We have synthesized 4-isonitroso-4H-1-benzopyran and 4-amino-2,3-dihydro -4H-1-benzopyran of chromone derivatives by using condensation method. Physico-chemical properties of these compounds were measured and analyzed by UV and HPLC method. The correlation coefficient of their methanol solutions by UV were 0.9992 and 0.9994, respectively. And oxime compound was resolved within 4 min and had a detection limit of 3 ng at S/N=3 by HPLC using a reversed phase column with three solvents(MeOH, $H_2O$, HAc). The amino compound was resolved within 4.5 min and had a detection limit of 10 ng at S/N=3 by HPLC under the same conditions. Anti-diabetic effect of chromone derivatives were investigated in the streptozotocin (STZ)-induced diabetic rats. Diabetes was induced in male Sprague-Dawley rats by injections of STZ (45 mg/kg, i.v). The investigation of the hair growth effect of isonitrosobenzopyran and 4-aminobenzopyran on the hair of black mouse (C57BL/6) was also carried out. The administraion of their ethanol solution to the black mouse (C57BU/6) through skin them promoted the growth of hair.
삼지구엽초에 함유되어 있는 icariin 함량을 신속하게 추정하기 위하여 NIRS(근적외선 분광분석기)를 이용한 분석 방법을 검토하였다. HPLC를 이용하여 분석된 삼지구엽초 유전자원 150계통에 대한 이카린 함량치를 NIRS 스펙트럼에 적용시켜 42개의 calibration set 와 26개의 valilion set를 구분하였다. NIRS의 검량식을 몇가지 방법에 의하여 비교분석한 결과 2차미분된 스텍트럼을 MPLS(Modified Partial Least Squares)를 이용한 회귀식에 이용하는 것이 가장 적합하였다. HPLC를 이용한 유전자원들의 이카린 함량은 평균 $0.424%(0.12{\sim}0.67%)$이었으며, NIRS에서 도출된 검량식과의 상관계수는 0.951을 나타내었다. 따라서 삼지구엽초의 이카린 함량은 NIRS를 이용하여 신속 편리하게 분석할 수 있음이 인정되었다.
식품안전에 대한 관심이 증가되고 있는 현재, 생물학적 화학적 위해요소로 분류되고 있고, 현재 많은 나라에서 규제치를 설정하고 있는 곰팡이 독소인 ochratoxin A(OTA)에 대한 정량적 측정이 가능한 고속검색법을 개발 하고자 단클론성 항체를 이용하여, 측정시 분리과정이 필요 없는 형광편광면역분석법(FPIA)을 개발하고 최적화 시켰다. 동일구조를 가지는 형광물질 표식자인 OTA-EDF를 합성하여 OTA에 대한 특이항체와 경쟁반응을 시켜 나타나는 형광-편광도(mP)의 변화를 측정하였다. 이는 면역분석법의 특이성과 민감성을 충분히 만족하였다. OTA의 검출범위는 0.5-200 ng/ml였고, 검출한계는 0.3 ng/ml였다. 개발된 분석법은 다른 곰팡이 독소들과의 교차반응은 없었고 높은 특이성과 재현성 및 회수율을 나타내었다. HPLC 방법에 의한 회수율은 88-84%로 다소낮게, FPlA법의 회수율은 90-110%로 다소 높게 나타났다. 16점의 현미시료를 분석하였을 때, 2점이 상관관계가 높게 12-20 ppb 정도 오염된 것으로 나타났다. 4점은 FPIA 및 HPLC 모두에서 음성으로 판정되었다. 개발된 FPIA는 복잡한 전처리 방법이 필요 없는 신속한 검색이 가능하므로, 식품 및 환경에서의 OTA 잔류 검사에 유용하게 사용될 수 있을 것이다.
In the course of screening for the tipA promoter-inducing substances, we isolated an active compound, sulfomycin Ia, from the mycelium of a microorganism designated 50634. The producing organism was identified as Streptomyces sp. on the basis of taxonomic studies. Sulfomycin Ia was purified from mycelial extract by silica gel column chromatography, LH-20 column chromatography, silica gel TLC, and preparative HPLC. The molecular weight of sulfomycin Ia was determined to be m/z 1129 (M+Na)$^{+}$ by FAB mass measurement and $^{1}$H NMR spectroscopic analysis. The structure was assigned as a derivative of sulfomycin I with thiazole, methyloxazole, oxazole, and pyridine rings by $^{1}$H NMR spectral data.
For the purpose of isolation and screening of tyrosinase inhibitory activity from edible mushrooms, Pleurotus ostreatus, Auricularia auricula-Judae, Umbilicaria esculenta, Agaricus bisporus, Flammuline velutipes, Lentinus edodes, Ganoderma lucidum, and Coriouls versicolor were examined by tracing inhibitory activities against tyrosinase, utilizing L-3,4-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA) as a substrate. Among the eight edible mushrooms tested, Umbilicaria esculenta showed potent enzyme inhibitory activities above 7804% against tyrosinase in ethylacetate (EtOAc) extracts. Ganoderma lucidum and Agaricus bisporus showed inhibitory activities of 67.3% and 51.5% in water extracts. EtOAc extracts of Umbilicaria esculenta was fractionated from silicagel column chromatography and one fraction showed the most inhibitory activity of 60.9%. The three bands (Rf=0.38, 0.27, 0.19) were isolated from preparative TLC of the fraction for purification and identified as mixtures of orsellinate, methyl orsellinate, methyl lecanorate, and methyl gyrophorate by high pressure liquid chromatography (HPLC), ultravisible spectrophotometer (UV), mass spectrophotometer (Mass), nuclear magnetic resonance spectrometer (NMR).
