본 연구는 VSV-G glycoprotein을 envelope으로 하는 pseudotyped retrovirus vector system을 이용하여 쥐의 유방상피세포인 HC11에서 human Lactadherin 유전자의 발현을 확인하고자 하였다. 실험에 사용한 vector는 개체내에서의 외래 유전자의 지속적인 발현에 의한 생리적인 부작용을 최소화하기 위한 구조로, 조직특이적이며 lactogenic hormone에 의해 유도적인 활성을 가지는 것으로 알려진 WAP promoter의 통제하에 도입하고자 하는 외래 유전자를 위치하도록 하였다. WAP promoter의 대조군으로 지속적인 활성을 나타내는 $\beta$-actin promoter를 사용하였으며, 이 각각의 promoter와 marker gene으로 E. coli LacZ gene을 재조합한 후 retrovirus vector system을 이용하여 HCll에 도입하였다. 세포의 genome 내로의 유전자의 전이는 PCR을 통해 확인하였고, RT-PCR의 수행으로 유전자의 발현을 확인하였다. Lactadherin 유전자를 이용한 실험도 동일한 과정으로 수행하였으며, RT-PCR의 결과에서 HCll 세포에서 Lactadherin 유전자의 발현이 insulin을 단독으로 처리한 군에 비해 insulin, hydrocortisone, prolactin을 동시에 처리한 군에서 우월하게 나타나는 것으로 확인되었다. 그러나 insulin 단독 처리군에서 유전자의 발현이 약하게 나타나는 것으로 관찰되어 WAP promoter의 leakiness에 대한 재고의 필요성이 요구되었다.
유선 조직에서 베타-락토글로불린 유전자의 발현은 프롤락틴, 글루코코르티코이드 및 인슐린등의 유촉진 호르몬들에 의해서 강력하게 유도된다. 이와 같은 호르몬 유도의 조절 기작을 규명하기 위하여, 배양 유선 세포인 HC11 세포에서 염소 베타-락토글로불린 유전자 프로모터의 유촉진 호르몬에 대한 반응을 분석하였다. 베타-락토글로불린 프로모터의 5'- 조절 부위를 연쇄적으로 제거한 발현 실험에서 호르몬 유도를 크게 변화 시키는 두 지역이 관찰되었다. 조절 부위의 -1692의 상류지역은 하류 프로모터를 강력하게 활성화 시키는 부위로, 주로 글루코코르티코이드 유도체인 덱사메타손의 작용을 매개하였다. 그러나 두번째 지역의 유도 작용은 인슐린 처리를 병행하지 않을 경우 상류 조절부위에 의해 억제되었다. 이러한 결과는, 유선세포에서 유촉진 호르몬들에 의한 베타-락토글로불린 프로모터 활성 유도가 인슐린에 의한 탈 억제화와 글루코코르티코이드 및 프롤락틴에 의한 활성화의 복합 조절에 의해서 이루어질 것이라는 점을 시사한다. 두번째 지역에 의한 덱사메타손 유도는 -700 부근의 글루코코르티코이드 수용체 결합 부위에 의해서 매개되는 것으로 추정된다.
버섯 세균갈성색무늬병원균인 Pseudomonas tolaasii에 대한 길항미생물로 보고된 Pseudomonas azotoformans HC5 균주의 배양적 특성과 대량 배양을 위한 최적배양 조건을 설정하였다. HC5 균주의 생육온도는 $10{\sim}20^{\circ}C$, pH는 6.0~9.0의 범위에서 왕성한 생육을 보였다. 대량배양을 위한 효율적인 영양원 선발을 위하여 기본배지에 탄소원 fructose 등 18종, 무기질소원 $NH_4Cl$ 등 6종, 유기질소원 peptone 등 6종 그리고 아미노산 asparagine 등 11종을 각각 1%씩 첨가하였고, 무기염류 13종을 1 mM 농도로 첨가하여 각각에 대한 생육에 미치는 영향을 조사하였다. 또한 선발된 각각의 영양성분들에 대한 최적 농도를 조사하기 위하여 각각의 성분을 최소 0.1%에서 최대 4.0%까지 배지에 첨가하여 배양 후 생육정도를 조사하였다. 그 결과, 대량배양을 위한 생육최적조건은 온도 $15^{\circ}C$, pH 6, 탄소원 0.6% adonitol, 유기질소원 1.5% yeast extract, 무기질소원 0.8% $NH_4H_2PO_4$, 아미노산 0.2% asparagine 그리고 무기염류는 5 mM $MgSO_4$에서 왕성한 생육을 보였다.
