• 제목/요약/키워드: Gly45Asp

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Site-Directed Mutagenesis Studies with Restriction Endonuclease EcoRV to Identify the Role of Ile91 in Recognition and Catalysis

  • Moon, Byung-Jo;Vipond, I. Barry;Halford, Stephen E.
    • BMB Reports
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    • 제29권2호
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    • pp.99-104
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    • 1996
  • Site-directed substitutions were made to change the Ile91 of restriction endonuclease EcoRV to either Val, Ala or Gly to identify the role of Ile91 in recognition and catalysis, since substitution of Ile91 with Leu afforded dramatic effects on the activity and properties of restriction endonuclease EcoRV. These changes alter the size of the hydrophobic side chain at position 91 and thus might have revealed the reason for the altered phenotype of Ile91Leu. However, the properties of Ile91Val and Ile91Ala mutants were much like wild type EcoRV, in both activity and metal ion preference. Ile91Gly had very little activity with either $Mg^{2+}$ or $Mn^{2+}$ as cofactors. To try to understand the unusual $Mn^{2+}$ profile of the Ile91Leu mutant, two double mutants, Ile91Leu;Asp90Asn and Ile91Leu;Glu45Met were created. Both double mutants were seriously disabled by the second amino acid change. Ile91Leu;Glu45Met had some residual activity in the $Mn^{2+}$ reaction buffer, whereas the Ile91Leu;Asp90Asn displayed no detectable activity.

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된장의 쓴맛 펩타이드 특성 (Characteristics of bitter peptides from Doenjang)

  • 홍혜정;이혜수
    • 한국식품조리과학회지
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    • 제10권1호
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    • pp.45-50
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    • 1994
  • 본 연구에서는 재래식 된장, Asp. oryzae를 이용한 고지와 소금의 배합을 달리한 개량식 된장 세가지(A; 쌀고지 :콩 :소금:53 : 100 : 33, B: 쌀고지 .콩 :소금=100 : 100 : 40, C: 쌀고지 :콩 :소금=200 : 100 : 40)를 만들어 일반 성분의 변화와 쓴맛 펩타이드의 특성을 살펴보고 쓴맛 펩타이드가 된장의 수응도에 어떠한 영향을 미치는지를 알아보았다. 1. 4가지 된장 모두 총질소는 발효기간 중 약간씩 증가하였으며 아미노산태 질소는 크게 증가하였다. 특히 재래식 된장의 아미노산태 질소는 다른 시료에 비해 큰폭의 증가를 보였다. 환원당은 쌀고지를 첨가한 된장의 경우 함량이 월등힌 많았으며 숙성됨에 따라 모든 된장이 증가 추세를 보였다. pH는 된장이 숙성됨에 따라 점차로 저하하였으며 고지가 첨가된 된장의 경우 더욱 산성을 띠었다. 2. 숙성시킨 된장에서 쓴맛 펩타이드의 특성을 알아보기 위해 소수성 펩타이드를 2 : 1(v/v) Chloroform-me-thanol로 추출하였다. 추출된 추출물을 겔 크로마토그래피를 사용하여 분자량별로 분리하고 다시 TLC로 정제하였다. 정제된 펩타이드는 쓴맛 검사를 하여서 쓴맛을 나타내는 펩타이드를 얻었다. 쓴맛 펩타이드의 아미노산 조성은 다음과 같다. 재래식 된장 peak 1-1. Trp-(Asp, Arg, Thr, Ser, Glu, Pro)-Phe 개량식 된장 B peak 1 Trp-(lie, Pro, Asp, Lys, Val, Glu)-Trp 개량식 된장 B peak 1 Trp-(lie, Pro, Asp, Lys, Val, Glu)-Trp 개량식 된장 C peak 1-2 Trp-(tyr, Thr, Glu, Pro, Gly)-Phe. 3. 관능검사의 결과를 Pearson 상관관계를 알아본 결과 쓴맛과 전체적인 수응도와의 상관관계는 높지 않았다.

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Evaluation of the Apparent Ileal Digestibility (AID) of Protein and Amino Acids in Nursery Diets by In vitro and In vivo Methods

