본 연구에서는 돼지 로타바이러스의 혈청형 A, B 및 C를 동시에 진단할 수 있는 RT-PCR 기법을 개발하였다. 각각의 혈청형에 특이적인 primer를 이용하여 RT-PCR 기법으로 분변시료에서 직접 바이러스 동정을 실시한 결과, 23건의 로타바이러스 감염 분변 시료에서 13건이 혈청형 A, 3건이 혈청형 B, 2건이 혈청형 C로 나타나 국내에서도 A, B 및 C형의 돼지 로타바이러스가 공히 발생하고 있음을 확인하였으며, 발생분포는 외국의 예와 유사하였다. 이 RT-PCR기법은 돼지 로타바이러스의 주요 혈청형인 A, B 및 C형의 동시감별진단법으로 이용될 수 있을 것으로 판단된다.
Proceedings of the Korean Society of Veterinary Pathology Conference
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2002.11a
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pp.143-143
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2002
돼지 장염 바이러스를 동시에 감별 진단할 수 있는 새로운 진단법인 oligonicleotide microarray 기법을 돼지 설사 분변을 대상으로 바이러스 감염을 진단하고 기존의 진단법으로 널리 사용되고 있는 RT-PCR과 진단기법의 민감도와 특이도를 비교하고자 하였다. 32개 양돈장, 102 예의 포유 및 이유자돈의 설사분변에서 microarray를 이용한 검사결과 Transmissible gastroenteritis virus (TGEV) 9.8%, porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) 28%, (porcine enteric calicivirus (PECV) 18.6%, porcine rotavirus (PRV) group A 6.9%, PRY group C 1% 의 검출률을 확인하였다. 또한 RT-PCR 기법과의 비교에서도 100%의 민감도와 72.2%의 특이도를 보였으며 agreement는 85.3%, kappa value 0.71로 우수한 진단기법임을 확인하였다. 이를 통해 microarray 진단법은 RT-PCR 후의 전기영동 과정과 민감도를 높이기 위해 수행되는 nested PCR 수행의 번거러움을 없애면서 정확한 감별진단을 수행할 수 있는 진단 기법임을 확인하였다.
Proceedings of the Korean Society of Veterinary Pathology Conference
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2002.11a
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pp.142-142
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2002
돼지의 주요 장염 유발 바이러스인 돼지 전염성 위장염 바이러스 (transmissible gastroenteritis virus; TGEV), 돼지 유행성 설사증 바이러스 (porcine epidemic diarrhea virus; PEDV), 돼지 칼리시 바이러스 (porcine enteric calicivirus; PECV), 돼지 로타바이러스 A 형과 C 형 (porcine rotavirus; PRY, group A and C)을 동시에 감별 진단 할 수 있는 신속하고 정확한 oligonucleotide microarray 진단법을 개발하였다. 이 진단법은 유리슬라이드에 각각의 바이러스에 특이적인 부위에서 제작된 oligonucleotide probe를 찍은 DNA chip을 제작하여 여기에 각각의 바이러스를 역전사하고 cy5-dCTP를 포함한 multiplex PCR을 수행한 다음 hybridization 하였다. 이후 hybridization 결과는 fluorescence scanner를 이용하여 확인하였다. 이 새로운 microarray system은 RT-PCR과 같은 기존의 진단방법보다 소량의 바이러스를 민감하게 검사할 수 있을 뿐 아니라 hybridization을 통해 검사결과의 정확성을 확인할 수 있었다. 따라서 본 연구에서 개발한 microarray system은 돼지의 설사 유발 바이러스를 진단하는데 매우 유용한 진단 방법임을 확인하였다.
This study was performed to investigate infectious gastrointestinal diseases in 115 Korean cats (83 indoors and 32 outdoors) with digestive signs such as diarrhea, anorexia or abdominal distention. Detection of infectious pathogens was analyzed using real-time PCR. As a result, 85 of 115 Korean cats were detected with feline corona virus (FCoV), feline parvo virus, Group A rotavirus, Clostridium perfringens (C. perfringens), Campylobacter coli (C. coli), Campylobacter jejuni, enterotoxigenic Escherichia coli, enteropathogenic Escherichia coli, Salmonella spp., Tritrichomonas foetus, Cyclospora cayetanensis, and Giardia lamblia. The most frequently detected pathogen was C. perfringens (52 cats, 61.2%), followed by FCoV (43 cats, 50.6%) and C. coli (16 cats, 18.8%). Also, single infection was the most common (43 cats), followed by double infection in 31 cats, triple infection in 7 cats, and quadruple infection in 4 cats. There was no significant relationship between pathogen detection and age, gender, living environment, weather, and diarrhea. However, there was a significant difference between the age group under 1 year and the age group 1~7 (P value<0.05). In this study, cats with suspected gastrointestinal infection were randomly evaluated, and other factors that could affect pathogen detection were insufficiently considered. For this reason, additional epidemiological investigations with a larger number of cats and sufficient consideration of the causes that may affect the results are needed. Nevertheless, it is thought that this study can also provide valuable information on gastrointestinal pathogens in Korean cats.
