Maximum amount of the aminopeptidase M inhibitors produced by Streptomyces griseoplanus SL20209 in 500 ml-Erlenmeyer flask was accumulated after cultivation for 3 days at 28$\circ$C, thereafter the amount of inhibitors decreased slowly with a pH change to alkaline. Arabinose, xylose, mannose and soluble starch were good carbon sources for the production of the inhibitors. On the other hand, glucose was only good for the cell growth but potently inhibited the production of inhibitors. Natural organic nitrogen sources such as soybean meal, fish meal, gluten meal and peanut powder were good for the production of inhibitors, however, soytone, peptone and inorganic nitrogens such as NH$_{4}$C1 and NH$_{4}$NO$_{3}$ were poor. Inclusion of yeast extract (0.5%, w/v) or K$_{2}$HPO$_{4}$ (0.05%) into the production medium increased the production of inhibitors by accelerating cell growth. The production of inhibitors was slightly increased on the medium containing CaCO$_{3}$ (0.3%) and zeolite (0.5%), respectively. Optimal temperature and initial pH range for the production ot inhibitors were determined to be 28$\circ$C and 6.0-7.0, respectively. Employing two improved production media consisting of 3% arabinose or soluble starch, 2.5% soybean meal, 0.5% yeast extract, 0.05% K$_{2}$HP0$_{4}$, 0.1% CaCO$_{3}$ and 0.3% zeolite (pH 6.8), 1.8-fold increase in the amount of inhibitors was achieved, comparing with the basal medium used.
As a basic study to elucidate nutritional physiology and composition of synthetic medium of red rotting bacteria, Erwinia carotovora, of ginseng, the effects of hydrogen ion concentration, various kinds of carbon sources, nitrogen source, micrometallic salts and it's concentration on the gorwth of the bacteria were investigated and the results were as follows. Optimal pH in the basal medium for the growth of the bacteria was 6.5. After incubation the pH in culture media was neutralized. Among the various kinds of carbon sources, sucrose, glucose mannitol, but organic acids were not utilized effectively as nutrients. After incubation the pH turned acidic. Alanine as organic nitrogen sources nad ammonium sulfate as inorganic nitrogen promoted the growth, but L-valine and sodium nitrite were the least effective. Ferric chloride 1.0mg/dl and ferrous sulfate 100mg/dl were the most effective as micrometallic sources. Control and boric acid were the least effective. New synthetic medium based on the above results was follows ; Alanine 1.0g, $KH_2PO_4\;1.0g, \;sucrose\;30.0g, \;MgSo_4{\cdot}7H_2O\;0.5g, \;FeCl_3{\cdot}6H_2O\;1.0mg\;thiamine\;200{\gamma}g$, and distilled water 1000ml, pH6.5.
To increase the productivity of microbial chitosan from Rhizopus oligosporus ATCC22959, production medium and incubation conditions were optimized. The composition of the medium and the incubation conditions were like follows : starch+glucose(1:1) 3.0%, yeast extract 3.0%, KH2PO4 0.05%, MgSO4 0.01%, ZnSO4 0.002%, pH 5.0, incubation temperature 3$0^{\circ}C$, and incubation time 96hours. The productivity of chitosan of optimized medium was about 6.4 times higher than that of basal medium.
To elucidate the effect of sucrose on cell growth and anthocyanin production, 1, 3, 5, and 7% sucrose were applied to liquid MS basal medium supplemented with 0.5 mg/L BA + 0.1 and 1 mg/L 2,4-D. Higher sucrose concentration decreased the cell growth regardless of the hormonal composition. Cain in fresh weight was gradual, showing the peak at day 12 in culture, and then decreased. Anthocyanin content increased with sucrose concentration in the medium, and practically there was no difference in anthocyanin content between the two media differing in 2,4-D content. Sucrose concentration for appropriate anthocyanin production was 7%, while 5% was more suitable for increase in total anthocyanin content. At higher sucrose levels, anthocyanin content was high due to the cessation of the cell growth. Medium pH decreased at the early stage and gradually increased thereafter.
