Three known ${\alpha}$-amyrin triterpenoids, ursolic acid (1), $2{\alpha},3{\alpha}$-dihydro xyurs-12-ene-28-oic acid (2) and euscaphic acid (3), and ${\beta}$-amyrin triterpenoid, $3{\beta}$-hydroxyolean-5,12-diene (4), and ${\alpha}$-spinasterol (5) have been isolated from the fractionated n-butanol extracts of the spikes of Prunella vulgaris var. lilacina, guided by DNA topoisomerases I and II inhibitory activities and cytotoxic activity against human cancer cells. Their structures were elucidated on the basis of spectroscopic and chemical methods. Compound 4 exhibited significant cytotoxic activity against human colon adenoblastoma (HT-29), and 5 showed DNA topoisomerase I and II inhibitions.
죽염된장의 발효기간(3년, 6년)과 죽염의 구운 횟수($3{\times}$, $9{\times}$)에 따른 항산화 및 HT-29 암세포에서 in vitro 항암 효과를 측정하였다. 죽염된장의 발효 기간에 따른 pH 및 아미노태 질소, 암모니아태 질소 함량은 3B-S($3{\times}$, 삶은 콩)를 제외하고는 큰 차이가 없는 것으로 나타났다. 총 폴리페놀 함량은 6Y9B-D(6년, $9{\times}$)가 유의적으로 가장 함량이 높았다(P<0.05). DPPH free radical 소거 효과에서는 6Y3B-D(6년, $3{\times}$)는 $34.1{\pm}0.4%$, 6Y9B-D는 $38.2{\pm}2.5%$, hydroxyl radical 소거 효과 역시 6Y3B-D는 $80.8{\pm}0.9%$, 6Y9B-D는 $86.2{\pm}2.0%$로 높은 소거 효과를 나타내었다. HT-29 인체 대장암세포를 이용한 암세포 성장 억제 효과 역시 6Y3B-D는 $65.9{\pm}2.4%$, 6Y9B-D는 $72.8{\pm}1.7%$로 가장 높은 성장 억제율을 나타내었다. TNF-${\alpha}$, IL-6과 iNOS, COX-2 염증 유발 인자에서 6Y9B-D군이 유의적인 차이를 보이며 mRNA의 발현을 가장 많이 억제하는 것으로 나타났다. 장기간 숙성된 6년 죽염된장이 3년 죽염된장보다 항산화, 항암 효과가 뛰어났고, 3회 죽염보다 9회 죽염을 첨가한 된장이 천일염과 정제염을 혼합해 제조한 시판된장보다 항산화, 항암 효과가 더 우수했다.
Kim, Hyo-Jin;Chang, Eun-Ju;Bae, Song-Ja;Shim, Sun-Mi;Park, Heui-Dong;Rhee, Chang-Ho;Park, Jun-Hong;Choi, Sang-Won
Archives of Pharmacal Research
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제25권3호
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pp.293-299
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2002
Cytotoxic and antimutagenic effects of a novel cis-$\varepsilon$-viniferin and five known stilbenes, transresveratrol, trans-$\varepsilon$-viniferin, gnetin H, suffruticosols A and B, isolated from the seeds of Paeonia lactiflora Pall. (Paeoniaceae) were determined against five different cancer cell lines, and mutagenicity of N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) in Salmonella typhimurium TA100, respectively. Six stilbenes showed cytotoxic activity in a dose-dependent manner, and especially did potent cytotoxic activity against C6 (mouse glioma) cancer cell with $IC_{50}$ values ranging from 8.2 to $20.5{\;}{\mu\textrm{g}}/ml$. trans-Resveratrol showed significant cytotoxic activity against HepG2 (liver hepatoma) and HT-29 (colon) human cancer cell lines with $IC_{50}$ values of 11.8 and 25.2 g/ml, respectively. In contrast, trans-$\varepsilon$-viniferin and cis--viniferin, and gnetin H exhibited marked cytotoxic activity against Hela (cervicse) and MCF-7 (breast) human cancer cell lines with $IC_{50}$ values of 20.4, 21.5, and $12.9{\;}{\mu\textrm{g}}/ml$, respectively. However, suffruticosol A and B had less cytotoxic effect against all cancer cells except C6. Meanwhile, six stilbenes exerted antimutagenic activity in a dose-dependent fashion. Of them, trans-resveratrol exhibited the strongest antimutagenic effect against MNNG with $IC_{50}$ value of $27.0{\;}{\mu\textrm{g}}/plate$, while other five resveratrol oligomers also did moderate antimutagenic activity with $IC_{50}$ values ranging from 31.7 to $35.2{\;}{\mu\textrm{g}}/plate$.
