Novel fluoro-substituted apio dideoxyuncleoside(($\pm$)-3a and ($\pm$)-3b) were efficiently synthesized stalling from 1,3-dihydroxyacetone via Horner-Emmons olefination as a key step. Cyclization of fluoro ester ($\pm$)-6 under acidic conditions to the fluorolactone was smoothly proceeded in favor of trans-fluorolactone due to the favorable transition state with equatorial hydroxymethyl substituent. Unfortunately the final nucleosides($\pm$) -3a and ($\pm$)-3b were found to be inactive against several viruses such as HIV-1, HSV- I , HSV-2 and HCMV.
The PCR was employed to detect and characterize the bovine immunodeficiency-like virus (BIV), which is a newly recognized member of the I entivirinae of the retroviruses. Degenerate primers representing the conserved regions in the pol genes of the Lentivirinae, were used to detect proviral DNA obtained from the bovine embryonic spleen cell cultures infected with BIV. The PCR amplified DNA fragment was molecularly cloned and sequenced. The BIV DNA fragment contained a sequence identical to that reported by Garvey et al. (Garvey et al., 1990. Virology, 175, 391-409). With the degenerate primers, peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) of sick cattle and cells cultured with BIV were tested to determine genetic variation of BIV pol conserved sequence. We found the sequence heterogeneity within cultures and most variations occurred at the third base of codons that would not lead to amino acid substitutions. Another change was GAG (Glu) to AAG (Lys) within the BIV isolates. Interestingly, the altered sequence is also found in other lentiviruses such as HIV-2, SIV mac, CAEV and EIAV.
Although Mycobacterium tuberculosis complex strains remain responsible for the majority of diseases caused by mycobacterial infections worldwide, the increase in HIV infections has allowed for the emergence of other non-tuberculous mycobacteria as clinically significant pathogens. However, Mycobacterium species has a long period of incubation, and requires serious biochemical tests such as niacin, catalase, and nitrate test that are often tedious. The development of rapid and accurate diagnostics can aid in the early diagnosis of disease caused by Mycobacterium. The current DNA amplification and hybridization methods that have been developed target several genes for the detection of mycobacterial species such as hps65, 16S rDNA, rpoB, and dnaj. These methods produce rapid and accurate results. In this study, PCR-restriction fragment length polymorphism analysis(PCR-RFLP) based on the region of the rpoB gene was used to verify the identification of non-tuburculosis Mycobacterium species. A total of 8 mycobacterial reference strains and 13 clinical isolates were digested with restriction enzymes such as Msp I in this study. The results of using this process clearly demonstrated that all 13 specimens were identified by rpoB gene PRA method. The PCR-RFLP method based on the rpoB gene is a simple, rapid, and accurate test for the identification of Mycobacterium.
We aimed to understand the molecular changes in host cells that accompany infection by the seasonal influenza A H1N1 virus because the initial response rapidly changes owing to the fact that the virus has a robust initial propagation phase. Human epithelial alveolar A549 cells were infected and total RNA was extracted at 30 min, 1 h, 2 h, 4 h, 8 h, 24 h, and 48 h post infection (h.p.i.). The differentially expressed host genes were clustered into two distinct sets of genes as the infection progressed over time. The patterns of expression were significantly different at the early stages of infection. One of the responses showed roles similar to those associated with the enrichment gene sets to known 'gp120 pathway in HIV.' This gene set contains genes known to play roles in preventing the progress of apoptosis, which infected cells undergo as a response to viral infection. The other gene set showed enrichment of 'Drug Metabolism Enzymes (DMEs).' The identification of two distinct gene sets indicates that the virus regulates the cell's mechanisms to create a favorable environment for its stable replication and protection of gene metabolites within 8 h.
