Kim, Jung-Eun;Tran, Phuong Lan;Ko, Jae-Min;Kim, Sa-Rang;Kim, Jae-Han;Park, Jong-Tae
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제31권1호
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pp.43-50
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2021
A newly cloned 4-α-glucanotransferase (αGT) from Deinococcus geothermalis and two typical bacterial αGTs from Thermus scotoductus and Escherichia coli (MalQ) were investigated. Among 4 types of catalysis, the cyclization activity of αGTs that produces cycloamylose (CA), a valuable carbohydrate making inclusion complexes, was intensively studied. The new αGT, DgαGT, showed close protein sequence to the αGT from T. scotoductus (TsαGT). MalQ was clearly separated from the other two αGTs in the phylogenetic and the conserved regions analyses. The reaction velocities of disproportionation, cyclization, coupling, and hydrolysis of three αGTs were determined. Intriguingly, MalQ exhibited more than 100-fold lower cyclization activity than the others. To lesser extent, the disproportionation activity of MalQ was relatively low. DgαGT and TsαGT showed similar kinetics results, but TsαGT had nearly 10-fold lower hydrolysis activity than DgαGT. Due to the very low cyclizing activity of MalQ, DgαGT and TsαGT were selected for further analyses. When amylose was treated with DgαGT or TsαGT, CA with a broad DP range was generated immediately. The DP distribution of CA had a bimodal shape (DP 7 and 27 as peaks) for the both enzymes, but larger DPs of CA quickly decreased in the DgαGT. Cyclomaltopentaose, a rare cyclic sugar, was produced at early reaction stage and accumulated as the reactions went on in the both enzymes, but the increase was more profound in the TsαGT. Taken together, we clearly demonstrated the catalytic differences between αGT groups from thermophilic and pathogenic bacteria that and showed that αGTs play different roles depending on their lifestyle.
동백나무의 잎과 꽃의 식용자원화를 위한 일환으로서 동백의 부위별 성분분석, DPPH radical 소거능에 의한 항산화활성, 및 항미생물 활성을 조사하였다. 수분 함량은 꽃과 어린 잎 부위에서 70% 이상의 함유율을 보였고, 조단백질의 함량은 꽃을 제외한 나머지 부위에서 3%이상이었으며, 지방 함량은 씨부위에서 23.08%로 많이 함유되어 있었다. 회분의 함량은 수피 부위에서 2.97%와 탄수화물의 함량은 에서 높게 나타났다. 항산화활성은 어린잎(RC$_{50}$=30.37$\mu\textrm{g}$/mL), 꽃봉오리 (RC$_{50}$=52.97$\mu\textrm{g}$/mL)와 꽃(RC$_{50}$=59.48 $\mu\textrm{g}$/mL)이 높은 활성을 보였으며 합성 항산화제인 BHT의 RC$_{50}$ 값이 584.04$\mu\textrm{g}$/mL의 활성 보다 높은 항산화 활성을 가지고 있음을 확인하였다. 동백을 각 부위별로 추출하여 병원성균과 식중독균, 식품과 관련이 있는 세균 및 효모 등 4균주에 대하여 항미생물 활성을 검토한 결과, 동백의 수피 부위가 P. vulgaris와 B. subtilis에 대한 높은 항균성을 나타내었으며, 특히, 어린잎은 C. albicans와 T. beigelii 모두에 대하여 매우 강한 활성을 나타내었다.을 나타내었다.
Introduction: Identifying menton (Me) on posteroanterior cephalograms and three-dimensional (3D) cone-beam computed tomography (CBCT) images is difficult, because the midpoint of the symphyseal area is not identifiable after the mandibular symphysis fuses at an early age. The aim of this study was to evaluate the reliability of the identification of the genial tubercle (GT) in patients with mandibular asymmetry and to compare it with that of the traditional landmark, Me. Methods: The samples comprised 20 CBCT images of adults with mandibular asymmetry. Two examiners performed the identifications and measurements. Me and GT were marked, and the anteroposterior, vertical, and transverse distances to the three reference planes were measured on 3D-reconstructed CBCT images. The intra- and inter-examiner reliability of landmark identification of Me and GT were assessed using the intraclass correlation coefficient (ICC) and Bland-Altman plots. Results: The Me and GT landmarks showed excellent reliability ($ICC{\geq}0.993$) three-dimensionally. In the transverse evaluation, the ICC values of the GT (range, 0.997-0.999) tended to be slightly higher than those of Me (range, 0.993-0.996). In the Bland-Altman plots for the two separate assessments, Me showed a maximum error of 1.76 mm in the transverse direction, whereas the GT showed a maximum error of 0.96 mm in the 95% limit. Conclusions: Our results suggest that both Me and GT are clinically reliable and equally useful landmarks for the evaluation of mandibular asymmetry on CBCT images.
