As the complete genomic sequences accumulate, the use of global techniques became possible. DNA microarray is a powerful technology for measuring global mRNA levels. This method, however, does not provide information on post-translational modifications of proteins. In addition, mRNA levels do not strictly correlate with protein concentrations, especially for lower-abundance proteins. Therefore, studies at the level of transcription are not sufficient to understand cellular activity. Proteomic techniques to analyze protein expression and function at the large-scale have been developed and used. This review introduces a simple explanation for proteomic analysis and examples of how proteomics is applied in cell biology.
Golgi SNAP receptor complex 1 (GS28) has been implicated in vesicular transport between intra-Golgi networks and between endoplasmic reticulum (ER) and Golgi. Additional role(s) of GS28 within cells have not been well characterized. We observed decreased expression of GS28 in rat ischemic hippocampus. In this study, we examined the role of GS28 and its molecular mechanisms in neuronal (SK-N-SH) cell death induced by hydrogen peroxide ($H_2O_2$). GS28 siRNA-transfected cells treated with $H_2O_2$ showed a significant increase in cytotoxicity under glutathione (GSH)-depleted conditions after pretreatment with buthionine sulfoximine, which corresponded to an increase of intracellular reactive oxygen species (ROS) in the cells. Pretreatment of GS28 siRNA-transfected cells with p38 chemical inhibitor significantly inhibited cytotoxicity; we also observed that p38 was activated in the cells by immunoblot analysis. We confirmed the role of p38 MAPK in cotransfected cells with GS28 siRNA and p38 siRNA in the cell viability assay, flow cytometry, and immunoblot. Involvement of apoptotic or autophagic processes in the cells was not shown in the cell viability, flow cytometry, and immunoblot analyses. However, pretreatment of the cells with necrostatin-1 completely inhibited $H_2O_2$-induced cytotoxicity, ROS generation, and p38 activation, indicating that the cell death is necroptotic. Collectively these data imply that $H_2O_2$ induces necroptotic cell death in the GS28 siRNA-transfected cells and that the necroptotic signals are mediated by sequential activations in RIP1/p38/ROS. Taken together, these results indicate that GS28 has a protective role in $H_2O_2$-induced necroptosis via inhibition of p38 MAPK in GSH-depleted neuronal cells.
The purpose of this study was to investigate the differentiation and degeneration of neurons in developing chick embryo. The activity of acid phosphatase(ACP) was measured and cytochemical study of ACP and ultrastructural changes were observed in prosencephalon, mesencephalon and rhombencephalon from day 4 to day 19 of incubation. As a result, the activity of ACP of all brain region was tend to increase from day 4 to day 19. On day 13, activities of ACP of mesencephalon and rhombencephalon were increased greatly and activity of ACP was decreased each region on day 17. On electron microscopic examination, the reaction product of ACP were localized at GERL complex, lysosome, Golgi body and vacuoles of neurons. Morphologically, disrupted nuclear envelope, mitochondrial destruction, vacuolization and ribosomal crystalization were observed.
Secretory ducts in the stem of Panax ginseng seedlings are observed with light and electron microscopes to clarify development of the epithelial cells of secretory ducts. Secretory duct initial cell is developed from procambial cell which originated from initial cell is differentiated into ipithelial cell ofsecretory ducts. Intercellular space between the epithelial cells are gradually expanded and differentiated into duct lumen. Disintegrations of epithelial cells occur throughout all the stages of development. The cytoplasm of epithelial cells darken and the epithelial cell wall are lysed, preceding their disintegraton. In the epithelial cell organelles are scattered in the cytoplasm. Development of vcuoles are sparse at the early stage. Starch grains decreased gradually, while lipid droplets increased. Free ribosomes are distributed throughout the cytoplasm and secretory vesicles which originated from rough endoplasmic reticulum and Golgi complex are fused with the plasmalemma. These suggest that the cellular metabolism is active. Microtubules and plasmodesmata are typically observed in the thickened epithelial cell wall. Secretions are accumulated in duct lumen.
The ultrastructure of germ cells and follicle cells during oogenesis, oocyte degeneration, reproductive cycle, and first sexual maturity in female Cyclina sinensis were investigated for clams collected from Simpo, Jeollabuk-do, Korea, by cytological and histological observations. Vitellogenesis occured by way of endogeous autosynthesis and exogenous heterosynthesis: vitellogensis occurred through a process of autosynthesis, which involves a combined activities of the Golgi complex, mitochondria, and rough endoplasmic reticulum. The process of heterosynthesis involved endocytotic incorporation of extraovarian precursors into the basal region of the early vitellogenic oocytes prior to the formation of vitelline envelope. The follicle cells appear to play an integral role in vitellogenesis and oocyte degeneration, functioning in phagocytosis and digestion of products originating from the degenerated oocytes: these functions can permit the transfer of yolk precursors needed for vitellogenesis. Follicle cells might have a lysosomal system for breakdown and might also resorb phagosomes in the cytoplasm for nutrient storage during oocyte degeneration.
