This study was attempted to screen the cytotoxic activity of petroleum ether ex- tract from panax ginseng root against human colon cancer cells. Two extracts of panax ginseng root, crude and partially purified, were used for this experiment. The crude extract was prepared by extraction with petroleum ether using Soxhlet aparatus for 12 to 15 hours from panax ginseng and the extract was partially purified by silicic acid column with mixture of petroleum ether: ethyl ether (70 : 30, v/v). Three species of human colon cancer cells, HRT-18, HCT-48 and HT-29, were maintained in DMEM (Dulbecco's modified Eagle medium), and the cells were cultured in DMEM containing serial concentration of the crude or partially purified fraction to observe the cytotoxic activity of the both extracts. The effects of incubation time and concentration of the both extracts in culture medium against the growth of the each cancer cell were determined. The results obtained are summarized as follows: 1. The doubling times of the HRT-18, HCT-48 and HT-29 cells were about 20, 24 and 22 hours, respectively. 2, The inhibitory effects of the crude extract on the growth of cancer cells were increased according to the rise of concentration of the extract and incubation time. 3. The inhibitory effect of partially purified fraction on the growth of HRT-18 cell was about 4 times stronger than that of the crude extract under same experimental condition. 4 The inhibitory effects of the crude and purified fraction on the growth of each cancer cell were shown difference by the kind of the cancer cell. In view of the above results, it could be said that the petroleum ether extract of panax ginseng root inhibited the division of the human colon cancer cell, in vitro.
Kim, Eui Joo;Kwon, Kwang An;Lee, Young Eun;Kim, Ju Hyun;Kim, Se-Hee;Kim, Jung Ho
Journal of Ginseng Research
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v.42
no.3
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pp.288-297
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2018
Background: The incidence of colorectal cancer (CRC) is increasing, with metastasis of newly diagnosed CRC reported in a large proportion of patients. However, the effect of Korean Red Ginseng extracts (KRGE) on epithelial to mesenchymal transition (EMT) in CRC is unknown. Therefore, we examined the mechanisms by which KRGE regulates EMT of CRC in hypoxic conditions. Methods: Human CRC cell lines HT29 and HCT116 were incubated under hypoxic (1% oxygen) and normoxic (21% oxygen) conditions. Western blot analysis and real-time PCR were used to evaluate the expression of EMT markers in the presence of KRGE. Furthermore, we performed scratched wound healing, transwell migration, and invasion assays to monitor whether KRGE affects migratory and invasive abilities of CRC cells under hypoxic conditions. Results: KRGE-treated HT29 and HCT116 cells displayed attenuated vascular endothelial growth factor (VEGF) mRNA levels and hypoxia-inducible $factor-1{\alpha}$ ($HIF-1{\alpha}$) protein expression under hypoxic conditions. KRGE repressed Snail, Slug, and Twist mRNA expression and integrin ${\alpha}V{\beta}6$ protein levels. Furthermore, hypoxia-repressed E-cadherin was restored in KRGE-treated cells; KRGE blocked the invasion and migration of colon cancer cells by repressing $NF-{\kappa}B$ and ERK1/2 pathways in hypoxia. Conclusions: KRGE inhibits hypoxia-induced EMT by repressing $NF-{\kappa}B$ and ERK1/2 pathways in colon cancer cells.
Kim, Kyungeun;Cho, Hyunnho;Jung, Hana;Lee, Hee Jae;Hwang, Keum Taek
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.49
no.3
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pp.242-251
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2017
The purpose of this study was to investigate the anti-proliferative effect of methanolic extracts from Citrus junos (yuja) seeds and yuja seed oils against HT-29 human colon cancer cells and to identify the key compounds responsible for this effect. Extracts from yuja seeds, yuja seed oil prepared using hexane, and cold-pressed yuja seed oil were prepared using 60% methanol (ES, EHO, and ECO, respectively). The key compounds in the extracts were determined using HPLC-MS. Among the extracts, EHO and ECO inhibited proliferation of HT-29 cells. EHO and ECO were fractionated using preparative LC and the bioactive compounds were determined. Five of the fractions showed a significant anti-proliferative effect and the main compounds in the fractions were isopimpinellin, bergapten, and ichangensin. These compounds showed anti-proliferative effects on HT-29 cells when treated individually, and ichangensin showed the highest anti-proliferative activity. These results suggest that these compounds may be responsible for the anti-cancer effect of EHO and ECO.
