We studied the effects of 2 different dosages of high-molecular-weight poly-${\gamma}$-glutamic acid (hm ${\gamma}$-PGA) derived from Bacillus subtilis chungkookjang on lipid metabolism in a high-fructose diet-induced hypertriglyceridemic animal model. For 4 weeks, rats were fed either AIN-93 diet (normal control, NC; n = 10) or modified AIN-93 diet in which cornstarch was substituted with 63% fructose (n = 30) to induce hypertriglyceridemia. After 4 weeks, the hypertriglyceridemic rats were treated with daily oral doses of 0 mg (hypertriglyceridemic control, HC), 2.5 mg (hypertriglyceridemic, low hm ${\gamma}$-PGA, HL), or 5 $mg{\cdot}kg{\cdot}bw^{-1}{\cdot}d^{-1}$ (hypertriglyceridemic, high hm ${\gamma}$-PGA, HH) hm ${\gamma}$-PGA for 4 weeks. The HL and HH groups exhibited significantly lower levels of serum triglyceride, total cholesterol, LDL cholesterol, and free fatty acids than the HC group. The administration of hm ${\gamma}$-PGA reduced serum ALT and AST levels. The activities of lipogenic enzymes such as hepatic malic enzyme and glucose-6-phosphate dehydrogenase as well as glucose-6-phosphate dehydrogenase mRNA expression were significantly decreased by hm ${\gamma}$-PGA administration (p < 0.05). These results indicate that hm ${\gamma}$-PGA has an anti-hypertriglyceridemic effect in high-fructose diet-induced hypertriglyceridemic rats.
An alkaline protease producing microorganism was isolated from soil and identified as Streptomyces griseus HC-1141. The optimum culture condition of Streptomyces griseus HC- 1141 for the production of alkaline protease was as follows; 0.5% casein, 0.05% ammonium chloride, 0.1% ferrous sulfate. 2.0% lactose, pH 8.0 and 84 hrs. The enzyme was purified about 53 folds by ammonium sulfate treatment, DEAE-cellulose ion exchange chromatography and gel filtratioo on Sephadex G-150. The homogeneity of the purified enzyme was verified by polyacrylamide gel electrophoresis. The molecular weight was estimated to be 31,000 on sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis. This enzyme consists of glycine and glutamic acid as major amino acids. The N-terminal and C-terminal residues of the alkaline protease were leucine and histidine respectively.
The physico-chemical properties of viscous substances extracted from chungkook-jang were investigated. The crude protein content of the viscous substance was approximately 61% and 32% of the crude protein content was amino type nitrogen. The contents of glutamic acid in amino acids and potassium in minerals of viscous substances were more higher than those of raw soybean and chungkook-jang. The viscosity of 5% viscous substance solution was higher than that of 15% sucrose solution. The transmittance of viscous substance solutions from Bacillus natto and Bacillus subtilis was lowest at pH 5.0, the absorbances were lowest at pH 5.5 and pH 4.0, respectively. The fibrinolytic activity of viscous substances by B. natto and B. subtilis was 0.438 and 0.163 unit/mg protein, respectively. Though viscous substances were heated for 5 min and 30 min at $100^{\circ}C$, 90% of and 45% the fibrinolytic activity was remained, respectively.
