nm23-H1 gene expression has been inversely correlated with tumor metastatic potential in certain tumors including melanomas, breast carcinomas, and hepatocellular carcinomas. However, its role with respect to the invasive behavior of central nervous system tumors has scarcely been addressed Because cell motility and invasion plays an essential role in metastatic dissemination, we have studied whether motile human glioma cell(U87MG) transfected with nm23-H1 complementary DNA have any alterations in their ability to migrate and invade. There was no significant changes in the shape and size of the cells following nm23-H1 transfection. The role of nm23-H1 in glioma migration and invasion have been evaluated by in vitro simple scratch technique and brain slice invasion model Basal migration ability of nm23-H1 transfectants cell(U87MG-pEGFP-nm23) were lesser than U87MG. Accordingly, U87MG-pEGFP-nm23 didn't migrate away apparently from the tumors implanted site comparing U87MG in brain slice invasion model. These results suggest that nm23-H1 may play an important role in suppressing the human glioma migration and invasion.
Objective: To study the expression of the mismatch repair proteins hMSH2 and nm23 in sporadic colorectal cancer, determine any inter-relationship, and further investigate any clinical significance. Methods: Expression of hMSH2 and nm23 proteins was assessed in 87 colorectal cancer tissues by SP immunohistochemistry, with analysis of survival using follow-up data. Results: In the sporadic colorectal cancer tissues, nm23 protein expression appeared independent of the histological type (P>0.05), but correlated with the invasion depth and lymphatic metastasis (P<0.05). In contrast, hMSH2 protein expression was not significantly correlated with these clinicopathologic features (P>0.05), although it positively correlated with that of nm23 protein in the sporadic colorectal cancers (rs=0.635, P<0.05). Combined expression of the two was found to be related with invasion depth, lymphatic metastasis and prognosis of sporadic colorectal cancer (P<0.05). Conclusion: nm23 protein level was related with the degree of malignancy, and could be used as an index to predict the invasion and metastasis potential. The expression of hMSH2 protein is positively correlated that of nm23 protein, and the combined expression of the two has certain guiding significance for the prognosis of sporadic colorectal cancer.
A genomic library of biphenyl-degrading strain Comamonas sp. SMN4 was constructed by using the cosmid vector pWE15 and introduced into Escherichia coli. Of 1,000 recombinant clones tested, two clones that expressed 2,3-dihydroxybiphenyl 1,2-dioxygenase activity were found (named pNB 1 and pNB2). From pNB1 clone, subclone pNA210, demonstrated 2,3-dihydroxybiphenyl 1,2-dioxygenase activity, is isolated. 2,3-Dihydroxybiphenyl 1,2-dioxygenase (23DBDO, BphC) is an extradiol-type dioxygenase that involved in third step of biphenyl degradation pathway. The nucleotide sequence of the Comamonas sp. SMN4 gene bphC, which encodes 23DBDO, was cloned into a plasmid pQE30. The His-tagged 23DBDO produced by a recombinant Escherichia coli, SG 13009 (pREP4)(pNPC), and purified with a Ni-nitrilotriacetic acid resin affinity column using the His-bind Qiagen system. The His-tagged 23DBDO construction was active. SDS-PAGE analysis of the purified active 23DBDO gave a single band of 32 kDa; this is in agreement with the size of the bphC coding region. The 23DBDO exhibited maximum activity at pH 9.0. The CD data for the pHs, showed that this enzyme had a typical a-helical folding structures at neutral pHs ranged from pH 4.5 to pH 9.0. This structure maintained up to pH 10.5. However, this high stable folding strucure was converted to unfolded structure in acidic region (pH 2.5) or in high pH (pH 12.0). The result of CD spectra observed with pH effects on 23DBDO activity, suggested that charge transition by pH change have affected change of conformational structure for 23DBDO catalytic reaction. The $K_m$ for 2,3-dihydroxybiphenyl, 3-metylcatechol, 4-methylcatechol and catechol was 11.7 $\mu$M, 24 $\mu$M, 50 mM and 625 $\mu$M.
Mg-23.5 wt%Ni-xwt%Cu (x = 2.5, 5 and 7.5) samples for hydrogen storage were prepared by melt spinning and crystallization heat treatment from a Mg-23.5 wt%Ni-5 wt%Cu alloy synthesized by the gravity casting method. They were then ground under $H_2$ to obtain a fine powder. Among these samples the Mg-23.5Ni-2.5Cu sample had the highest hydriding and dehydriding rates after activation. The Mg-23.5Ni-2.5Cu sample absorbed 3.59 and 4.01 wt%H for 10 and 60 min, respectively, at 573K under 12 bar $H_{2}$. The activated 88(87.5Mg-10Ni-2.5Cu)-$5Nb_{2}O_{5}-7NbF_{5}$ sample absorbed 2.93 wt%H for 10 min, and 3.14 wt%H for 60 min at 573K under 12 bar $H_{2}$.
