Murine encephalomyocarditis virus (EMCV)는 혈장유래의약품의 바이러스 안전성 검증을 위해 hepatitis A virus (HAV)의 모델 바이러스로 사용되어왔다. 근래에 혈액응고인자제제에 의한 HAV 감염사례가 보고되면서 혈장유래의약품의 HAV 안전성 검증에 대한 국제적인 규제가 강화되어가고 있다. 본 연구에서는 HAV와 EMCV의 바이러스 불활화 공정에 대한 민감도를 평가하여, 혈장유래의약품 제조공정에서 HAV 불활화 공정의 검증법을 표준화하고자 하였다. HAV와 EMCV의 바이러스 불활화 공정에 대한 민감도를 평가한 결과 HAV가 60$^{\circ}C$ 열처리, low pH 처리(pH 3.9), 0.1 M NaOH 처리, 동결건조 공정 모두에서 EMCV보다 더 저항성이 큰 것을 확인할 수 있었다. EMCV는 특히 열처리와 0.1 NaOH 처리에 민감하게 불활화 되었지만, HAV는 큰 저항성을 나타내었다. 열처리의 경우 2시간 안에 EMCV는 검출한계 이하로 감소하였지만, HAV는 5시간 후에 검출한계 이하로 감소하였다. 0.1 M NaOH 처리시 EMCV는 15분 안에 검출한계 이하로 감소하였지만, HAV는 120분 정도의 처리에도 감염성 바이러스가 검출되었다. pH 3.9에서 25$^{\circ}C$로 14일 동안 항온하였을 때 HAV와 EMCV의 log 감소인수는 각각 1.63, 3.84이었다. 또한 혈액응고 8인자 제조공정의 동결건조 과정에서 HAV와 EMCV의 log 감소인수는 각각 1.21, 4.57이었다. 이와 같은 결과는 혈장유래의약품 제조공정의 HAV 불활화 또는 제거 검증시 모델 바이러스로 사용된 EMCV의 검증 결과를 해석함에 있어 보다 신중함을 가져야 한다는 것을 보여준다. 또한 보다 정확한 HAV검증 결과를 얻고자 한다면 모델 바이러스인 EMCV 보다 HAV를 사용하는 것이 보다 더 타당하다고 사료된다.
Hepatitis A virus (HAV) is a causative agent of triggering acute hepatitis which is transmitted by person-to-person contact and or fecal-oral route. In previous studies, most hepatitis A virus (HAV) isolates had been genotype IA in Korea. Recently, a small number of different genotypes were reported with an upsurge of acute hepatitis by HAV. Therefore, the distribution of HAV genotypes was investigated. RNA was extracted from anti-HAV IgM positive sera which were collected from February to August 2009, at a tertiary care hospital in eastern Jeonnam, Korea. Nested reverse transcription PCR and direct sequencing for VP1/P2A region of the HAV were performed. A total of 365 cases with suspected acute hepatitis were tested for anti-HAV IgM and positive results were obtained in 24 sera (9.0%), which were collected 2 to 15 days (median, 7 days) after the onset of symptoms. Of the 24 seropositive samples, 14 (58.3%) samples were positive for HAV RNA, among which 4 isolates (28.6%) were genotype IA and the other 10 (71.4%) were genotype IIIA. Both IA and IIIA genotypes were isolated from 5~6 neighboring administrative districts throughout the year without geographic or seasonal restrictions. HAV genotypes (IA and IIIA) were observed from the eastern Jeonnam for the studied.