These studies were carried out to investigate optimal physological conditions for in vitro fertilization (IVF) of mouse ova. The unfertilized ova were obtained by superovulation from ICR mice of 4 to 6 weeks old. Tyrode's 280 solution was used as basal media, and pH and osmolality of basal media were adjusted with the supplementation of sodium bicarbonate and sodium chloride, respectively. The optimal pH, and osmolality of culture media and the optimum period of sperm preincubation were examined in fertilization in vitro of mouse ova and the subsequent culture in vitro of embryos. The pH range of media examined was designed from 6.5 to 7.5 with 0.2 interval and the range of osmolality from 250 to 370 mOsm with 20 interval, and the period of sperm preincubation examined was 30, 60, 120, and 180 minutes. The ova developed to 2-cell embryosafter 26hrs. of incubation with preincubated sperm were evaluated as in vitro fertilized ones. The results obtained were summarized as follows: 1. The percentage of in vitro fertilized ova was highest (64.7%) in media of pH 7.1 and lowest (38.0%) in pH 6.7. No significant difference in % fertilized ova was found from the media of pH 7.1 to 7.5. Compared with the result from pH 7.1 medium, the pollyspermy was increased signifciantly (p<0.05) in the media of pH over 7.5 and below 6.9;, and the % degenerated ova was significantly (p<0.05) increased in the media of pH below 6.9. 2. The percentage of in vitro fertilized ova was highest (69.4%) in media of osmolality 330 mOsm and lowest (47.9%) in osmolality 250 mOsm. No significant difference in % fertilized ova was found from the media of osmolality 310 to 350 mOsm. Compared with the result from osmolality 330 mOsm in medium, the polyspermy aws increased significantly(p<0.05) in the media of osmolality over 350 mosmol and blow 290 mOsm, and the % degenerated ova was significantly (P<0.05) increased in the media of osmolality below 290 mOsm. 3. The percentate of in vitro fertlilized ova was highest (62.7%) in media of period sperm preincubation 180 min. and lowest (40.4%) in sperm preincubation 30 minutes. No significant difference in % fertilized ova was found from the media of sperm preincubation 120 to 180 minutes. Compared with the result from sperm preincubation 180 minutes in medium, the polyspermy was low differ no significantly(P<0.05) in the media of period sperm preincubation, and the % degenerated ova was signifciantly(P<0.05) increased in the media of sperm presincubation below 60 minutes.
Anabaena variabilis ATCC 29413 grew in chromium (Cr) containing Chu-10 (basal) and nitrate-supplemented media, and the growth of the organism in $100{\mu}M$ chromium was found to be 50% of that in control medium. The growth in nitrate $({NO_3}^-)$ supplemented cultures was better as compared to cultures grown in basal medium. Free cells from basal and nitrate-supplemented media removed 5.2 and 7.4 nmol of chromium $mg^{-1}$protein in 8 h, respectively, from the medium containing $30{\mu}M$ chromium. The efficiency of chromium removal increased 7-fold in imidazole buffer (0.2 M, pH 7.0). A cell density equivalent to $100{\mu}g$ protein $ml^{-1}$ was found to be optimum for maximum Cr removal. Entrapment of cells in calcium-alginate beads did not affect the rate of Cr uptake by the cells. The efficiency of the laboratory-scale continuous flow bioreactor $(12.5{\times}2cm)$ loaded with alginate-immobilized cells (10 mg protein) and fed with $30{\mu}M$ chromium solution was compared at different flow rates. The efficiency of the bioreactor varied with flow rates. In terms of percent removal of Cr from influent, a flow rate of 0.1 ml $min^{-1}$ was found to be optimum for 6 h (54% Cr removal efficiency). Maximum amount of Cr (883 nmol) was removed by the cells in 3 h at a flow rate of 0.5 ml $min^{-1}$. The potential use of A. variabilis in removing Cr from industrial effluents is discussed.