Karlsson, Linda;Ruiz-Moreno, M.;Stern, M.D.;Martinsson, K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제25권11호
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pp.1559-1567
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2012
The objective of this study was to evaluate ruminal degradability and intestinal digestibility of crude protein (CP) and amino acids (AA) in hempseed cake (HC) that were moist heat treated at different temperatures. Samples of cold-pressed HC were autoclaved for 30 min at 110, 120 or $130^{\circ}C$, and a sample of untreated HC was used as the control. Ruminal degradability of CP was estimated, using the in situ Dacron bag technique; intestinal CP digestibility was estimated for the 16 h in situ residue using a three-step in vitro procedure. AA content was determined for the HC samples (heat treated and untreated) of the intact feed, the 16 h in situ residue and the residue after the three-step procedure. There was a linear increase in RUP (p = 0.001) and intestinal digestibility of RUP (p = 0.003) with increasing temperature during heat treatment. The $130^{\circ}C$ treatment increased RUP from 259 to 629 g/kg CP, while intestinal digestibility increased from 176 to 730 g/kg RUP, compared to the control. Hence, the intestinal available dietary CP increased more than eight times. Increasing temperatures during heat treatment resulted in linear decreases in ruminal degradability of total AA (p = 0.006) and individual AA (p<0.05) and an increase in intestinal digestibility that could be explained both by a linear and a quadratic model for total AA and most individual AA (p<0.05). The $130^{\circ}C$ treatment decreased ruminal degradability of total AA from 837 to 471 g/kg, while intestinal digestibility increased from 267 to 813 g/kg of rumen undegradable AA, compared with the control. There were differences between ruminal AA degradability and between intestinal AA digestibility within all individual HC treatments (p<0.001). It is concluded that moist heat treatment at $130^{\circ}C$ did not overprotect the CP of HC and could be used to shift the site of CP and AA digestion from the rumen to the small intestine. This may increase the value of HC as a protein supplement for ruminants.
Objective: For improving meat quality especially tenderness, male cattle are usually castrated to removes both the testicles. This study was conducted to evaluate the effect castration method (half- and complete-castration) on meat yield and quality characteristics of Hanwoo male cattle. Methods: Thirty-two similar age (5.9 months) Hanwoo male calves were divided into: half-castration (HC) and complete-castration (CC) groups (n = 16 per group). At 7 months of age, all the animals were castrated in which the HC calves had only one testicle surgically removed while, the CC calves had both testicles surgically removed. The castrated animals were reared under identical conditions until 25 months of age. After slaughter, the carcasses were evaluated for carcass traits and meat yield of primal cuts. For examination of the castration effect on meat quality, L. lumborum and semimembranosus muscles were used. The meat samples were analyzed for chemical composition, color, pH, shear force and water holding capacity, fatty acids, metabolites and volatile aroma compounds. Results: The HC group showed higher meat yields of all primal cuts (p<0.05). As a result, the total meat yield was higher by approximately 44 kg in the HC group (303.32 kg, corresponding to 67.88%) compared to the CC group (259.30 kg, corresponding to 62.11%) (p<0.05). In terms of meat quality, the HC resulted in two times greater fat content in both muscles examined compared to intact males. More importantly, the shear force values did not differ between HC and CC groups for L. lumborum muscles (p>0.05). The meat from HC animals exhibited higher amount of free amino acids associated with sweetness (p<0.05). Furthermore, the castration method only exhibited a negligible effect on metabolites and volatile aroma compounds in the cooked meat. Conclusion: Half-castration emerged as an alternative practice to be used for increasing the yield and tenderness of male cattle meat.