Kim, Min-Jeong;Byun, Ae-Sun;Choi, Jong-Won;Moon, Kyung-Ho;Lee, Chung-Kyu;Park, Min-Soo
Archives of Pharmacal Research
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v.27
no.2
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pp.151-155
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2004
In our previous studies for the development of new anticonvulsant of broad spectrum, we found that N-cbz-$\alpha$-aminoglutarimides showed significant anticonvulsant activities of broad spectrum enough to be recommended for the new anticonvulsants and their anticonvulsant activities were dependent on their imide substituent groups. Based on these results, various N-cbz--$\alpha$-amino-N-alkoxyglutarimides, where the imide N-H was substituted with the hydroxy and alkoxy group, were prepared and evaluated for their anticonvulsant activities using the Maximal electroshock seizure (MES) and Pentylenetetrazole induced seizure (PTZ) tests and also the rotorod test. A series of (R) or (S)-N-cbz--$\alpha$-amino-N-alkoxyglutarimides could be prepared from the corresponding (R) or (S)-N-cbz-glutamic acid following the usual synthetic procedure. Among them, (R)-N-cbz--$\alpha$-amino-N-hydroxyglutarimide ($ED_{50}$=86.25 mg/kg) was most active in the MES test. In the case of the PTZ test, (R)-N-cbz--$\alpha$-amino-N-benzyloxyglutarimide ($ED_{50}$= 62.5 mg/kg) was most active. Among the tested compounds, 2a-c, 3a, and 3b showed anticonvulsant activities in the MES and PTZ test. All of the tested compounds, except 2f and 3f, showed significant anticonvulsant activities in the MES or PTZ test. In addition, the neurotoxicities of these compounds were comparable to other anticonvulsant drugs.
Lee Sang-Bae;Kim Hyun-Kyung;Oh Ho-Kyun;Hong Yong-Kil;Joe Young-Ae
Biomolecules & Therapeutics
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v.14
no.1
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pp.30-35
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2006
Tissue-type plasminogen activator (t-PA) is a multidomain serine protease containing two kringle domains, TK1-2. Previously, Pichia-derived recombinant human TK1-2 has been reported as an angiogenesis inhibitor although t-PA plays an important role in endothelial and tumor cell invasion. In this work, in order to improve in vivo efficacy of TK1-2 through elimination of immune reactivity, we mutated wild type TK1-2 into non-glycosylated form (NE-TK1-2) and examined whether it retains anti-angiogenic activity. The plasmid expressing NE-TK1-2 was constructed by replacing $Asn^{l17}\;and\;Asn^{184}$ with glutamic acid residues. After expression in Pichia pastoris, the secreted protein was purified from the culture broth using S-sepharose and UNO S1-FPLC column. The mass spectrum of NE-TK1-2 showed closely neighboring two peaks, 19631.87 and 19,835.44 Da, and it migrated as one band in SDS-PAGE. The patterns of CD-spectra of these two proteins were almost identical. Functionally, purified NE-TK1-2 was shown to inhibit endothelial cell migration in response to bFGF stimulation at the almost same level as wild type TK1-2. Therefore, the results suggest that non-glycosylated NETK1-2 can be developed as an effective anti-angiogenic and anti-tumor agent devoid of immune reactivity.
Zizyphi Spinosi Semen (ZSS), a traditional Chinese folk medicine, has been used for treatment of insomnia and anxiety. This experiment was performed to investigate the anxiolytic-like effect of methanol extract of ZSS (MEZSS) in mice by using the experimental paradigms of anxiety and compared with that of a known anxiolytic, diazepam. In the elevated plus-maze test, it showed that MEZSS (100 mg/kg, p.o.) and diazepam (2.0 mg/kg, p.o.) increased the percentage of time spent on the open arms and the number of open arms entries. MEZSS (50, 100 and 200 mg/kg, p.o.) and diazepam (0.5 mg/kg, p.o.) significantly increased the number of head dips compared with that of control group in the hole-board test. However, MEZSS has no effect on decreasing the locomotor activity, while diazepam (2.0 mg/kg, p.o.) significantly inhibited locomotor activity. MEZSS did not decrease the strength force in the grip strength test, either. In addition, GABAergic involvements were also investigated to understand the possible mechanisms. $GABA_{A}$ receptors subunits and glutamic acid decarboxylase (GAD) were not over expressed, compared with that of the saline group. We also found that MEZSS did not increase chloride influx in cultured cerebellar granule cells. It is concluded that MEZSS might have anxiolytic-like effects, but these effects might not be mediated by GABAergic transmission.