Kwon Do-Yoon;Lee Duck-Yeon;Sykes Brian D.;Kim Key-Sun
Journal of the Korean Magnetic Resonance Society
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v.9
no.2
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pp.74-92
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2005
The high resolution solution structure of MCP-3 was determined using multinuclear, multidimensional NMR spectroscopy with an expressed and $^{13}C-\;and\;^{15}N-labeled$ protein. The MCP-3 has a typical chemokine fold including 3 anti-parallel $\beta-sheets$, and a C-terminal helix, but it exists as a monomer in solution under the conditions where the structure was determined (2 mM, pH 5.1 at $30^{\circ}C$). Based on the structure and the amino acid sequence compared to other chemokines we propose that Ile20 and Leu25 in MCP-3 play key roles in the formation of N-loop (residues between the $2^{nd}$ cysteine and the I sheet) which has been implicated as a determinant of chemokine specificity. Additional receptor binding surface is supplied by the 40s loop (residues between the 2 and the 3 sheet) and the binding interface of the acidic N-terminal region of chemokine receptor to MCP-3 would resemble the dimerization interface of CC type dimer.
Song, Hyea Suk;Kim, Jai Jung;Choi, Jea Gyoo;Chun, Sung Hyun;Yee, Nan Hee
Journal of the Korean Society of Safety
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v.33
no.6
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pp.157-162
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2018
There have been 1,039 accidents in laboratory(National Research Safety Headquarters). Accidents in laboratory has increased by 71.5% from 158 cases in 2011 to 271 cases in 2016. Accident analysis results show that there has been no death accident after 2011 when 5 death accidents happened. The results also show that severe injuries have been 23 cases(2%) from 2011 to 2016(7 cases in 2011, 2 cases in 2012, 2013 and 2014, 3 cases in 2015, 7 cases in 2016). Minor injuries shows increasing trend from 151 cases in 2011(92.6%) to 294 cases in 2016(97.6%). Among the causes of accidents in laboratory, piercing injuries by injector were 69 cases(10.4%) for recent 3 years, i.e. 22 cases(12.6%) in 2014, 18 cases(14.2%) in 2015 and 29 cases(16%). Piercing injuries by injector with infection such as viral hepatitis and HIV/AIDS were identified in 10 cases in 2014, 5 cases in 2015, and 10 cases in 2016.Therefore, we would like to contribute to the safety of laboratories by suggesting a guideline for prevention and post management of laboratory accidents.
Increased access to highly active antiretroviral therapy (HAART) has made the management of drug toxicities an increasingly crucial component of HIV. This study investigated the effects of adjuvant use of coconut oil and HAART on testicular morphology and seminal parameters in Sprague-Dawley rats. Twelve adult male Sprague-Dawley rats, weighing 153~169 g were distributed into four groups (A-D) and treated as follows: A served as control (distilled water); B (HAART cocktail-Zidovudine, Lamivudine and Nevirapine); C (HAART + Virgin coconut oil 10 mL/kg) and D (Virgin coconut oil 10 mL/kg). After 56 days of treatment, animals were killed and laparotomy to exercise the epididymis for seminal fluid analyses done whilst testicular tissues were processed for histo-morphometric studies. Result showed a significant decline in sperm motility (P < 0.05) and count (P < 0.0001) in HAART-treated animals while there was insignificant changes in other parameters in groups C and D except count that was reduced (P < 0.0001) when compared with controls. Histomorphological studies showed HAART caused disorders in seminiferous tubular architecture with significant (P < 0.01) decline in epithelial height closely mirrored by extensive reticulin framework and positive PAS cells. Adjuvant Virgin coconut oil + HAART resulted in significant decrease in seminiferous tubular diameter (P < 0.05), but other morphometric and histological parameters were similar to control or Virgin coconut oil alone (which showed normal histoarchitecture levels). While derangements in testicular and seminal fluid parameters occurred following HAART, adjuvant treatment with Virgin coconut oil restored the distortions emanating thereof.