  • Cho, J.H.;Kim, I.H.
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제24권7호
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    • pp.1007-1010
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    • 2011
  • The objective was to evaluate in vitro prediction of ileal digestibility of protein and amino acids (AA) for current nursery pig diets (n = 10) by using pepsin and pancreatin incubations. To compare in vivo ileal digestibility, forty nursery pigs (4 pigs per diet) with an initial BW of $12.2{\pm}2.7$ kg were surgically equipped with T-cannula in the distal ileum. In all cases, the values of in vitro digestibility were higher than those of in vivo digestibility (p<0.05). With regard to the relationships of essential and non essential AA (CP), the $r^2$ value was 0.76. With regard to AA, high relationships were observed in Ile, Thr, and Gly (0.85, 0.83, and 0.89, respectively). Also, there was a lower relationship for Arg, Met, Ala, Asp, Glu, Pro, Ser, and Tyr with $R^2$ values of 0.56, 0.54, 0.40, 0.54, 0.45, 0.24, 0.49, and 0.35, respectively between in vitro and in vivo digestibility. The EAA relationship ($R^2$ = 0.71) was generally higher than that of NEAA ($R^2$ = 0.50) numerically. In conclusion, there were strong linear relationships between in vivo and in vitro ileal digestibility (CP, Ile, Thr, and Gly). In vitro prediction of ileal digestibility (CP, Ile, Thr, and Gly) seems to have significant potential for practical application.

이취 제거를 위한 굴 가수분해물의 발효공정과 제품의 특성 (Fermentation Process for Odor Removal of Oyster (Crassostrea gigas) Hydrolysate and Its Properties)

  • 이수선;박시향;김현아;최영준
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제45권4호
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    • pp.542-550
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    • 2016
  • 굴 가수분해물의 이취 제거를 위한 가수분해 및 발효의 최적 조건과 이의 항산화 효과를 검토하였다. 이취 제거를 위한 굴 가수분해물의 최적 추출 조건은 Neutrase를 이용하여 E/S 3.3%, $50^{\circ}C$, 8.3시간이었으며, 발효 공정은 $24^{\circ}C$에서 glucose 0.5%와 Saccharomyces cerevisiae를 5% 접종하였다. 굴 가수분해 발효물의 구성 아미노산은 25.7%에 해당하였으며, Glu, Asp, Lys, Leu, Arg, Gly 및 Ala이 전체의 61.2%를 차지하였다. 유리 아미노산 조성의 경우 Leu, Ala, Phe, Val 및 Tau의 순으로 높게 나타났다. 또한 무기질 함량은 Na, P, K, Zn, Fe이 높게 나타났으며, 정상 간세포주인 Chang cell에 대한 독성은 나타나지 않았다. 이상의 결과로 미루어 S. cerevisiae에 의해 수산물의 이미취를 masking 할 수 있으나, 기능성 원료로 사용하기 위해 최종 제품의 카드뮴 함량을 저감시킬 대책이 필요하다.

Association of the G134A and G184C Polymorphisms in the CYP1A1 Gene with Lung Cancer Incidence

  • Ryu, Doug-Young;Huang, Ming-Ai;Park, Chang-Bo;Chang, Soo-Im;Im, Ruth;Choi, Seong-Jin;Kim, Na-Young;Park, In-Won;Choi, Byoung-Whui;Kim, Jae-Yeol;Shin, Jong-Wook;Choi, Jae-Chul;Choi, Byung-Sun;Park, Jung-Dock
    • Toxicological Research
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    • 제24권2호
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    • pp.109-112
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    • 2008
  • The G184C and G134A single nucleotide polymorphisms(SNPs) of the CYP1A1 gene result in Ala62Pro and Gly45Asp substitutions, respectively. Here, we tested whether these SNPs are associated with an alteration in lung cancer incidence. We examined 80 Korean subjects with lung cancer and 240 age- and sex-matched controls. For each subject, the CYP1A1 gene was PCR amplified and sequenced. We observed that the odds ratio(OR) for lung cancer was 3.37 higher in subjects with the G184C polymorphism than in controls(95% confidence interval(CI), $0.89{\sim}12.73$, P=0.07). In contrast, the OR for lung cancer was 1.23 in subjects with the G134A polymorphism compared to controls(95% CI, $0.68{\sim}2.20$, P=0.49). The G184C polymorphism exacerbated the effects of smoking on lung cancer development. Gene-smoking interaction analyses revealed that past or present smokers with the G184C polymorphism had a higher incidence of lung cancer(OR, 24.72; 95% CI, $4.48{\sim}136.31$; P<0.01) than control smokers(OR, 6.65; 95% CI, $2.72{\sim}16.28$; P<0.01). However, there was only a slight difference in the ORs for lung cancer between control smokers and smokers with the G134A polymorphism. These findings suggest that the G184C polymorphism, but not the G134A polymorphism, is associated with an increased risk of lung cancer.