The effect of chitosan oligosaccharide (COS, 1 kDa${\gamma}$, 10 ng/ml IL-$1{\alpha}$, and 25 ng/ml TNF-${\alpha}$) in HT-29 cells. Inducible nitric oxide synthase (iNOS) expression induced by these cytokines was inhibited by COS. COS pretreatment inhibited the invasiveness of cytokines-treated HT-29 cells through Matrigel-coated membrane in a dose-dependent manner. COS also inhibited cytokines-induced matrix metalloproteinase (MMP)-2 activity. This study shows that proinflammatory cytokines induce NO production, iNOS expression, and invasiveness of human colorectal adenocarcinoma HT-29 cells. COS pretreatment inhibited cytokines-mediated NO production, iNOS expression, and invasiveness of HT-29 cells. These results provide sufficient information for the further development of COS as an antitumor metastatic agent for the treatment of colon cancer.
In the present study, we have tested the effect of dioleoyl phosphatidic acid (PA) on intracellular $Ca_{2+}$ concentration ($[Ca^{2+}]_{i}$) in two human colon cancer cell lines (HCT116 and HT29). PA and lysophosphatidic acid (LPA), a bioactive lysolipid, increased $[Ca^{2+}]_{i}$ in both HCT116 and HT29 cell lines. Increases of $[Ca^{2+}]_{i}$ by PA and LPA were more robust in HCT116 cells than in HT29 cells. A specific inhibitor of phospholipase C (U73122), however, was not inhibitory to the cell responses. Pertussis toxin, a specific inhibitor of $G_{i/o}$ type G proteins, however, had an inhibitory effect on the responses except for an LPA-induced one in HT29 cells. Ruthenium red, an inhibitor of the ryanodine receptor, was not inhibitory on the responses, however, 2-APB, a specific inhibitor of inositol 1,4,5-trisphosphate receptor, completely inhibited both lipid-induced $Ca^{2+}$ increases in both cell types. Furthermore, by using Ki16425 and VPC32183, two structurally dissimilar specific antagonists for $LPA_{1}/LPA_{3}$ receptors, an involvement of endogenous LPA receptors in the $Ca^{2+}$ responses was observed. Ki16425 completely inhibited the responses but the susceptibility to VPC32183 was different to PA and LPA in the two cell types. Expression levels of five LPA receptors in the HCT116 and HT29 cells were also assessed. Our data support the notion that PA could increase $[Ca^{2+}]_{i}$ in human colon cancer cells, probably via endogenous LPA receptors, G proteins and $IP_{3}$ receptors, thereby suggesting a role of PA as an intercellular lipid mediator.
Kim, Eun-Ji;Lee, Yong-Jin;Shim, Hyun-Kyung;YoonPark, Jung-Han
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.35
no.5
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pp.516-523
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2006
The mushroom Inonotus obliquue (IO) has been traditionally used for the treatment of gastrointestinal cancer in Russia, Poland, and most of Baltic countries. To explore the possibility that IO has chemoprevention effects, we examined whether or not the aqueous extract of IO inhibits HT-29 cell growth and investigated tile mechanism for this effect. Cells were incubated in the presence of increasing concentrations of the aqueous extract of IO. The extract substantially inhibited the viable HT-29 cell number in a dose-dependent manner and inhibited 5-bromo-2'-deoxyuridine incorporation into DNA of HT-29 cells. Annexin-V staining followed by flow cytometry revealed that the extract induced apoptosis of HT-29 cells in a dose-dependent manner. Western blot analysis of total cell lysates revealed that the extract induced cleavage of caspase-8, -9 and -3 and poly (ADP-ribose) polymerase, but did not affect the protein levels of Bax and Bcl-2. In addition, the extract dose-dependently increased the activity of caspase-8, -9 and -3. We have demonstrated that the aqueous extract of IO inhibits cell proliferation and induces apoptosis in HT-29 cells, which may be mediated by its ability to activate the caspase pathway.