Cystoisospora is responsible for morbidity in immunocompromised patients. PCR is sensitive for diagnosing Cystoisospora; however, it needs reevaluation for differential molecular diagnosis of cystoisosporiasis. We aimed at evaluating melting curve analysis (MCA) after real-time PCR (qPCR) in diagnosis and genotyping of Cystoisospora as an alternative to conventional PCR. We included 293 diarrheic stool samples of patients attending the Department of Clinical Oncology and Nuclear Medicine of Cairo University Hospitals, Egypt. Samples were subjected to microscopy, nested PCR (nPCR), and qPCR targeting the internal transcribed spacer 2 region (ITS2) of the ribosomal RNA (r RNA) gene followed by melting temperatures ($T_ms$) analysis and comparing the results to PCR-RFLP banding patterns. Using microscopy and ITS2-nPCR, 3.1% and 5.8% of cases were Cystoisospora positive, respectively, while 10.9% were positive using qPCR. Genotyping of Cystoisospora by qPCR-MCA revealed 2 genotypes. These genotypes matched with 2 distinct melting peaks with specified $T_ms$ at $85.8^{\circ}C$ and $88.6^{\circ}C$, which indicated genetic variation among Cystoisospora isolates in Egypt. Genotype II proved to be more prevalent (65.6%). HIV-related Kaposi sarcoma and leukemic patients harbored both genotypes with a tendency to genotype II. Genotype I was more prevalent in lymphomas and mammary gland tumors while colorectal and hepatocellular tumors harbored genotype II suggesting that this genotype might be responsible for the development of cystoisosporiasis in immunocompromised patients. Direct reliable identification and differentiation of Cystoisospora species could be established using $qPCR-T_ms$ analysis which is useful for rapid detection and screening of Cystoisospora genotypes principally in high risk groups.
Objectives: This study provides insights on the impact of a targeted intervention (TI) programme on behaviour change among injecting drug users (IDUs) in India. Methods: This paper examined the data from the Integrated Biological and Behavioural Surveillance 2014-2015 for IDUs in India. Logistic regression was performed to understand the factors (TI programme services) that affected injecting risk behaviours by adjusting for covariates. Propensity score matching was conducted to understand the impact of the TI programme on using new needles/syringes and sharing needles/syringes in the most recent injecting episode by accounting for the covariates that predicted receiving the intervention. Results: Participants who received new needles and syringes from peer educators or outreach workers were 1.3 times (adjusted odds ratio, 1.29; 95% confidence interval [CI], 1.09 to 1.53) more likely to use new needles/syringes during most recent injecting episode than participants who did not receive needles/syringes. The matched-samples estimate (i.e., average treatment effect on treated) of using new needles in the most recent injecting episode showed a 2.8% (95% CI, 0.0 to 5.6) increase in the use of new needles and a 6.5% (95% CI, -9.7 to -3.3) decrease in needle sharing in the most recent injecting episode in participants who received new needles/syringes. There was a 2.2% (95% CI, -3.8 to -0.6) decrease in needle sharing in the most recent injecting episode among participants who were referred to other services (integrated counselling and testing centre, detox centres, etc.). Conclusions: The TI programme proved to be effective for behaviour change among IDUs, as substantiated by the use of new needles/syringes and sharing of needles/syringes.
Although Mycobacterium tuberculosis complex strains remain responsible for the majority of diseases caused by mycobacterial infections worldwide, the increase in HIV (human immuno deficiency virus) infections has allowed for the emergence of other non-tuberculous mycobacteria as clinically significant pathogens. M. tuberculosis was detected by two-tube nested polymerase chain reaction (PCR) and non-tuberculous mycobacteria was detected by PCR-restriction fragment length polymorphism (RFLP) with Msp I. Result of niacin test is equal to result of two-tube nested PCR after culture for M. tuberculosis. In this study, acid fast bacilli stain (AFB. stain) >2+ case, Detection of Mycobacteria is similar to result before culture and after culture. AFB. stain <1+ case, result of mycobacteria is distinguished. Conclusionly, these results suggest that identification of mycobacteria must go side by side both culture and PCR for more fast and accuracy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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