To maximize astaxanthin (3,3'-dihydroxy-$\beta\beta$'carotene-44'-dione) production by high density Haematococcus pluvialis cultures, various, media were examined Among tested media, \`Hong Kong Medium and Modified Bolds Basal Medium showed the best result for cell growth ( $2.0$\times$10^{ 6}$cells /mL) and for astaxanthin content per cell (9.7 mg astaxanthin mg/g cell), respectively, Maximum astasanthin concentration of 6.1mL was obtained at pH 7.5, $20^{\circ}C$~$25^{\circ}C$ Deficiencies of nitrogen source($NaNO_3$ and proteose-peptone) found to simulate astaxanthin formation Relatively low light inten- sity of $60\mu$E ($\m^2$s) was sutiable for vegetative cell growth while higher light intensity was required for higher astaxanthin accumulation.
Park Jong-Young;Kim Han-Woo;Kim Hyun-Ju;Chun Ok-Ju;Jung Soon-Je;Choi Woobong;Lee Seon-Woo;Moon Byung-Ju
Research in Plant Disease
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v.11
no.2
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pp.158-161
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2005
Stenotrophomonas maltophilia BW-13 is a potent biocontrol agent to control crisphead lettuce bottom rot caused by Rhizoctonia solani. To define the optimum conditions for the mass production of the S. maltophilia BW-13, we have investigated optimum culture conditions and effects of various carbon sources on the bacterial growth. The optimum initial pH and temperature were determined as pH $6.0\~7.0 and $35^{\circ}C$, respectively. For the selection of effective carbon source for the mass production, we tested the low molecular carbon sources such as sucrose, glucose, lactose, maltose, manose and the high molecular carbon source such as dough conditioner, rice bran, corn starch, sweet potato starch. As the results, the addition of dough conditioner in a basal medium ($1.25\%\;K_{2}HPO_4,\;0.38\%\;KH_{2}PO_4,\;0.01\%\;MgSO_4{\cdot}7H_{2}O,\;0.5\%\;Yeast extract$) was able to achieve higher cell density and the antifungal activity than others. Therefore, the basal medium containing $3\%$ dough conditioner (named as dough conditioner medium) was finally selected the optimized media for the mass production of BW-13 strain.
Abdel-Fattah, Y.R.;El-Enshasy, H.A.;Soliman, N.A.;El-Gendi, H.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.19
no.4
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pp.378-386
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2009
A sequential optimization strategy, based on statistical experimental designs, is employed to enhance the production of alkaline protease by a Bacillus pseudofirmus local isolate. To screen the bioprocess parameters significantly influencing the alkaline protease activity, a 2-level Plackett-Burman design was applied. Among 15 variables tested, the pH, peptone, and incubation time were selected based on their high positive significant effect on the protease activity. A near-optimum medium formulation was then obtained that increased the protease yield by more than 5-fold. Thereafter, the response surface methodology(RSM) was adopted to acquire the best process conditions among the selected variables, where a 3-level Box-Behnken design was utilized to create a polynomial quadratic model correlating the relationship between the three variables and the protease activity. The optimal combination of the major medium constituents for alkaline protease production, evaluated using the nonlinear optimization algorithm of EXCEL-Solver, was as follows: pH of 9.5, 2% peptone, and incubation time of 60 h. The predicted optimum alkaline protease activity was 3,213 U/ml/min, which was 6.4 times the activity with the basal medium.
This experiment was conducted to investigate the effects of medium composition, physical condition and growth regulators on prothallus proliferation in 3 fern species belonging to Aspleniaceae (Asplenium incisum, Camptosorus sibiricus and Phyllitis scolopendrium). In all of the 3 species, the effective medium for prothallus proliferation was Murashige and Skoog's basal medium with 1% sucrose and pH 5.8. The optimum $NH_4^+:NO_3^-$ concentration ratio of protahllus proliferation was 20:40mM (1:2 ratio) in A. incisum and P. scolopendrium and 30:30mM (1:1 ratio) in C. sibiricus. However, agar content of medium did not affect the rate of prothallus proliferation. Among the selected 6 kinds of growth regulators (NAA, IAA, 2,4-D, BAP, kinetin and lip), cytokinins generally has a promotive effect, but auxins showed an inhibitory effect on prothallus growth.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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