Raw meat of mackerel (Scomber japonicus) was salted by refined, sun-dried, bamboo, and KC1-added bamboo salts. Antimutagenic activity on N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) in Ames test and growth inhibitory effects of AGS human gastric and HT-29 human colon adenocarcinoma cells were investigated using methanol extracts of the salted mackerels. Mackerel salted sun-dried, bamboo, and KC1-added bamboo salts used increased the antimutagenic activities against MNNG, however, the sample treated with refined salt reduced the antimutagenic activity. Inhibitory effects of the salted-mackerels on the growth of human cancer cells were increased as dose dependent pattern. Mackerel salted with refined salt activated the growth of AGS human gastric adenocarcinoma cells, but mackerel salted with sun-dried, bamboo, and KC1-added bamboo salts kept or increased anticancer effect compared to the raw mackerel. Mackerel salted with KC1-added bamboo salt led to the highest antimutagenic and anticancer activities. These results suggest that antimutagenic and anticancer effects of mackerel during manufacturing of the salted-mackerel could be enhanced by using different kind of salts such as bamboo, or KC1-added bamboo salts.
Background: Ginseng is a commonly used herbal medicine in treating various medical conditions. Chronic gut inflammation is a recognized factor for the development of colorectal cancer (CRC). In this project, Asian ginseng berry polysaccharide preparations were used to assess their effects on CRC and related immune regulation mechanisms. Methods: Ginseng berry polysaccharide extract (GBPE) and purified ginseng berry polysaccharide portion (GBPP) were used to evaluate their activities on human HCT-116 and HT-29 CRC cell proliferation. Interleukin-8 secretion analysis was performed on HT-29 cells. Naive CD4 cell isolation and T-helper cell differentiation were performed and determined using flow cytometry for Th1 and Treg in addition to cell cycle and apoptotic investigation. Results: GBPE and GBPP significantly inhibited interleukin-8 secretion and cancer cell proliferation, inhibited CD4+IFN-γ+ cell (Th1) differentiation, and decreased CD4+FoxP3+ cell (Treg) differentiation. Compared to the GBPE, GBPP showed more potent antiinflammatory activities on the malignant cells. This is consistent with the observation that GBPP can also inhibit Th1-cell differentiation better, suggesting that it has an important role in antiinflammation, whereas Treg cells hinder the body's immune response against malignancies. Supported by cell cycle and apoptosis data, GBPE and GBPP, at various degrees, remarkably enhanced the anticancer activities of 5-fluorouracil. Conclusion: Data from this project suggested that Asian ginseng berry potentially has clinical utility in managing enteric inflammation and suppressing CRC through immunomodulation mechanisms.