돼지축사에서 채집해온 6개의 육성돈의 분변에서 식중독 유발 바이러스인 HAV와 HEV를 검출하였으며, HAV는 88.3%의 검출율을 보였으며, HEV는 33.3%의 검출율을 보였다. 결과에는 제시하지 않았으나, 염기서열 분석결과 HEV는 사람에게 전염이 가능한 유전자형인 III형이었으며, 실험적으로 사람의 간세포인 PLC/PRF/5에 접종하였을 때 증식이 됨을 확인하였다. 식중독 유발 바이러스인 HAV와 HEV는 오염된 식품이나 물을 섭취하거나 교차 오염에 의해 전염이 가능하기 때문에 돼지축사에서 위생상태의 개선뿐만 아니라 육류를 섭취하기 전인 운송 및 가공과정까지 식중독 유발 바이러스에 의한 교차오염을 막는 노력이 필요하다. HAV와 HEV 모두 검출된 분변에서 HAV를 순수분리하고 빠르게 검출하기 위해 IMS-RT-PCR을 적용하였으며, 항원-항체 반응에 의해 순수하게 HAV만을 분리할 수 있었다. 또한 HAV만이 순수분리 되었는지 재확인하기위해 세포감염을 통해 증식된 바이러스를 확보한 후 nested RT-PCR을 수행한 결과, HAV만을 순수 분리할 수 있음을 확인하였다. 이는 IMS 활용기술이 단순히 항체를 교체함으로써 다른 특정 식중독 유발 바이러스의 다양한 시료에서 바이러스 순수분리 및 검출에 활용 가능성이 있음을 확인하였다.
Objectives: The number of cases of hepatitis A virus (HAV) infections has sharply increased in Korea, especially among young adults. In this study, an HAV outbreak in a facility for disabled people was investigated, and we found epidemiological differences both between 2 different generations and between generally abled and disabled groups. Methods: We analyzed the incubation period and attack rate of an HAV outbreak and investigated the prevalence of HAV antibodies among the staff and residents of a facility for the disabled. We performed a retrospective cohort study during the HAV outbreak, which lasted from February 8 to 25, 2019, including examinations of HAV antibody tests and post-exposure HAV vaccination for the staff or residents of the facility. Results: There were 9 confirmed cases in 2 staff members and 7 residents. Among 53 people (30 staff and 23 residents), except for the 9 confirmed cases and 1 staff member with a known history of HAV infection, HAV seroprevalence was seen in 16.7% of the staff under 40 years of age and 95.2% of those over 40 years of age, while the corresponding rates in the residents were 0.0% and 58.8%, respectively. Conclusions: This result implies that it is necessary to prioritize HAV vaccination for vulnerable groups and workers of residential care facilities.
Hepatitis A (HA) is an acute infectious disease of the liver caused by the Hepatitis A virus (HAV). In acute HA, the presence of anti-HAV IgM is detectable and about 3 weeks after exposure, its titre increases over 4 to 6 weeks. Anti-HAV IgG is detectable within a few days of the onset of symptoms. IgG antibodies continue to last for years after infection and provide lifelong immunity to the host. This study was performed to investigate the current seroprevalence of anti-HAV antibodies in Jeonbuk province, South Korea. A total of 591 (male 322, female 269) serum samples were collected in July 2011 to June 2012. We tested the antibodies of anti-HAV IgG and IgM using a Modular E170 (Roche Diagnostics, Germany), and analysed the serum alanine aminotransferase (ALT) levels by HITACH 7600-100 (HITACH, Japan). The overall seroprevalence of anti-HAV IgG was 84.6% (500/591), and the rate of females (85.9%) was higher than males (83.5%). According to the decade of age, seroprevalence of anti-HAV IgG were as follows; 68.8% (11/16) in the under 10 years old category, 100% (19/19) in the 10~19 category, 96% (48/50) in the 20~29 category, 83.6% (56/67) in the 30~39 category, 84.3% (123/146) in the 40~49 category, 83.3% (135/162) in the 50~59 category, 83.1% (54/65) in the 60~69 category, 78.1% (32/41) in the 70~79 category, and 88% (22/25) in the over 80 category. Total seroprevalence of anti-HAV IgM was 3.4% (20/591), and according to gender, the seroprevalence of male (3.1%) was very similar to that of female (3.7%). Through this study, we know that the seroprevalence of anti-HAV antibody in north-west Jeonbuk province, South Korea, was high. Only children under the age of 10 remain susceptible to HAV infection. Vaccination against HAV is not needed at the present time for the people of Jeonbuk province, South Korea, but a vaccination should be recommended and the improvement in sanitary conditions and personal hygiene should be highlighted.