Synaptic vesicles (SVs) are key structures for synaptic transmission in neurons. Numerous membrane-associated proteins are sorted from the Golgi complex to the axon and the presynaptic terminal. Protein-protein and protein-lipid interactions are involved with SV targeting in neurons. Interestingly, many SV proteins have lipid binding capability, primarily with either cholesterol or phosphoinositides (PIs). As examples, the major SV protein synaptophysin can bind to cholesterol, a major lipid component in SVs, while several other SV proteins, including synaptotagmin, can bind to PIs. Thus, lipid-protein binding plays a key role for the SV targeting of synaptic proteins. In addition, numerous SV proteins can be palmitoylated. Palmitoylation is thought to be another synaptic targeting signal. Here, we briefly describe the relationship between lipid binding and SV targeting.
Ultrastructural aspects on the production of the duct cuticle and formation of cuticular precursors within silk glands of the orb web spider, Nephila clavata L. Koch(Araneae: Araneidae), were studied using transmission electron microscope. Four kinds of silk glands(ampullate glands, tubuliform glands, flageliform glands, and aggregate glands), which connected with large spinning tubes(spigots) of the spinnerets, were examined and discussed in terms of cuticle precursor production. Inner cuticular intima which composed of three layers of cuticles-subcuticle, endocuticle and exocuticle- were commonly originated from duct epithelial cells surrounding the cuticle. The morphology and internal textures of each cuticle precursors were very diverse according to the types of silk glands. However several common features were observed. These cuticle precursors were first produced from the rough endoplasmic reticulum and next concentration was accomplished through the Golgi complex. After this step, cuticle precursors were released to the cuticle layer as a form of secretory granule by the mechanism of merocrine secretion commonly.
To investigate the effects of hydrocortisone on new-born rat cardiac endothelial cells in culture, the endothelial cells were isolated by means of enzyme-cocktail method. The cells were cultivated in Lees modified Dulbeco\ulcorner medium and 10[M or 10[M of hydrocortisone was added to the medium. The cells were harvested or coverglass and processed for thiamin pyrophosphatase reaction and Feulgen reaction. The enzymatic activities of Golgi complex, number of cells and number of large nucleated[more than tetraploid] cells were counted and discussed for their significance. The results were summarized as follows; 1. Hydrocortisone seemed to accelerate the rate of recovery of cardiac endothelial cells from isolation damage. 2. Endothelial cells treated with hydrocortisone revealed strong positive reaction to thiamine pyrophosphatase in early culture and 10 M group had stronger reaction than that of 10 AM group 3. Hydrocortisone had inhibiting effects on endothelial proliferation and the higher the concentration of the reagent was the stronger effects. 4. Hydrocortisone inhibited the appearance of large nucleate cells in endothelial cell population. 5. Hydrocortisone seemed to suppress the nuclear DNA synthesis.
One of the characteristics of the neurons that distinguishes them from other cells is their complex and polarized structure consisting of dendrites, cell body, and axon. The complexity and diversity of dendrites are particularly well recognized, and accumulating evidences suggest that the alterations in the dendrite structure are associated with many neurodegenerative diseases. Given the importance of the proper dendritic structures for neuronal functions, the dendrite pathology appears to have crucial contribution to the pathogenesis of neurodegenerative diseases. Nonetheless, the cellular and molecular basis of dendritic changes in the neurodegenerative diseases remains largely elusive. Previous studies in normal condition have revealed that several cellular components, such as local cytoskeletal structures and organelles located locally in dendrites, play crucial roles in dendrite growth. By reviewing what has been unveiled to date regarding dendrite growth in terms of these local cellular components, we aim to provide an insight to categorize the potential cellular basis that can be applied to the dendrite pathology manifested in many neurodegenerative diseases.
The endocrine cells in the midgut epithelium of the Japanese cockroach, Periplaneta japonica were observed by the light and electron microscopy. The midgut epithelium of the last instar larva and adult cockroach consisted of principal columnar cells, regenerative cells, and secretory granular cells. Midgut endocrine cells were positioned basally as a cone-shaped single cell in the epithelium or underneath the regenerative crypt cells. When midgut epithelium grows and the cell composing it transforms, between the endocrine cells and regenerative cells were made desmosome type junction and large vesicular shaped stretches of loose contact. The endocrine cells were characterized by a clear cytoplasm with abundant Golgi complex and numerous secretory granules. The secretory granules in the cell were spherical and electron dense with their diameter of $200{\sim}400nm$. The secretory granules have been observed as discharged by exocytosis on the basal and lateral side of the cell.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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