A pregnant-induced clone was identified by differential screening from a cDNA library of bovine mammary gland. The clone was identified as a cDNA encoding a polyadenylate binding protein 1 (PABP). The cDNA clone had a total length of 1,911 nucleotides coding for 636 amino acids. The nucleotide sequence of the bovine PABP was 95% and 94% identical to those of human and mouse species, respectively. Comparison of the deduced amino acid sequences of bovine PABP with those of human species showed 100% identity. Induction of the PABP mRNA was observed in bovine mammary tissues at pregnant 7 and 8 months compared to virgin, lactating and involuted states. Expression of the PABP gene was examined in mammary epithelial HC11 cells at proliferating, differentiated and apoptotic conditions. The mRNA levels of PABP gene were similar between proliferating and differentiated cells, but expression levels were very low in apoptotic cells compared to other conditions. Results demonstrate that the PABP gene is induced during pregnancy at which stage mammary epithelial cells are actively proliferating.
To produce low cost and efficient photovoltaic cells, inorganic-organic lead halide perovskite materials appear promising for most suitable solar cells owing to their high power conversion efficiency. Most recent research showes that formamidinium lead iodide ($FAPbI_3$) with methylammonium lead bromide ($MAPbBr_3$) improves the power conversion efficiency of the solar cell to more than 18 per cent under a standard illumination because incorporated $MAPbBr_3$ makes $FAPbI_3$-relatively unstable but comparatively narrow band gap-more stable composition. In respect to first principle study, we investigated band gap of $MAPbI_3$, $FAPbI_3$, $MAPbBr_3$, $(FAPbI_3)_{0.89}-(MAPbBr_3)_{0.11}$ and 0.615(eV), 0.466, 1.197, 0.518 respectively through EDISON DFT software. These results emphasize enhancing structure stability is important factor as well as finding narrow band gap.
A macroscopic cross section generation model was developed for the conceptual horizontal, compact high temperature gas reactor (HC-HTGR). Because there are many sources of spectral effects in the design and analysis of the core, conventional LWR methods have limitations for accurate simulation of the HC-HTGR using a neutron diffusion core neutronics simulator. Several super-cell model configurations were investigated to consider the spectral effect of neighboring cells. A new history variable was introduced for the existing library format to more accurately account for the history effect from neighboring nodes and reactivity control drums. The macroscopic cross section library was validated through comparison with cross sections generated using full core Monte Carlo models and single cell cross section for both 3D core steady-state problems and 2D and 3D depletion problems. Core calculations were then performed with the AGREE HTR neutronics and thermal-fluid core simulator using super-cell cross sections. With the new history variable, the super-cell cross sections were in good agreement with the full core cross sections even for problems with significant spectrum change during fuel shuffling and depletion.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.32
no.5
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pp.758-763
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2003
Amino acid transporters play an important role in supplying nutrients to normal and cancer cells for cell proliferation. System L is a major transport system responsible for the N $a^{+}$-independent, large neutral amino acids including several essential amino acids. L-type amino acid transporter 1 (LAT1), an isoform of system L amino acid transporter, is highly expressed presumably to support their continuous growth and proliferation in malignant tumors. 2-Aminobicyclo- (2,2,1) -heptane-2-carboxylic acid (BCH) is a model compound for study of amino acid transporter as a system L selective inhibitor. In the present study, we examined whether BCH induced growth inhibition in KB human oral squamous carcinoma cell line or not. The uptake of L-[$^{14}$ C]leucine by KB cells is inhibited by BCH in a concentration dependent manner with a Ι $C_{50}$ value of 75.3$\pm$6.2 ${\mu}{\textrm}{m}$ and a $K_{i}$ value of 98.7$\pm$ 4.1 ${\mu}{\textrm}{m}$. The growth of KB cells is inhibited by BCH in time dependent manner and concentration dependent manner with a Ι $C_{50}$ value of 11.1 $\pm$0.8 mM. In the DNA of KB cells treated with the various concentrations and various periods of BCH, the characteristic ladders associated with DNA fragmentation were not observed. These results suggest that BCH inhibits the growth of KB oral epidermoid carcinoma cells through the inhibition of transport of neutral amino acids into cells without DNA break down. This phenomenon will be a new rationale for anti-cancer therapy.y.