Hepatitis A virus (HAV) is an epidemiologically important virus with a worldwide distribution. It causes acute hepatitis in humans. HAV infection is often subclinical or asymptomatic in children; however, symptomatic acute infections become more common with age. In this study, we investigated the prevalence of anti-HAV among hospital workers in Jeonbuk province. 447 (127 males, 320 females) persons were included in the study from January to June, 2011. Anti-HAV (total and IgM) in the sample serum was measured by VIDAS Hepatitis A (bioMerieux, France), and IgM positive samples were tested in terms of their serum alanine aminotransferase (ALT) levels by a HITACHI 7600-010 automatic analyzer (HITACHI, Japan). The overall prevalence of total anti-HAV was 45.9% (205/447), and rate for males (60.6%) was higher than that for females (40%). According to the age group, the prevalence rates of total anti-HAV were 20% (1/5) in those under 20 years old, 11.3% (18/160) in those 20-29 years, 49.7% (71/143) in those 30-39 years, 86.5% (83/96) in those 40-49 years, 92.9% (26/28) in those 50-59 years, and 40% (6/15) in those over 60 years old. The total prevalence of anti-HAV IgM was 0.8% (4/447), and rate for males (1.6%) was higher than that for females (0.6%). Through this study, we determined the prevalence of anti-HAV among hospital workers in Jeonbuk province. The prevalence of the HAV antibody overall was low in hospital workers under 40 years old and in those over 60 years old. Therefore, an improvement in sanitary conditions and hygiene and vaccinations against HAV in this population are recommended.
Although studies on Hepatitis A virus (HAV) were crucial in the establishment of the HAV infection prevention programs, no systematic investigation into HAV has been conducted since 1999. We retrospectively analyzed the data between January 2010 to December 2018 from all the patients who underwent HAV antibody tests at the Dankook University Hospital Health Care Center. Data were collected from 56,204 individuals. Overall, 34,834 (62.0%) individuals from this cohort were positive for HAV antibodies and the annual rate of anti-HAV antibody positivity was highest in 2010 (68.5%) and lowest in 2013 (54.8%). The average decline in the antibody positivity rate was 0.62% per year, showing a statistically significant difference (p < 0.001). In the over 40s age group, anti-HAV antibody positivity rates decreased from 89% in 2010 to 64% in 2018 (p < 0.001), with an annual decrease of 3.1%. In the over 30s age group, it decreased from 48.2% in 2010 to 34.7% in 2018 (p < 0.001), with an annual decrease of 1.82%. This study shows that the antibody positivity rate is decreasing across age groups but given that HAV infection poses more significant risks in older patients it is important to expand the evaluations of the current and future antibody positivity rates for HAV in various age groups.