Induced freezing tolerance and free amino acids perturbation of spinach by exogenous proline

  • Shin, Hyunsuk;Oh, Sewon;Kim, Daeil;Hong, Jeum Kyu;Yun, Jae Gil;Lee, Sang Woo;Son, Ki-Ho
    • Journal of Plant Biotechnology
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    • 제45권4호
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    • pp.357-363
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    • 2018
  • The objective of this study was to investigate whether exogenous proline (Pro) could confer freezing tolerance of spinach and determine fluctuations of free amino acids in spinach leaf tissues under freeze-induced stress. Treatment with Pro (10 mM) resulted in more accumulation of Pro (~2.6-fold) in Pro-treated spinaches compared to untreated ones. These Pro-pretreated spinaches were more freezing-tolerant, showing more turgid leaves and petioles compared to untreated controls. However, when spinaches pre-treated with or without Pro were subjected to freezing, there was no significant difference in overall amino acid contents, emphasizing the role of Pro as an osmoprotectant. Freezing stress prompted intensification of total amino acid contents irrespective of pretreatment with Pro. Asp, Glu, Ala, and Val were the most abundant free amino acids due to increased protein degradation and nitrogen mobilization for plant survival under freezing stress. Arg, a precursor for the synthesis of polyamines in plants, was profoundly enhanced under freezing stress. This implies that Arg plays an important role in modulating freezing tolerance. Gly, Leu, and Ile were maintained at relatively low levels in all treatments. However, Ser, Tyr, and Lys as primary constituents of dehydrins were accumulated under freezing stress, suggesting that they might play a role in increasing cryoprotective activity under freezing stress.

미숙호박과 완숙호박의 화학성분 (Chemical Compositions of the Green and Ripened Pumpkin(Cucurbita moschata Duch.))

  • 조규성
    • 한국식품과학회지
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    • 제29권4호
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    • pp.657-662
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    • 1997
  • 미숙호박과 완숙호박의 일반성분, 유리당, 아미노산, 지방산, 무기성분 조성등의 화학성분을 비교 조사한 결과, 호박은 성숙함에 따라서 성분이 변화하는 경향을 보였다. 미숙호박 및 완숙호박의 과육중에는 당질 $70.95{\sim}70.65%$과 단백질이 $14.0{\sim}15.20%$ 많았고, 호박씨중에는 단백질 35.74%이 가장 많고, 다음은 지질 29.45%과 당질 28.39%이 많았다. 미숙호박과 완숙호박의 과육에서 sucrose, glucose, fructose, maltose, lactose 등의 유리당이 확인되었으며, 이들 유리당들은 sucrose와 fructose는 성장함에 따라 감소하였고, glucose, maltose, lactose는 증가하는 경향을 보였다. 특히 maltose는 완숙호박에서만, 호박씨중에는 sucrose만이 확인되었다. 미숙호박과 완숙호박의 단백질중에는 15종의 아미노산이 확인되었으며, 호박은 성장함에 따라 Thr, Ser, Gly, Ala, Val, Met, Ile, Leu, Phe, Lys등은 감소하였으나, Asp, Tyr, His, Arg등은 증가하는 경향을 보였다. 한편 호박씨 중에는 Glu, Asp, Leu가 많았다. 지방산은 미숙호박과 완숙호박에 palmitic, linolenic, linoleic acid가 많았다. 호박은 성장함에 따라 palmitic acid의 함량은 유사하였으나, stearic, oleic acid는 감소하고, myristic, linoleic, linolenic acid등은 증가하는 경향을 보였다. 한편 호박씨중의 지방산은 linoleic, palmitic, oleic acid의 순으로 나타났으며, arachidic acid도 확인 되었다. 미숙호박과 완숙호박, 호박씨중의 무기성분은 K가 가장 많았고, Ca, Mg, Na, Fe 등의 순으로 나타났으며, 호박은 성장함에 따라 Ca, Mg는 감소하는 한편 K, Na, Fe의 함량은 증가하는 경향을 보였다.

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Mutations in Streptomycin Resistance Genes and Their Relationship to Streptomycin Resistance and Lineage of Mycobacterium tuberculosis Thai Isolates

  • Hlaing, Yin Moe;Tongtawe, Pongsri;Tapchaisri, Pramuan;Thanongsaksrikul, Jeeraphong;Thawornwan, Unchana;Archanachan, Buppa;Srimanote, Potjanee
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • 제80권2호
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    • pp.159-168
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    • 2017
  • Background: Streptomycin (SM) is recommended by the World Health Organization (WHO) as a part of standard regimens for retreating multidrug-resistant tuberculosis (MDR-TB) cases. The incidence of MDR-TB in retreatment cases was 19% in Thailand. To date, information on SM resistance (SMR) gene mutations correlated to the SMR of Mycobacterium tuberculosis Thai isolates is limited. In this study, the mutations in rpsL, rrs, gidB, and whiB7 were investigated and their association to SMR and the lineage of M. tuberculosis were explored. Methods: The lineages of 287 M. tuberculosis collected from 2007 to 2011 were identified by spoligotyping. Drug susceptibility profiles were evaluated by the absolute concentration method. Mutations in SMR genes of 46 SM-resistant and 55 SM-susceptible isolates were examined by DNA sequencing. Results: Three rpsL (Lys43Arg, Lys88Arg, and Lys88Thr) and two gidB (Trp45Ter and Gly69Asp) mutations were present exclusively in the SM resistant M. tuberculosis. Lys43Arg rpsL was the most predominant SMR mutations (69.6%) and prevailed among Beijing isolates (p<0.001). No SMR-related mutation in was found rrs. The combination of rpsL and gidB mutations provided 76.1% sensitivity for detecting SMR in M. tuberculosis Thai isolates. whiB7 was not responsible for SMR in SM resistant isolates lacking rpsL and rrs mutations. The significance of the three gidB mutations, 276A>C, 615A>G, and 330G>T, as lineage signatures for Beijing and EAI were underscored. This study identified 423G>A gidB as a novel sub-lineage marker for EAI6-BGD1. Conclusion: Our study suggested that the majority of SMR in M. tuberculosis Thai isolates were responsible by rpsL and gidB polymorphisms constantly providing the novel lineage specific makers.