Activation of the T lymphocytes results in a variety of early biochemical events ultimately leading to cell proliferation and lymphokine production. Stimulation of the signal transduction cascade in T cells through the T cell receptor coincides with activation of the phosphatidylinositol-phospholipase C (PI-PLC) pathway. Therefore, we have established a model system to screen immune-simulator that can increase the hydrolysis of phosphoinositides in human T cell leukemia Jurkat cells. As a result of screening from herbal medicine extract, 4 extracts (O1ibanum, Ephedrae Herba, Real Gar, Saussureae Radix) were found 14 increase the production of inositol phosphates. All the active fraction from the four kinds of extract were fluted in a different retention time on C-18 HPLC and these active fraction also showed difference in cell specificity. And all the active fractions increased DNA synthesis in T cell. Therefore, it is suggested that the active fraction among 4 extracts might contain a compound having different properties one another.
Genistein, a inhibitor of the progression of G$_{1}$ and G$_{2}$ phase of the mammalian cell cycle, was discovered through a unique screening system, in which effects of microbial metabolites on the cycle progression of the cultured mouse mammalian carcinoma cell were monitored by flow cytometry. The inhibitor was extracted from the fermentation broth of Streptomyces sp. ZF10 with ethyl acetate, and purified by silica gel column chromatography and HPLC.
An attractive target for anti-herpes chemotherapy is the herpes simplex virus 1 (HSV-1) protease encoded by the UL26 gene. HSV-1 protease is essential for DNA packaging and virus maturation. To perform high throughput for potent inhibitors, the efficient production of larger amounts of highly purified enzyme and protease activity assay method must be established. In this report, expression in E. coli and purification of the protease gene of HSV-1 strain F was investigated. The protease gene was cloned pET28, and the nucleotide sequence of protease catalytic domain of HSV-1 compared strain F with other strains (KOS and CL101). In these results the F strain was different in base sequence. However, the amino acid sequence was identifical. The HSV-1 protease was purified with His-tagged affinity column. The analysis of HSV-1 protease activity was performed by high performance liquid chromatography.
Choi, Sang Chul;Chung, Yong Suk;Lee, Yun Gyeong;Park, Yun Ji;Kim, Changsoo
한국작물학회:학술대회논문집
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한국작물학회 2017년도 9th Asian Crop Science Association conference
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pp.104-104
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2017
Sorghum (Sorghum bicolor (L.) Moench.) is one of the most important crops for human and animal nutrition. Nonetheless, sorghum has a cyanogenic glucoside compound which can be degraded into hydrogen cyanide, toxic to humans and animals even with tiny amount. In consequence, breeding materials with a low cyanide level has been a top priority in sorghum breeding programs. To fulfill our long-term goal, we are screening sorghum accessions with low cyanide level, which would be an important breeding material for food safety. We collected seeds of various sorghum accessions and analyzed relevant metabolites to find useful breeding materials of sorghum accessions containing low cyanide. Fourteen wild relatives were obtained from the University of Georgia in US, a reference accession BTx623, and three local varieties from National Agrobiodiversity Center of Rural Development Administration in Korea, and one wild species from the Wild Plant Resources Seed Bank of Korea University in Korea. Sorghum plants were grown in plastic greenhouse under natural conditions. After growing, leaf samples were harvested at different developmental stages: seedling phase, vegetative phase (right before flowering), and reproductive phase (ripening). Using collected samples, quantification analysis were performed by an HPLC system for three metabolites (dhurrin, 4-hydroxybenzaldehyde, and 4-hydroxyphenylacetic acid) in sorghum plants. Prior to metabolome analysis, specific experimental condition for HPLC system was set to be able to separate three metabolites simultaneously. Under this condition, these metabolites were quantified in each accession by HPLC system. We observed that the metabolite contents were changed differently by developmental stages and accessions. We clustered these results into five groups as patterns of their contents by developmental stages. Most of accessions showed that 4-hydroxybenzaldehyde content was very high at seedling stage and decreased rapidly at vegetative phase. Interestingly, the patterns of dhurrin content were very different among clusters. However, 4-hydroxyphenylacetic acid content was maintained at low levels by developmental stages in most accessions. The results would demonstrate how dhurrin and alternative degradation pathways are differentiated in each accession.
Samchulgeonbi-tang (SC) is well-known traditional herbal medicine which is composed of fourteen medicine herbs. SC has been used for the treatment of the chronic gastritis, indigestion, gastric ulcers, gastroptosis and diarrhea disease. The variation in the amount of bioactive components of SC and its fermentation SC with ten Lactobacillus strains were investigated via high-performance liquid chromatography coupled with diode array detection (HPLC-DAD). Simultaneous qualitative and quantitative analysis of seven bioactive compounds; paeoniflorin, liquiritin, hesperidin, liquiritigenin, kaempferol, atractylenolide III, magnolol were achieved by comparing their retention times ($t_R$) and UV spectra with those of the standard compounds. In the results, the amount of paeoniflorin and hesperidin were 7.967 mg/g, 7.251 mg/g that were the main compounds in SC. The amounts of liquiritigenin was increased by all ten Lactobacillus strains, except strain 128. Especially, the liquiritigenin amount was highest in SC fermented with strain 145 (0.201 mg/g), which was increased by 158.39% compared to SC (0.081 mg/g). In the fermented SC using strains 344, almost components were increased than non-fermented SC, except paeoniflorin and kaempferol. Thus, these results considered that the strains 145 and 344 are most excellent fermentation strains among the 10 species of fermentation strains.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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