퀴놀론계 항균제인 nalidixic acid(OA), piromidic acid(PA), oxolinic acid(OA)를 사육수온($13{\pm}1.5^{\circ}C$, $23{\pm}1.5^{\circ}C$)에 따라서 넙치(평균체중 700 g)에 60 mg/kg의 농도로 1회 경구 투여한 다음, 경시적인 혈청내 잔류농도를 분석하였다. 수온이 $23{\pm}1.5^{\circ}C$의 경우, 투여 후 NA는 10시간째 ($11.55{\mu}g/m\ell$), PA는 24시간째($3.79{\mu}g/m\ell$), OA는 30시간째($1.12{\mu}g/m\ell$)에 각각 최대혈중농도에 도달하였다. 수온이 $13{\pm}1.5^{\circ}C$의 경우, 투여 후 NA는 10시간째($6.36{\mu}g/m\ell$), PA는 15시간째($1.4{\mu}g/m\ell$), OA는 30시간째($1.01{\mu}g/m\ell$)에 각각 최대혈중농도에 도달하였다. NA와 PA의 넙치 혈중내 흡수정도는 수온 $13{\pm}1.5^{\circ}C$보다 수온 $23{\pm}1.5^{\circ}C$에서 매우 높게 나타났으며, NA의 넙치 혈중내 소실정도는 수온 $13{\pm}1.5^{\circ}C$보다 수온 $23{\pm}1.5^{\circ}C$에서 두드러지게 빨랐다. 한편 OA의 넙치 혈중내 흡수 및 소실정도는 사육수온에 크게 영향을 받지 않는 것으로 나타났다. NA 및 PA는 one-compartment model, OA는 two-compartment model로 해석하여 WinNonlin program을 이용, 약물동태학적 매개변수(parameter)를 조사하였다. 수온이 $23{\pm}1.5^{\circ}C$의 경우, 혈장농도-시간곡선하 면적(AUC)은 NA, PA, OA가 각각 258.26, 248.12 및 $138.20{\mu}g{\cdot}h/m\ell$, 혈중최고농도의 도달시간($T_{max}$)은 10.67, 21.15 및 23.95 h, 혈중최고농도($C_{max}$)는 8.91, 3.09 및 $1.06{\mu}g/m\ell$로 계산되었다. 수온이 $13{\pm}1.5^{\circ}C$의 경우, AUC는 NA, PA, OA가 각각 341.45, 103.89 및 $159.10{\mu}g{\cdot}h/m\ell$, 혈중최고농도의 도달시간은 7.72, 12.89 및 28.03 h, 혈중최고농도는 6.23, 1.22 및 $1.02{\mu}g/m\ell$로 계산되었다.
The aim of this study was to investigate the cytotoxic effect and its mechanism on Radix Aconiti(RA) extract in lung cancer cell lines. RA extract treatment decreased the cell viability in a dose-dependent fashions in lung cancer cells including A549, H460, H23 and H157 cells. Many investigators reported that A549 and H460 cells expressed wild-type p53, but H23 and H157 cells preserved mutated p53. After treatment with RA extract in A549 and H460 cells, we measured the expression of p53 protein levels using Western blot. analysis. In both cells treated with RA extracts, p53 protein expressions were increased in a dose-dependent manner. In our experiments, RA extracts also have cytotoxic effects in H23 and H157, which have mutated p53. Treatment with RA extract decreased bcl-2 protein expressions in both cells. These results suggest that RA extracts have cytotoxic effects via p53 expression increase and bcl-2 inhibitable pathways in A549, H460 cells and H23, H157 cells, respectively.
The aim of this study was to investigate the cytotoxic effect and its mechanism on Radix Aconiti(RA) extract in lung cancer cell lines. RA extract treatment decreased the cell viability in a dose-dependent fashions in lung cancer cells including A549, H460, H23 and H157 cells. Many investigators reported that A549 and H460 cells expressed wild-type p53, but H23 and H157 cells preserved mutated p53. After treatment with RA extract in A549 and H460 cells, we measured the expression of p53 protein levels using Western blot. analysis. In both cells treated with RA extracts, p53 protein expressions were increased in a dose-dependent manner. In our experiments, RA extracts also have cytotoxic effects in H23 and H157, which have mutated p53. Treatment with RA extract decreased bcl-2 protein expressions in both cells. These results suggest that RA extracts have cytotoxic effects via p53 expression increase and bcl-2 inhibitable pathways in A549, H460 cells and H23, H157 cells, respectively.
The objective of this study was to examine the effect of in vitro culture media on embryonic development of in vitro-matured (IVM) oocytes after parthenogenetic activation (PA) in pigs. Immature pig oocytes were matured in TCM-199 supplemented with porcine follicular fluid, cysteine, pyruvate, EGF, insulin, and hormones for the first 22 h and then further cultured in hormone-free medium for an additional 22~26 h. IVM oocytes were activated by electric pulses and cultured in porcine zygote medium-3 (PZM-3) and North Carolina State University-23 supplemented with essential and non-essential amino acids (NCSU-23aa). These media were further modified by supplementing 2.77 mM myo-inositol, 0.34 mM trisodium citrate, and $10{\mu}M$${\beta}$-mercaptoethanol (designated as mPZM-3 and mNCSU-23aa, respectively). Culture of PA embryos in mPZM-3 significantly increased development to the blastocyst stage than culture in NCSU-23aa (36.2% vs. 24.8%, p<0.05). Modified PZM-3 showed a significantly higher blastocyst formation than NCSU-23aa in both groups of embryos that were activated at 44 h and 48 h of IVM (51.0% vs. 35.5% and 49.0% vs. 34.2% in oocytes activated at 44 h and 48 h of IVM, respectively). Irrespective of the follicle diameter where oocytes were collected, embryonic development to the blastocyst stage was increased (p<0.05) by the culture in mPZM-3 compared to culture in NCSU-23aa (25.9% vs. 34.2% and 32.9% vs. 44.8% in embryos derived from small and medium size follicles, respectively). Our results demonstrated that culture media had significant effect on preimplantation development PA embryos and that mPZM-3 was superior to mNCSU-23 in supporting development to the blastocyst stage in pigs. This beneficial effect of mPZM-3 on embryonic development was not impaired by other factors such as time of oocyte activation and origin of immature oocytes (small and medium size follicles).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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