붕장어 가공잔사를 이용한 효소분해소재의 가공 (Processing of Enzymatic Hydrolysates from Conger eel Scrap)

  • 강수태;공청식;차용준;김종태;오광수
    • 한국수산과학회지
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    • 제35권3호
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    • pp.259-264
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    • 2002
  • 수산가공잔사의 효율적 활용, 새로운 수산가공용 중간소재의 개발이라는 관점에서 활용도가 거의 없는 붕장어 머리와 내장과 같은 가공잔사를 원료로 하여 수산가공용 유용 중간소재를 가공하기 위한 최적 추출조건을 구명하였고, 이의 관능적 특성에 대하여 실험하였다. 붕장어 잔사의 수분함량은 $73.1\%$, 조단백질은 $14.6\%$, 지방의 함량은 $4.6\%$였고, pH는 6.98, 휘발성염기질소 함량은 17.2mg/100g으로서 선도는 비교적 양호하였다. 붕장어 잔사의 주요 구성아미노산은 Asp, Glu, Leu, Gly, Ala, His 및 Arg 등이었으며, 총지방질의 구성지방산으로 16:0, 16:1n7, 18: 1n9 및 22:6n3 둥이 주요 성분이었다. 2단 효소분해소재의 제조를 위한 시판 alcalase의 1차 효소분해 시간은 3-4시간 정도가 가장 적합한 것으로 나타났으며, 시판 neutrase를 첨가해 2차 효소분해를 행한 결과 2차 효소 분해 시간은 4시간이 가장 적합하였다. 이 때의 최종수율은 효소별로 다소의 차이가 있었으나 대체로 80.9-$87.3\%$이었다. 각 추출 소재를 관능검사한 결과, 2단 효소분해소재는 열수나 가압추출 소재와는 달리 비린맛이나 붕장어 특유의 느끼한 누린내와 같은 이미의 생성이 적었으며, 감칠맛 및 종합평가 면에서 월등히 뛰어난 것으로 나타났다.

탈지대두와 밀가루 코오지를 이용한 산분해간장의 양조 (Brewing of Acid-hydrolyzed Soy Sauce with Defatted Soybeans and Wheat Flour Koji)

  • 선성균;한은미;이택수;이명환
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제30권2호
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    • pp.147-152
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    • 1987
  • 탈진대두와 밀가루 코오지를 산분해간장에 첨가하여 담금한 각 시험구 간장(시험구 A : 탈지대두와 밀가루 배합량이 동일한 대량 담금구, 시험구 B : 배합량이 A구와 같은 소량 담금구, 시험구 C : 탈지대두 6, 밀가루 4의 비율로 담금한 소량 담금구)의 숙성 과정중 각종 성분을 분석한 결과는 다음과 같다. 총질소와 아미노태 질소는 경시적으로 증가하였고, A구, B구, C구의 순으로 높았다. 환원당은 $20{\sim}40$일에 $12.13{\sim}15.76\;%$ 로 가장 높았고 120일에는 $10.75{\sim}12.40\;%$ 였으며 C구가 높았다. ethyl alcohol은 경시적으로 완만하게 증가되어 120일에 $0.45{\sim}1.23\;%$ 로 가장 높았고 B구와 C구가 높았다. 레블리린산은 담금 직후 A구에서 0.40% 였으나 100일에는 0.17% 로 저하되었고, B구와 C구는 당금 직후 $0.54{\sim}0.60\;%$ 였다. 젖산은 담금 직후보다 100일에 다소 증가되었으나 경시적으로 불규칙적인 변화를 보였고 A구가 높은 경향을 보였다. 유리 아미노산은 glutamic acid, lencine, alanine, phenylalanine이 모든 시험구에서 높았으나 histidine, tyrosine, methionine은 낮았다. 총 유리 아미노산 함량은 담금 직후보다 90일에 시험구 모두 증가되었고, B구, C구, A구의 순으로 높았다.

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