. The highest content and productivity of ginsenosides appeared at 2 weeks after the treatment of 10 mg/L Haliotidis concha. The gene expression of squalene synthase, squalene epoxidase, dammarenediol synthase, cycloartenol synthase, $\beta$-amyrin synthase in hairy roots of ginseng were examined by RT-PCR. The Haliotidis concha treatment resulted in the obvious accumulation of the mRNA of triterpene biosynthesis in Panax ginseng hairy root as compared with the control. In this study, Haliotidis concha acts as a kind of elicitor for the production of ginsenosides.
The hairy root culture of Raphanus sativus cv. Chungpihongsim was established by transformation with Agrobacterium rhizogenes $A_4$. The transformed roots grew well in adjusted Murashige and Skoog medium to 1/2 basal salts, pH 5.2, 3% sucrose. Agropine and mannopine, opine synthesized in the transformed tissue were detected in the extract of hairy roots. When 2, 4-D and kinetin were added in culture medium of hairy roots, the synthesis of anthocyanin was induced with disorganization of hairy root. Especially, addition of $0.45\;\mu\textrm{M}$ 2, 4-D and $2.3\;\mu\textrm{M}$ kinetin showed the maximum synthesis of anthocyanin. Pattern of anthocyanin synthesized in transformed roots was somewhat different from that of ordinary roots. However, aglycone part of all anthocyanin was identified as pelargonidin. The content of total anthocyanin in this sample was tentatively calculated 0.49 mg/g fresh weight.weight.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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