This study investigated the effects of mulberry leaf extract on lipid metabolism in rats fed a high cholesterol diet. Sprague-Dawley male rats weighing $100{\pm}10g$ were randomly assigned either to one of two normal diet groups, with (NE group) or without (N group) mulberry extract, or one of four high cholesterol groups containing 1% cholesterol and various levels of dietary mulberry leaf extract. The rats fed high cholesterol diets were subdivided into 4 groups according to level of mulberry extract; Mulberry extract free group (HC group), 0.8% mulberry leaf extract group (HCL group), 1.6% mulberry leaf extract (HCM group) and 3.2% mulberry leaf extract (HCH group). The rats were fed their respective diets ad libitum for 4 weeks. The levels of serum triglyceride, total cholesterol and LDL-cholesterol of the HC group were higher than mulberry leaf extract supplemented groups. In contrast, the levels of serum HDL-cholesterol in groups supplemented with mulberry leaf extract were significantly lower than that of HC group. Hepatic total lipids, triglycerides, and cholesterol were significantly higher in the high cholesterol groups compared to those of the normal group, but were lower in the HCL, HCM and HCH groups than in the HC group. HMG-CoA reductase activity was significantly decreased in the HC and HCL groups compared to the normal and NE groups. However, the activities in the HCM and HCH group were similar to that of the normal group. The activity of acyl-CoA-cholesterol acyl transferase (ACAT) was increased in high cholesterol groups compared to the normal group. However, the activity was lower for all of the high cholesterol groups fed mulberry leaf extracts, and was lowest for the highest supplemented group (HCH), with no significantly difference from the normal group. In conclusion, the reduction in serum and hepatic lipid composition by mulberry leaf extract may be due to its modulation of HMG-CoA reductase and ACAT activities.
버섯 세균갈성색무늬병원균인 Pseudomonas tolaasii에 대한 독소저해균으로 보고된 Pseudomonas sp. HC1 균주의 배양적 특성과 최적 배양을 위한 대량배지를 선발하였다. CH1균주의 생육온도는 $20{\sim}40^{\circ}C$, pH는 5.0~11.0까지 넓은 범위에서 왕성한 생육을 보였다. 대량배양을 위한 효율적인 영양원 선발을 위하여 기본배지에 탄소원 fructose 등 18종, 무기질소원 $NH_4Cl$ 등 6종, 유기질소원 peptone 등 6종 그리고 아미노산 asparagine 등 11종을 각각 1%씩 첨가하였고, 무기염류 13종을 1 mM 농도로 첨가하여 각각에 대한 생육에 미치는 영향을 조사하였다. 또한 선발된 각각의 영양성분들에 대한 최적 농도를 조사하기 위하여 각각의 성분을 0.1%에서 4.0%까지 배지에 첨가하여 배양후 생육정도를 조사하였다. 그 결과, 대량배양을 위한 생육최적조건은 온도 $20^{\circ}C$, pH5, 탄소원 0.9% dextrine, 유기질소원 1.5% yeast extract, 무기질소원 0.5% $(NH_4)_2HPO_4$, 아미노산 3.0% cysteine, 무기염류 4 mM $FeCl_3$에서 왕성한 생육을 보였다.
In this study, iron nanoparticles impregnated hydrochar (FeNPs@HC) was synthesized using lignocellulosic waste and simple one-pot synthetic method. During hydrothermal carbonization (HTC) process, the mixture of lignocellulosic waste and ferric nitrate (0.1~0.5 M) as a precursor of iron nanoparticles was added and heated to 220℃ for 3 h in a teflon sealed autoclave, followed by calcination at 600℃ in N2 atmosphere for 1 h. For the characterization of the as-prepared materials, X-ray diffraction (XRD), cation exchange capacity (CEC), fourier transform infrared spectrometer (FT-IR), Brunauer-Emmett-Teller (BET), transmission electron microscope (TEM), Energy Dispersive X-ray Spectroscopy (EDS) were used. The change of Fe(III) concentration in the feedstock influenced characteristics of produced FeNPs@HC and removal efficiency towards As(V) and Pb(II). According to the Langmuir isotherm test, maximum As(V) and Pb(II) adsorption capacity of Fe0.25NPs@HC were found to be 11.81 and 116.28 mg/g respectively. The results of this study suggest that FeNPs@HC can be potentially used as an adsorbent or soil amendment for remediation of groundwater or soil contaminated with arsenic and cation heavy metals.