Chan-Jung Lee;Hye-Sung Park;Seong-Yeon Jo;Gi-Hong An;Ja-Yun Kim;Kang-Hyo Lee
Journal of Mushroom
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v.22
no.2
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pp.60-66
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2024
This study was conducted to selection and investigate appropriate conditions for mass production of antagonistic microbes to control cobweb disease caused by Cladobotryum mycophilum. A grampositive bacterium was isolated from spent substrate of Agaricus bisporus and showed significant antagonistic activity against Cladobotryum mycophilum. The bacterium was identified as Bacillus altitudinis. based on the cultural, biochemical and physiological characteristics, and 16S rRNA sequence. The isolate is saprophytic, but not parasitic nor pathogenic to cultivated mushroom whereas it showed strong inhibitory effects against C. mycophilum cells in vitro. The control efficacy of B. altitudinis HC7 against cobweb disease of C. mycophilum was up to 78.2% on Agaricus bisporus. The suppressive bacterium may be useful for the development of biocontrol system. To define the appropriate conditions for the mass production of the Bacillus altitudinis HC7, we have investigated appropriate culture conditions and effects of various nutrient source on the bacterial growth. The appropriate initial pH and temperature were determined as pH 6.0 and 30℃, respectively. The appropriate concentration of medium elements for the growth of pathogen inhibitor bacterium(Bacillus altitudinis HC7) was determined as follows: 3.0% soluble startch, 10% soytone, 1.0% (NH4)2HPO4, 1.0 mmol KCl, and 0.5% L-asparagine.
The gene for glycoprotein B (gB2) of HSV-2-strain G was subcloned, sequenced, recombinated into the lacZ-HcNPV, expressed in insect cells, and compared with the homologous gene of other HSV-2 strains. The ORF of the gB2 gene was 2,715 bp. The overall nucleotide sequence homology of te gB2 gene compared ith that of the two previously reported HSV-2 strains appeared to be over 98%. A recombinant virus named Baculo-gB2 protein in insect cells. The recombination was confirmed by a PCR and the expression was demonstrated by radio immunoprecipitation. Insect cells infected with the Baculo-gB2 virus synthesized and processed gB2 with approximately 120 kDa in the cells, and then secreted it into the culture media, where it reacted with a nomoclonal antibody to gB2. The gB2 polypeptide contained two main hydrophobic regions (a signal sequence from 1 to 23 amino acid residues, and a membrane anchor sequence from aa 745 to 798), eight N-glycosylation sites evenly distributed, and was rich in alanine (11.2%). Antibodies to this recombinant protein that were raised in mice recognized the viral gB2 and neutralized the infectivity of the HSV-2 in vitro. There results show that the gB2 protein was successfully porduced in insect cells and could be used to raise a protective neutralizing antibody. Accordingly, this particular recombinant protein may be useful in the development of a subunit vaccine.
Kim, Tae-Won;Ji, Jin Woo;Chang, Ho Gun;Kim, Myoung Ok;Ryoo, Zae Young;Park, In Kook;Kim, Sun Jung
Molecules and Cells
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v.19
no.2
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pp.198-204
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2005
Both erythropoietin (EPO) and the short-form thrombopoietin (TPO) were expressed at low levels whereas the long-form TPO was expressed at high levels in transgenic animals. To elucidate the role of carboxy-terminal half of the long-form TPO which is absent in the short-form, we generated recombinant TPO or EPO expression vectors which contain or lack the carboxy-terminal half of TPO and examined their expression in the HC11 and 293 cells. The long-form TPO was expressed higher than the short-form regardless of the cell types, transfection modes, and promoters. When 3'-half of the long-form TPO cDNA was placed downstream of the EPO cDNA to act as a 3'-untranslated region, expression of EPO was moderately increased at the RNA level, however, no remarkable increase was observed at the protein level. These results suggest that the low expression of EPO, as like as the short-form TPO, is due to absence of the 3'-half in the full-length TPO that confers stability both at the RNA and protein levels.