An oligonucleotide microarray system was developed for the simultaneous detection of porcine epidemic diarrhea virus, transmissible gastroenteritis virus, porcine enteric calicivirus, porcine group A and C rotavirus. RNAs of the reference viruses and porcine diarrhea samples were extracted and amplified using one-step multiplex RT-PCR in the presence of cyanine 5-dCTP and hybridized on the microarray chip that spotted the virus-specific oligonucleotides. This system were approximately 10-to 100-fold higher in sensitivity than conventional RT-PCR, and the assay time was less than 3 hours. The relative sensitivity and specificity were 92% and 72.2%, respectively, based on 102 porcine diarrhea samples using RT-PCR as gold standard. These results suggested that the oligonucleotide microarray system in this study be probably more reliable and reproducible means for detecting porcine enteric viruses and that it could be of substantial use in routine diagnostic laboratories.
Infectious calf diarrhea is one of the most significant diseases of neonatal calves. This study is conducted to identify the prevalence of pathogens in calf diarrhea for 2 years. A total of 544 feces samples from Korean native beef calves were obtained to investigate selected seven pathogens causing calf diarrhea: bovine rotavirus, bovine coronavirus, Cryptosporidium parvum, bovine viral diarrhea virus, Eimeria species, Escherichia coli K99, and Salmonella species. The presence of diarrhea, the number and species of detected pathogens, and the calves' ages were analyzed using various statistical methods depending on the case. Of the 544 calves, 340 calves (62.5%) had normal feces and 204 calves (37.5%) had diarrhea. The presence of pathogens was significantly associated with diarrhea (p < 0.01) and fecal scores and the number of detected pathogens showed a significant linear trend (p < 0.001). Of the 7 target pathogens, 6 were detected in samples, but only C. parvum (p = 0.001) and bovine rotavirus (p < 0.001) were found at significantly higher rates in diarrheic calves than in non-diarrheic calves. Only Eimeria spp. showed a significant linear trend between the detection rate of the pathogen and the age groups (p < 0.05).
Purpose: To detect major acute gastroenteritis virus (rotavirus, norovirus, astrovirus, and enteric adenovirus) and non-enteric type of adenovirus (AdV) in the stools of intussusception patients and to investigate the clinical role of detected viruses. Methods: From March 2012 to February 2013, major acute gastroenteritis virus and non-enteric type of AdV were isolated from stool samples that collected from 44 patients treated for intussusception in Chungnam National University Hospital. Patients were divided according to age and isolated virus. Results: Virus was detected in 28 (63%) stool specimens. The virus detection rate was significantly lower in patients aged under 12 months (p = 0.04). Twenty-two patients (78.6%) had non-enteric adenovirus, 4 (14.3%) had norovirus, 1 (3.6%) had sapovirus, and 1 (3.6%) had astrovirus. AdV subgroup C (AdV 1, 2, 5, and 6) comprised the majority with 20 cases (90.9%). A monthly increment-and-decrement pattern of intussusception was similar to that of viral detection in the stool samples. Enema reductions were successful in 39 patients and surgical manual reductions were performed in 5 patients. Virus was detected in 24 patients (61.5%) of enema reduction group and 4 patients (80.0%) of surgical manual reduction group. All of the detected viruses were non-enteric adenovirus subgroup C (AdV 1, 5, and 6) in surgical reduction patients. Conclusions: The virus detection rate was high in the stools of intussusception patients. The pattern of seasonal intussusception occurrence rate was parallel with seasonal these viral detection rate in the stool samples. These findings suggest that viral infection plays an important role in the development of intussusception and further research is warranted.
Purpose: The etiology of acute gastroenteritis (AGE) has changed since the introduction of the rotavirus vaccination. The aim of this study was to clarify which common pathogens, both bacterial and viral, are currently causing AGE in infants. Methods: Infants with acute diarrhea were enrolled. We tested for 10 bacterial pathogens and five viral pathogens in stool specimens collected from infants with AGE. The clinical symptoms such as vomiting, mucoid or bloody diarrhea, dehydration, irritability, and poor oral intake were recorded, and laboratory data such as white blood cell count and C-reactive protein were collected. The clinical and laboratory data for the cases with bacterial pathogens and the cases with viral pathogens were compared. Results: Of 41 total infants, 21 (51.2%) were positive for at least one pathogen. Seventeen cases (41.5%) were positive for bacterial pathogens and seven cases (17.1%) were positive for viral pathogens. Staphylococcus aureus (13 cases, 31.7%) and Clostridium perfringens (four cases, 9.8%) were common bacterial pathogens. Norovirus (five cases, 12.2%) was the most common viral pathogen. Fever and respiratory symptoms were common in the isolated viral infection group (p=0.023 and 0.044, respectively), whereas other clinical and laboratory data were indistinguishable between the groups. Conclusion: In our study, S. aureus (41.5%) and norovirus (12.2%) were the most common bacterial and viral pathogens, respectively, among infants with AGE.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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