The study was carried out to evaluate the antimutagenic and anticancer effects of small water dropwort. The methanol extracts from small water dropwort significantly reduced the mutagenicity induced by aflatoxin $B_1\;(AFB_1)$ and N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG) in Salmonella typhimutium TA 100. Also, the methanol extracts inhibited the growth of AZ-521 human gastric cancer cells and HT-29 colon cancer cells. The chloroform fraction from methanol extracts of small water dropwort inhibited $40\;to\;80\%$ of the mutagenicity by $AFB_1$ in Sal. typhimurium TA 100 by the addition of 2.5 to $10\%$. To separate active compounds, the chloroform fraction was subjected to column chromatography on a silica gel and separated into five fractions. Among the five fractions, fraction 4 showed the highest antimutagenic effect against $AFB_1$ and an anticancer effect in the HT-29 colon cancer cell. As the result of the analysis in GC-MS, 1-napthalene carbonitrile, 5,6,7,8-tetrahydrol and benzene, 1,1'-(1,4-pentadiene-1,5-diyl) bis-,(E,E) were identified potentially from fraction 4.
Young radishes (YR, yeolmu in Korean) were cultivated in soil with and without sulfur. Control YR-kimchi and sulfur YR-kimchi were prepared using the young radishes cultivated in the soil without and with 1,818 $g/m^3$ sulfur, respectively. Fermentation of the YR-kimchis were conducted at $5^{\circ}C$ for 6 weeks. The control and sulfur YR-kimchis were reached pH 4.39 and pH 4.31 with 0.98% and 1.04% acidity at 5 weeks, respectively. At a higher concentration of 20 ${\mu}L/assay$, the sulfur YR-kimchi juice exhibited higher inhibitory effects (84%) on the growth of HT-29 human colon cancer cells than the control YR-kimchi (57%). Methanol extract from the YR-kimchis also led to similar results to those of the juices. In the inhibition study by hematocytometer, YR-kimchis inhibited the growth of cells in a time-dependent manner. Sulfur YR-kimchi induced apoptosis as determined by 4,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) staining and decreased Bcl-2 expression of active anticancer compounds, when compared to the control YR-kimchi. These results suggested that preparing kimchi using YR cultivated in the presence of sulfur, which can help to synthesize active compounds, could increase the anti-cancer activity of sulfur YR-kimchi.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.30
no.2
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pp.372-376
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2001
The effect of garlic extract and vitamin C mixture on the various cancer cell lines in vitro and in vivo have been examined. Proliferation of human colon cancer (HT-29), human rectal cancer (HRT-18) and human hepatoma (HepG2) cells was inhibited by garlic extract and vitamin C, respectively. Based on the cytotoxic activity, mixture of garlic extract and vitamin C was demonstrated to possess a synergistic growth inhibition on HT-29, HRT-18 and HepG2 cancer cells. Mixture of garlic extract and vitamin C significantly arrested G2/M phase cells in the HepG2 cell cycle. Oral administration of mixture of garlic extract and vitamin C to sarcoma-180 tumor-bearing mice prolonged survival time compared to that of control group. These results suggested that addition of vitamin C enhances anticancer activity of garlic extract in vitro, and mixture of garlic extract and vitamin C has antitumor effect in vivo.
We studied the effects of hot water extract of Inonotus obliquos mushroom on the proliferation and apoptosis of the human colon adenocarcinoma, HT-29 and the human stomach adenocarcinoma, SNU-484 cell. Cells were maintained with Dulbecco's modified Eagle medium/Ham's F-12 nutrient mixture supplemented with 10% fetal bovine serum at 37$^{\circ}C$ in a humidified $CO_2$. For the cell proliferation experiments, cells were seeded in 35 mm dishes, and were treated with the various concentrations of the extract for the different time course. Apoptosis was measured by caspase-3 activity. When we incubated HT-29 cells for 24, 48, 72, and 96 hours after treatments, the cell proliferation was more suppressed with more treatment time. In case of the human stomach cancer cell, SNU484, the extract significantly decreased the cell number. Thus, the treatment of 1.5 mg/$m\ell$ extract decreased almost half of the cell number. Caspase-3 activity in HT-29 was increased by the treatment of mushroom extracts. In SNU484, caspase-3 activity tended to increase in proportion to the amounts of the extracts and the treatment of Inonotus obliquos affected the activity a lot. Therefore, Inonotus obliquos is suggested for the prevention of gastro-intestinal cancer and strongly recommended for the treatment of stomach cancer. (Korean J Nutrition 36(1) : 18~23, 2003)
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