Journal of The Korean Society of Inherited Metabolic disease
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v.14
no.2
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pp.191-194
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2014
Mitochondrial myopathy results from a primary dysfunction of the respiratory chain and is frequently accompanied with endocrine manifestations. Among the endocrine manifestations of mitochondrial disease, diabetes mellitus is relatively common. Diabetes mellitus in the mitochondrial myopathy is usually insulin dependent due to the defect in insulin secretion resulted from mitochondrial dysfunction. But it is seldom manifested as diabetes ketoacidosis and doesn't usually have an auto-antibody. We report a patient with mitochondrial myopathy who was diagnosed as having diabetes mellitus by presenting as diabetes ketoacidosis and had both of the auto-glutamic acid decarboxylase (GAD) antibody and anti-insulin auto-antibody.
An Actinomycetes producing an anti-VRSA (vancomycin-resistant Staphylococcus aureus) substance was isolated from soil. The cultural, morphological, physiological and phylogenetic analyses of an isolated strain were investigated for identification. Cultural characteristics based on ISP (International Streptomyces Project) were as follows: white aerial mycelium, yellow reverse side, and good growth on various medium. Also, the isolate did not produce the soluble pigment. Morphological characteristics were showed cylindrical spore chain and smooth spore surface by SEM (Scanning Electron Microscope). Physiological characteristics were showed LL-type by DAP isomer analysis and detected glycine, glutamic acid and alanine. A phylogenetic analysis of the 16S rDNA provided a clue that the isolated strain was actually a member of the genus Streptomyces, because the determined sequence exhibited a higher homology with Streptomyces echinatus. The isolate was identified to be a genus of Streptomyces sp.. The optimal culture conditions for the maximum production of anti-VRSA substance by Streptomyces sp. were attained in a culture medium composed of $2.0\%$ (w/v) glucose, and $0.4\%$ (w/v) yeast extract. The anti-VRSA substance was highly produced after 5 days of culture. Optimal pH and temperature conditions for the production of anti-VRSA substance were pH 7.0 and $28^{\circ}C$, respectively.
Insamsokmieum (人蔘粟米飮), which is a kind of water gruels made with millet, ginseng, glutinous rice, and some minor ingredients, was frequently used as a medicinal food for the royal family, and it appeared first at the 10th year of King Sukjong's reign. We investigated Insamsokmieum through a literature review and the "SeungjeongwonIlgi(承政院日記)" of King Sukjong (肅宗) from his 1st year (1674) to 46th year (1720). We analyzed the nutritional value and efficacy of Insamsokmieum. In Oriental medicine, Insamsokmieum is prescribed mainly to treat symptoms such as nausea, languidness, and exhaustion in King Sukjong and Queen Inhyun (仁顯王后). In nutritional terms, Insamsokmieum has higher nutrition density than that of rice porridges (白粥) and has relatively high vitamin and mineral contents. Some nutrients such as leucine and glutamic acid, which are contained in the millet, are also known to help alleviate these symptoms. Whereas there have been studies on the efficacy and types of diet during the Joseon Dynasty, studies regarding nutrition characteristics are lacking. This study will demonstrate the superiority of dietary treatments of the Joseon Dynasty and their potential for application to modern nutrition.
This study was conducted to improve the antioxidative activity of instant noodles containing enzymatic extracts from Ecklonia cava (EEC). EEC has relatively better antioxidative activity than extracts from other indigenous plants in Jeju Island. The EEC (2.5 mg/mL) had 82.5% for the hydroxy radical, 78.4% for the DPPH radical, and 64.9% for the superoxide anion radical scavenging activities, and 65.2% for the cell viability (100 ${\mu}g/mL$). According to the texture of the dough, the DPPH free radical scavenging of uncooked instant noodles, sensory evaluation of cooked instant noodles, and turbidity of the cooking drip, the optimal EEC concentration was 1.8% for the instant noodles. The major amino acids in the instant noodles with EEC were glutamic acid (24.2%), proline (10.2%), valine (10.0%), and isoleucine (12.3%). The zinc and iron in the instant noodles were enhanced by adding 1.5-1.8% EEC. The antioxidant activity of instant noodles with EEC was 75.4% for the hydroxy radical, 74.1% for the DPPH radical, and 51.2 % for the superoxide anion radical scavenging activities.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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