This research aims to investigate the behavior of organic matter that causes bacterial re-growth and the formation of disinfectant by-products such as THM in water treatment, and to optimize conditions for a more efficient and conventional water facility. THM removed 51 % and 12 % through coagulation/sedimentation and filtration using a selected conventional system. In this experiment, the removal ratio of DOC was highest at 68 % when the Gt value was 42,000 and lowest at 41 % when the Gt value was 30,000. 77-84 % of total DOC was removed during coagulation/sedimentation, and 15-23 % was removed during filtration. When Gt values were between 30,000 and 66,000, over 50 % of high molecular matter above 10 K during coagulation/sedimentation was removed. Turbidity removed 98 % when the G1 value was 66,000. As the Gt value increased, the turbidity removal ratio increased. Turbidity removed over 20 % during the filtration process.
A gene (GT-SM3B) encoding a thermostable secreted oligoendopeptidase (GT-SM3B) was cloned from the thermophile Geobacillus thermoleovorans DSM 15325. GT-SM3B is 1,857 bp in length and encodes a single-domain protein of 618 amino acids with a 23-residue signal peptide having a calculated mass of 67.7 kDa after signal cleavage. The deduced amino acid sequence of GT-SM3B contains a conservative zinc metallopeptidase motif (His400-Glu401-X-XHis404). The described oligopeptidase belongs to the M3B subfamily of metallopeptidases and displays the highest amino acid sequence identity (40.3%) to the oligopeptidase PepFBa from mesophilic Bacillus amyloliquefaciens 23-7A among the characterized oligopeptidases. Secretory production of GT-SM3B was used, exploiting successful oligopeptidase signal peptide recognition by Escherichia coli BL21 (DE3). The recombinant enzyme was purified from the culture fluid. Homodimerization of GT-SM3B was determined by SDS-PAGE. Both the homodimer and monomer were catalytically active within a pH range of 5.0–8.0, at pH 7.3 and 40℃, showing the Km, Vmax, and kcat values for carbobenzoxy-Gly-Pro-Gly-Gly-Pro-Ala-OH peptidolysis to be 2.17 ± 0.04 × 10-6 M, 2.65 ± 0.03 × 10-3 µM/min, and 5.99 ± 0.07 s-1, respectively. Peptidase remained stable at a broad pH range of 5.0–8.0. GT-SM3B was thermoactive, demonstrating 84% and 64% of maximum activity at 50℃ and 60℃, respectively. The recombinant oligopeptidase is one of the most thermostable M3B peptidase, retaining 71% residual activity after incubation at 60℃ for 1 h. GT-SM3B was shown to hydrolyze a collagenous peptide mixture derived from various types of collagen, but less preferentially than synthetic hexapeptide. This study is the first report on an extracellular thermostable metallo-oligopeptidase.
Journal of Advanced Marine Engineering and Technology
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제36권1호
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pp.40-50
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2012
폐열의 활용은 연료전지시스템의 효율의 제고에 중요하다. SOFC/GT/ST 하이브리드시스템은 연료전지시스템 폐열의 전력화에 가스터빈 및 증기터빈을 활용하는 방식이다. 본 논문은 SOFC/GT/ST 하이브리드시스템에 대한 스택의 작동온도와 전류밀도, 가스터빈의 압력비가 시스템의 성능에 미치는 영향 등을 시뮬레이션을 통하여 검토한 것이다. 그 결과로 SOFC/GT/ST 하이브리드시스템은 단독 SOFC시스템과 비교하여 효율의 급격한 변화를 완화시키며 또한 효율을 크게 제고시키고 있음을 확인하였다.
본 연구에서는 현재까지 화장품 소재로써 다양한 연구가 진행되지 않은 현지초 추출물의 효능평가 및 항염 관련 활성 연구를 진행하였다. 현지초 추출물의 항산화능을 확인하기 위해 전자공여능 및 ABTS+ 라디칼 소거능을 측정한 결과, 각각 50 ㎍/ml의 농도에서 91%, 94%를 나타내어 항산화능이 우수함을 확인할 수 있었다. 미백활성 측정을 위해 tyrosinase 저해활성 측정을 실시하였으며 최고 농도인 1,000 ㎍/ml에서 24.8%의 저해능이 나타났다. 현지초 추출물의 주름개선 활성을 알아보기 위해 elastase 및 collagenase 저해활성 측정을 실시하였으며 그 결과, 각각 최고 농도인 1,000 ㎍/ml에서 30.6%, 90%의 저해능이 나타났고 collagenase 저해활성에서 우수한 저해능을 확인할 수 있었다. 세포 실험 진행을 위해 현지초 추출물 처리에 따른 대식세포 Raw 264.7의 생존율을 MTT assay에 의거하여 진행하였으며 100 ㎍/ml의 농도에서 83.6% 이상의 세포 생존율을 나타내어 이하의 세포 관련 실험 진행은 100 ㎍/ml 이하의 농도의 현지초 추출물을 가하여 실험을 실시하였다. NO assay에 의하여 현지초 추출물 처리에 따른 NO 생성 저해 활성을 측정한 결과, 100 ㎍/ml의 농도에서 74.9%의 저해율을 확인하였다. 단백질 발현 억제능을 알아보기 위해 western blot을 진행하였으며 현지초 추출물은 COX-2 및 iNOS 두 인자 모두 농도의존적으로 단백질 발현량이 저해됨을 확인할 수 있었다. 이러한 결과들에 의해 현지초 추출물은 항염 관련 기능성 화장품 소재로써 활용 가능성이 있다고 사료된다.