본 연구는 참치의 석유 에텔 추출물로 부터 항암 효과가 있는 활성 성분을 분리 정제하고, 흰생쥐의 임파모 세포인 LI210 과 P388, 인체 장암세포인 HCT-48, HT-29 및 HRT-18를 대상으로 단계별로 얻어지는 성분의 항암 활성올 측정하고, 그 물질의 생체내에서의 작용 기전을 밝히기 위해 여러가지 면역학적 실험을 수행하였다. In vitro배양액에서의 인체 결장암세포인 H HCT-48에 대해, crude extract는 배양액 1ml강 $60\mu\textrm{g}$ 첨가시 증식이 2배로 억제되었으며(1 unit), 이를 column chromatography 수행하여 얻은 fraction D의 1 unit은 $2 22\mu\textrm{g}$이며, 다시 TLC를 하여 얻은 Spot I 의 1 unit은 $9\mu\textrm{g}$으로서 정제 했을때 277배 증가하였다. Spot I 은 GC/ M5에 의해 7가지 성분이 섞여있는 혼합물로서 이 중 4가지 생분은 $C_{14:0},\;C_{16:0},\;C_{17:1},\;및\;C_{18:0}$인 지방산으로 확인이 되었으며, 나머지 3가지는 지방 성분으로 분자식은 확인되지 않았다. 다른 인체 장암 세포인 HT-29과 HRT-18에 대한 crude extract의 1 unit은 $64\mu\textrm{g}\;및\;54\mu\textrm{g}$이었으며 frattion D의 1 unit에 해당하는 양은 두 세포 모두 약 $34\mu\textrm{g}$이었다. 또한, 생쥐의 백혈병 성 임파모 세포인 L1210과 P388의 경우 crude extract의 1 unit에 해당하는 양은 $2-2.5\mu\textrm{g}$이며, fraction D의 경우는 $1.2-1.4\mu\textrm{g}$으로서 참치 추출물의 세포 종식 억제력은 백혈병성 임파모세포에서 인체 장암세포보다 높았으며, 암세포의 종류에 따라 효과의 차이가 있었다. 참치 추출물(fraction D)을 첨가한 배양액에서 배양한 HCT-48 세포획 크기 분포도는 배양시간이 경과함에 따라 세포의 크기가 작아지며, 현미경 사진에서 보면 본래의 형태가 위축되거나, 세포의 주위가 흐트러지면서 사면 현상을 보였다. 참치 석유 에텔 추출물에는 DHA가 18.8%를 차지 하며 EPA는, 3.25% 포함되어 있었다. 대조군 생쥐에 비해 S-180을 접종한 후 참지 추출물을 투여한 생쥐에서 용혈반 형성 세포수와 혈청 단백질 중 immunoglobulin의 relative %가 현저히 증가되었다. 그러나 비장의 자연 살해 세포의 활성에는 변화를주지 않았다. 이상의 결과로 보아, 참치의 석유 에델 추출물중에 in vitro에서 인체 장암세포 및 백혈병성 임파모세포의 증식 억제 및 생체내에서 면역 증강 효과를 나타내는 성분이 존재함을 알 수 있다.
BACKGROUND/OBJECTIVES: In Asia, various medicinal plants have been used as the primary sources in the health care regimen for thousands of years. In recent decades, various studies have investigated the biological activity and potential medicinal value of the medicinal plants. In this study, 100 methanol extracts from 98 plant species were evaluated for their biological activities. MATERIALS/METHODS: The research properties, including 1,1-diphenyl-2-pic-rylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity, ${\alpha}$-glucosidase and ${\alpha}$-tyrosinase inhibitory effects, anti-inflammatory activity, and anticancer activity were evaluated for the selected extracts. RESULTS: Fifteen of the extracts scavenged more than 90% of the DPPH radical. Among the extracts, approximately 20 extracts showed a strong inhibitory effect on ${\alpha}$-glucosidase, while most had no effect on ${\alpha}$-tyrosinase. In addition, 52% of the extracts showed low toxicity to normal cells, and parts of the extracts exhibited high anti-inflammatory and anticancer activities on the murine macrophage cell (RAW 264.7) and human colon cancer cell (HT-29) lines, respectively. CONCLUSIONS: Our findings may contribute to further nutrition and pharmacological studies. Detailed investigations of the outstanding samples are currently underway.
인삼의 항암효과의 분자적 기전을 규명하기 위하여 인삼의 성분 중 강력한 항암효과를 가지는 것으로 보고된 polyacetylene 계 성분이 Ras 단백질의 post-translational modification에 관여하는 효소인 farnesyl protein trasnferase(FPTase)와 carboxyl methyl transferase(CMTase)의 활성에 미치는 영향을 확인하였고, 인삼의 지용성 성분(PEE)이 세포주기에 미치는 영향을 확인하였다. 소의 뇌로부터 FPTase와 CMTase를 부분정제하여 인삼의 polyacetylene계 성분이 두 효소의 활성에 미치는 영향을 확인한 결과, FPTase는 10mM panaxynol과 10mM panaxydol에 의해서 효소활성이 각각 16.2%와 21.3% 저해받았고, CMTase 효소활성은 polyacetylene계 성분인 panaxynol과 pnanxydol에 의해서 활성을 저해받지 않는 것으로 나타났다. 인체 결장 암세포인 HT-29와 인체 간암세포인 HepG2의 배양액에 인삼의 PEE 성분의 첨가배양시 세포크기가 상당히 위축되며 사멸되었음을 볼 수 있었고, 세포주기 분석 결과 인삼의 PEE 성분의 첨가배양시 G1 단계 세포가 증가하고, S단계세포가 감소하여 세포주기의 진행이 G1-S 단계에서 현저히 억제됨을 나타내었다. 이상의 결과로 보아 인삼의 지용성 성분에 의한 항암효과는 Ras의 post-translational modification 에 관여하는 효소의 활성저해에 기인하기보다는 세포주기의 진행 과정에서 세포주기 조절인자들의 발현변화 및 세포주기의 진행에 관여하는 단백질의 활성억제와 관련이 있을 것으로 사료된다.