목 적 : 산모 혈청 및 그들의 신생아 제대혈청의 A형 간염 바이러스에 대한 IgG 항체(Hav IgG) 양성율 및 항체가 수준, 항체의 경태반 전이율에 대해 알아보고자 한다. 방 법 : 1998년 1윌 1일부터 5월 31일까지 고려대학교 안산병원에 정상분만을 위해 내원한 산모와 그들의 신생아 제대에서 혈액을 채취하여 Hav IgG를 측정하였다. 검사는 방사성 면역 항체 검사법인 HEPAVIDINE$^{125}$A(General Biologicals Corp. Hsin Chu, Taiwan)를 이용하였으며, 항체가는 정해진 방법에 따라 gamma counter를 이용해 counter per minute(CPM)로 측정하였고, CPM 값이 4,903 이상인 경우 양성으로 판정하였다. 신생아 중 재태 연령 37주 미만, 또는 출생 체중 2,500g 미안인 경우는 대상에서 제외하였다. 결 과 : 1) 대상 산모와 신생아는 42쌍(남아 23명, 여아 19명) 이었으며 산모 평균 연령 $29.5{\pm}3.0$세, 신생아 재태 연령 $39.9{\pm}1.0$주, 신생아 출생 체중 $3.48{\pm}0.39kg$이었다. 2) Hav IgG 양성율은 산모 78.6%, 신생아 81.0% 였고, 항체의 CPM은 산모 $7,528{\pm}2,819$, 신생아 $7,684{\pm}2,740$이었다. 양군간에 항체 양성율과 항체가의 유의한 차이는 없었다. 3) 산모와 신생아의 Hav IgG CPM 사이에는 유의한 상관관계가 있었으며(r=0.9285, P<0.001), 산모 및 신생아의 항체가와 산모 연령, 재태 연령, 출생 체중 사이에는 유의한 상관관계가 없었다. 결 론 : 산모와 신생아 제대혈의 Hav IgG는 비슷한 양성율과 항체가 수준을 보였고 모체와 신생아 항체가는 양성관계에 있었다. 향후 항체 보유수준의 변화를 알기위하여 계속적인 항체 보유 실태와 경태반 전이 항체의 소실 시기에 대한 연구가 필요하리라 생각된다.
Hepatitis virus infection is one of the major problems in Korea. To establish preventive measures for hepatitis A and B virus infection, study on sero-positivity of serum anti-HAV (aHAV) and anti-HBs (aHBs) is needed. The aim of this study was to analyze the sero-positivity and related factors of aHAV and aHBs. We analysed the sero-positivity of serum aHAV and aHBs using ICA (Immunochromatography Assay) method from 102 university students and employees and questionnaire survey was obtained characteristics, vaccination history, past history test, knowledge and information sources of the study subjects. Overall sero-positivity rates of serum aHAV and aHBs were 20.6% and 52.9%, respectively. The sero-positivity rate of aHBs was significantly different by gender (M, 34.9%; F,66.1%) and that of aHAV was significantly different by age (20 age group, 2.7%; 30 age group, 14.3%; 40 age group, 70%; 50 age group, 91.7%). Overall sero-positivity rates of serum aHAV and aHBs by vaccination history rates were 4.9% and 43.1%, respectively. Overall sero-positivity rates of serum aHAV and aHBs by past history test were 10.8% and 52.9%, respectively. Sero-positivity rates of serum aHAV was low in university students. The results of this study could be used effectively as a basic data for establishing effective preventive measures for hepatitis A including vaccination.
Kim, Mi-Ju;Lee, Shin-Young;Kim, Hyun-Joong;Lee, Jeong Su;Joo, In Sun;Kwak, Hyo Sun;Kim, Hae-Yeong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제26권8호
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pp.1398-1403
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2016
The simultaneous detection and accurate identification of hepatitis A virus (HAV) is critical in food safety and epidemiological studies to prevent the spread of HAV outbreaks. Towards this goal, a one-step duplex reverse-transcription (RT)-PCR method was developed targeting the VP1/P2B and VP3/VP1 regions of the HAV genome for the qualitative detection of HAV. An HAV RT-qPCR standard curve was produced for the quantification of HAV RNA. The detection limit of the duplex RT-PCR method was 2.8 × 101 copies of HAV. The PCR products enabled HAV genotyping analysis through DNA sequencing, which can be applied for epidemiological investigations. The ability of this duplex RT-PCR method to detect HAV was evaluated with HAV-spiked samples of fresh lettuce, frozen strawberries, and oysters. The limit of detection of the one-step duplex RT-PCR for each food model was 9.4 × 102 copies/20 g fresh lettuce, 9.7 × 103 copies/20 g frozen strawberries, and 4.1 × 103 copies/1.5 g oysters. Use of a one-step duplex RT-PCR method has advantages such as shorter time, decreased cost, and decreased labor owing to the single amplification reaction instead of four amplifications necessary for nested RT-PCR.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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