The effect of different dietary structural carbohydrate (SC) to nonstructural carbohydrate (NSC) ratios on fiber degradation, digestion, flow, apparent digestibility and rumen fluid characteristics was studied with a design using 18 wethers fitted with permanent rumen and duodenum cannulae. All sheep were divided into six groups randomly, receiving six diets with varying SC to NSC ratios. All diets contained the same proportion of wheat straw and concentrate. The dietary SC to NSC ratios were adjusted by adding cornstarch to the concentrate supplements. The duodenal and fecal flows of dry matter (DM), neutral detergent fiber (NDF), acid detergent fiber (ADF), hemicellulose (HC) and cellulose (CEL) were estimated using chromium-mordanted wheat straw as a flow marker. The degradation parameters of wheat straw DM, NDF, ADF, HC and CEL were determined by incubating the ground wheat straw in nylon bags in the rumen for different periods of time. There was no effect (p>0.05) of the different dietary SC to NSC ratios on rumen pH or $NH_3$-N, but acetate, propionate and butyrate concentrations were significantly affected (p<0.05 or p<0.01) by dietary SC to NSC ratios in the rumen fluid. When the dietary SC to NSC ratio was 2.86, the highest rumen degradability of wheat straw DM, NDF, ADF and CEL was found, but the highest apparent rumen digestibilities of DM, NDF, ADF, HC and CEL occurred at a 2.64 SC to NSC ratio. However, because of compensatory digestion in the hindgut, the apparent digestibilities of DM, NDF, ADF, HC and CEL were highest when the dietary SC to NSC ratio was 2.40. In conclusion, there is a optimal range of dietary SC to NSC ratios (between 2.86 and 2.40) that is beneficial to maximize wheat straw fiber degradation and apparent digestibility.
Kim, Dong-Kyu;Kim, Kyoung-Duck;Seo, Joo-Young;Lee, Sang-Min
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제25권6호
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pp.869-879
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2012
This study was conducted to investigate the effects of dietary lipid source and level on growth performance, blood parameters, fatty acid composition and flesh quality of sub-adult olive flounder Paralichthys olivaceus. Eight experimental diets were formulated to contain 5% squid liver oil (SLO), 5% linseed oil (LO), 5% soybean oil (SO), a mixture of 1% squid liver oil, 2% linseed oil and 2% soybean oil (MIX), no lipid supplementation with high protein level (LL-HP), 10% squid liver oil (HL-SLO), a mixture of 1% squid liver oil, 4.5% linseed oil and 4.5% soybean oil (HL-VO), and 1% squid liver oil with high starch level (LL-HC), respectively. Two replicate groups of fish (average initial weight of 296 g) were fed the diets for 17 wks. After 5 wks, 11 wks and the end of the feeding trial, five fish from each tank were randomly sampled for analysis of body composition. At the end of the feeding trial, final mean weight of fish fed the LL-HP diet was significantly (p<0.05) higher than that of fish fed the HL-VO diet, but did not differ significantly from those of fish fed the SLO, LO, SO, MIX, HL-SLO and LL-HC diets. Fish fed the LL-HP diet showed significantly higher feed efficiency than fish fed the LO, HL-SLO and HL-VO diets. Feed efficiency of fish fed the LO, SO and MIX diets were similar to those of fish fed the SLO and HL-SLO diets. Fish fed the HL-SLO diet showed significantly higher total cholesterol content in plasma compared with other diets. Fatty acid composition of tissues was reflected by dietary fatty acid composition. The highest linoleic (LA) and linolenic acid (LNA) contents in the dorsal muscle were observed in fish fed the SO and LO diets, respectively, regardless of feeding period. The highest eicosapentaenoic acid (EPA) content in the dorsal muscle was observed in fish fed the LL-HP and LL-HC diets after 11 and 17 weeks of feeding, respectively. Fish fed the SLO and HL-SLO diets showed higher docosahexaenoic acid (DHA) content than that of other treatments after 11 and 17 weeks of feeding, respectively. Dietary inclusion of vegetable oils reduced n-3 HUFA contents in the dorsal muscle and liver of fish. The n-3 HUFA contents in tissues of fish fed the SLO and HL-SLO diets were higher than those of fish fed other diets, except for the LL-HP and LL-HC diets. Hardness, gel strength, chewiness and cohesiveness values of dorsal muscle in fish were significantly affected by dietary lipid source. The results of this study indicate that fish oil in fish meal based diets for sub-adult olive flounder could be replaced by soybean oil and linseed oil without negative effects on growth and feed utilization.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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