Machaerium cuspidatum은 Fabaceae과 legume속에 속하는 캐노피 덩굴식물(canopy liana)로, 열대 우림 지역에 분포하는 식물이다. 본 연구에서는 Machaerium cuspidatum 메탄올 추출물(MEMC)의 항산화능을 확인하고, 항암 활성 및 그 기전을 인체 폐암세포 A549, 인체간암세포 HepG2를 사용하여 분석하였다. 먼저 DPPH를 이용하여 MEMC의 radical 소거능을 분석한 결과, 소거능 50%의 MEMC 농도($IC_{50}$)는 $1.66{\mu}g/ml$l이었으며, MEMC가 추출물인 것을 감안할 때 효과적인 항산화능을 보유하고 있음을 알 수 있었다. 또한 MEMC는 A549, HepG2 및 HT29에 대해 농도의존적으로 세포 사멸 효과를 보였으며, 세포 형태 변화를 유도하였다. A549와 HepG2를 사용하여 세포주기를 분석한 결과, MEMC 처리 농도가 증가할수록 apoptotic 세포를 의미하는 subG1기의 세포가 증가하였다. 따라서 MEMC에 의한 A549 및 HepG2의 apoptosis 유도를 Annexin V/7AAD 염색으로 확인한 결과, A549 및 HepG2에서 MEMC 농도의존적으로 Annexin V 양성 세포의 비율이 증가하였으며, DAPI 염색결과 MEMC 농도의존적으로 A549와 HepG2의 apoptotic body가 증가하였다. 특히 MEMC에 의한 apoptosis는 p53과 Bax의 발현증가 및 Bcl-2의 발현감소와 연관되어 있으며, caspase-3, -8, -9의 활성화와 poly ADP ribose polymerase (PARP)의 단편화를 일으키는 것을 확인하였다. 이러한 결과들로부터 MEMC는 외인성 및 내인성 경로를 통한 apoptosis 유도에 의해 A549와 HepG2의 증식을 억제시키는 것으로 사료된다.
전통 재래식 메주 3종을 수집하여 호기성 생균수, 유산균수, 효모 및 곰팡이의 수를 측정한 결과 각각 $10^7\sim10^8$ CFU/ g, $10^6\sim10^8$ CFU/g, $10^7\sim10^8$ CFU/g의 분포를 나타내었고, 일반적으로 메주의 발효에 가장 크게 관여하고 있는 효모 및 곰팡이이 외에도 유산균 역시 메주의 발효에 깊이 관여하고 있는 주요 균주인 것으로 나타났다. 재래식 메주로부터 몇 종의 유산균을 분리한 후, 3종의 우수균주를 선별하여 동정을 실시한 결과, Leuconostoc mesenteroides, Lactobacillus plantarum, Lactococcus lactis로 밝혀졌으며, 이들을 각각 Lm-SMm, Lp-SMm, Ll-GAm로 명명하였다. 3종 유산균의 효소 활성을 측정한 결과, 모두 protease, lipase, $\alpha$-amylase 활성을 나타내었고 특히 Ll-GAm이 상대적으로 높은 효소 활성을 나타내었다. DPPH를 이용하여 항산화 효과를 측정한 결과, Lm-SMm, Lp-SMm, Ll-GAm은 각각 45%, 48%, 60%의 free radical 소거 효과를 나타내었고, MTT assay를 이용하여 HT-29 인체 결장암 세포 성장억제 효과를 측정한 결과 각각 45%, 67%, 70%의 성장억제 효과를 나타내었다. 따라서 전통메주로부터 분리한 우수한 유산균은 장류제조 산업에 있어서 적용성이 있을 것으로 생각되어지며, 메주 제조에 있어서 스타터로 사용되었을 때 장류제품의 품질을 향상시킬 수 있을 것으로 기대된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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