토양에서 분리한 방선균류(actinomycetes) GT103 균주의 배양여액 및 균체추출물은 담배의 주요 병원균인 담배 줄기속마름병균(Erwinia carotovora subsp. carotovora), 담배 탄저병균(Colletotrichum tabacum), 담배역병균(Phytophthora nicotianae var. nicotianae)등에 강한 항균활성을 보였다. 항균활성물질은 용매 추출, silica gel chromatography, HPLC 등을 실시하여 분리.정제하였으며 UV, IR, FAB-MS, \ulcornerH-NMR, \ulcornerC-NMR 분석결과 actinomycin group의 펩타이드계 항생 물질인 actinomycin C\ulcorner로 동정되었다. 이 활성물질의 담배 탄저병에 대한 방제효과는 50$\mu\textrm{g}$/ml 농도에서 100%, 10$\mu\textrm{g}$/ml 농도에서 90%의 방제효과를 보였다.
본 연구는 추출용매에 따른 세잎쥐손이풀 추출물의 중성지방 조절에 대한 논문으로 3T3-L1 지방전구세포를 이용해 지방세포로 분화유도한 뒤 lipid accumulation, triglyceride contents, PPARγ, C/EBPα, FAS, SCD-1 및 AMPK 단백질 발현을 확인하였다. 실험결과 다섯가지 조건의 세잎쥐손이풀 추출물 중 NG-GT-T3L lipid accumulation과 triglyceride contents의 가장 높은 억제 효능을 확인하였다. NG-GT-T3L 추출물의 세포내 지방 축적 억제는 지방세포 내 adipogenesis와 lipogenesis를 조절하는 효소 조절을 통해 나타난 결과로 판단된다. 따라서 세잎쥐손이풀 추출물은 PPARγ, C/EBPα, FAS, SCD-1를 억제시키고, AMPK를 증가시켜 세포내 중성지방을 조절함으로서 체지방 감소 후보 소재로의 사용이 가능할 것으로 사료된다.
Park, Seok;Jung, Se-Yeon;Park, Seong-Hwan;Ko, Sung-Ryong;Hyewon Rhim;Park, Chul-Seung;Nah, Seung-Yeol
Journal of Ginseng Research
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제24권4호
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pp.168-175
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2000
Xenopus oocytes를 이용하여 인삼의 유효 성분으로 알려진 Ginseng total saponin(GTS)의 신호 전달 기작을 two electrode voltage clamp 방법을 이용하여 연구하였다. GTS는 세포 바깥에 처리했을 때 -2OmV보다 더 positive한 voltage에서 커다란 outward current를 유도하였다. 그러나, 세포 안쪽에 GTS를 injection할 경우 아무런 효과가 없는 것으로 나타났다. GTS처리에 의한 outward current유발 효과는 GTS 투여 용량에 의존적인 것으로 나타났다(EC$_{50}$ : 4.4 $\mu\textrm{g}$/ml). GTS의 작용은 $Ca^{2+}$-activated Cl- channel blocker인 niflumic acid에 의하여 차단되었다. 칼슘 chelator인 BAPIA와 IP$_3$ 수용체 길항제인 heparin을 세포내 injection에 의하여 차단되었다. 또한 active phospholipase C inhibitor(PLC)인U-73122를 세포 바깥에 전처리할 경우에도 GTS의 작용이 부분적으로 억제되는 것으로 나타났다. 백일해 독소를 전처리할 경우GTS의 작용은 억제되지 않은 것으로 나타났으나, GTP analog인 GTP${\gamma}$S를 세포내 injection할 경우 GTS의 작용은 억제되는 것으로 나타났다. 이러한 연구 결과는 GTS가 oocytes세포막 성분과 상호 작용에 의하여 $Ca^{2+}$-activated Cl- channel이 열리도록 하고, 이 과정에 PLC활성 및 백일해 독소에 민감하지 않은 G단백질활성 및 IP3에 민감한 세포내 $Ca^{2+}$-activated로부터 칼슘 방출을 유도하는 것으로 나타났다났다
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[게시일 2004년 10월 1일]
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