Zinc is a trace element that is associated with a stimulation of immune function and regulation of ion balance for livestock production. In this study, the effect of zinc as inhibitor to apoptosis-induced cells was examined in vitro using mammary epithelial cell line, HC11 and macrophage cell line, NCTC3749. Cell viability, measured by MTT assay, indicated that 10 g/ml of zinc had a negative impact on cellular activity and 50 ng/ml was chosen for further testing. Apoptosis was induced in cells treated with C2-ceramide in serum-free media. DNA fragmentation and gene expression of acidic sphingomyelinase (a gene responsible for the progress of apoptosis) were distinctively low in zinc treated cells compared with those in non-treated controls. In conclusion, zinc is involved in the regulation of cell proliferation and apoptosis in mammary epithelial cells and macrophages.
Kim, Sun-Jung;Yu, Dae-Yeul;Lee, Ko-Woon;Cho, Yong-Yeon;Lee, Chul-Sang;Han, Yong-Mahn;Lee, Kyung-Kwang
BMB Reports
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v.28
no.1
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pp.57-61
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1995
The expression of a recombinant human lactoferrin is reported in mouse HC11 mammary epithelial cells. Expression of human lactoferrin (hLF) was achieved by placing its cDNA under the control of the bovine ${\beta}$-casein gene. To improve the hLF expression level in a cell culture system, two artificial introns were also introduced to construct expression vectors. One intron was a hybrid-splice signal consisting of bovine ${\beta}$-casein intron 1 and rabbit ${\beta}$-globin intron II. The other intron was a DNA fragment spanning intron 8 of the bovine ${\beta}$-casein gene. The hybrid intron moderately elevated hLF expression, whereas intron 8 alone did not express any detectable amount of hLF as judged by Northem and Western blot analyses. When the two introns were used together they contributed to a synergistic elevation of hLF expression. These data indicate that artificial introns on both sides of the hLF cDNA were necessary to increase expression of cDNA.
Objectives: Human papillomavirus (HPV) is the major etiological agent of cervical cancer, a leading cause of morbidity and mortality in women worldwide. Screening strategies for reducing the burden of HPV-mediated carcinogenesis are emerging as an effective means for cervical cancer control and prevention in developing countries. Our study, therefore, aimed to identify HPV infection status in North Indian women during random population screening. Methodology: Cervical/vaginal exfoliated cells and/or Pap smear specimens were collected from 890 women of North Indian ethnicity residing in Lucknow and adjoining areas, during random population screening from June 2009-March 2012. HPV viral loads in clinical specimens were determined by the Hybrid Capture (hc)-2 HPV DNA assay, and subsequently, positive/negative/borderline HPV status was calculated. Results: The HPV incidence in the present study was 11.7%. 751 out of a total of 890 women (84.4%) participating in our HPV screening program were HPV negative (HPV -), 104 (11.7%) tested positive (HPV +) while 35 (3.9%) showed borderline (HPV $^*$) infection status. Furthermore, in the HPV + subjects (N=104), 18 (17.3%) showed strong positivity. We observed that HPV positivity tends to increase with age in North Indian women; the higher the viral load with increasing age, higher is the susceptibility to HPV-mediated cervical cancer. Conclusions: HPV viral load/genotyping may help in identifying women at risk of developing cervical cancer. However, cost-effective HPV screening protocols with a wider population coverage are warranted so as to reduce the burden of cervical cancer in women worldwide in the vaccine-era.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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