Ethanol fermentation of glucose by a strain of Saccharomyces cereuisiae was studied in membrane recycle bioreactor, where the fermentation vessel was coupled with cross flow hollow fiber membrane. The cell recycle system controlled backflushing with fresh medium was proven to be effective in alleviating membrane fouling and allowing long term operation of high-cell continuous fermentation. Using 100 g/l initial glucose concentration, the maximum productivity of about 9 5 g/$l \cdot h$ has been achieved at dilution rate 2.5 $h^{-1}$ and bleed stream ratio 0.05 with the corresponding ethanol concentration of 35g/l and glucose conversion of 100%. Increasing the glucose concentration to 200 g/$l \cdot h$ resulted in an increase in ethanol concentration to 48 g/l and productivity to 120 g1l.h. Substrate conversion, however, was only 69%. This productivity was the highest value in the study, and about 38 fold more than that of batch culture and 17 fold more that of single stage continuous culture without cell recycling. No further increase in the productivity was obtained when the glucose concentration was increased reased to 300g/l.
Three recombinant Saccharomyces cerevisiae strains showing different levels of xylose reductase activity were constructed to investigate the effects of xylose reductase activity and glucose feed rate on xylitol production. Conversion of xylose to xylitol is catalyzed by xylose reductase of Pichia stipitis with cofactor NAD(P)H. A two-substrate fermentation strategy has been employed where glucose is used as an energy source for NADPH regeneration and xylose as substrate for xylitol production. All recombinant S. cerevisiae strains Yielded similar specific xylitol productivity, indicating that xylitol production in the recombinant S. cerevisiae was more profoundly affected by the glucose supply and concomitant It generation of cofactor than the xylose reductase activity itself. It was confirmed in a continuous culture that the elevation of the glucose feeding level in the xylose-conversion period enhanced the xylitol productivity in the recombinant S. cerevisiae.
Journal of the Korean institute of surface engineering
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v.53
no.3
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pp.87-94
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2020
Herein, sulfonated carbon nanotubes (CNT) have been prepared in dilute sulfuric acid (H2SO4) via a novel sulfonation approach based on gas-liquid interfacial plasma (GLIP) at room temperature. The sulfonic acid groups and total acid groups densities of CNT after GLIP treatment in 2 M H2SO4 for 45 min can reach to 0.53 mmol/g and 3.64 mmol/g, which is higher than that of sulfonated CNT prepared under 0.5 M / 1 M H2SO4. The plasma sulfonated CNT has been applied as catalysts for the conversion of microcrystalline cellulose to glucose. The effect of hydrolysis temperature and hydrolysis time on the conversion rate and product distribution have been discussed. It demonstrates that the total conversion rate of cellulose increasing with hydrolysis temperature and hydrolysis time. Furthermore, the GLIP sulfonated CNT prepared in 2 M H2SO4 for 45 min has shown high catalytic stability of 85.73 % after three cycle use.
Continuous and simultaneous production of gluconic acid and sorbitol from glucose and fructose was carried out by using glucose-fructose oxidoreductase and glucanolactonase of Zymomonas mobilis. In order to utilize the enzymes without purification, Zymomonas mobilis was permeabilized with toluene. Optimum conditions for permeabilization and reaction kinetics of permeabilized Zymomonas mobilis were studied. In batch operation with the permeabilized cells immobilized in alginate beads, about 90% conversion was obtained within 35 h reaction. Continuous production of gluconic acid and sorbitol using the immobilized permeabilized cells was carried out. Optimum conditions for continuous operation with the imn~obilized cells were; pH 6.2 and temperature $40^{\circ}C$. Maximum productivities for gluconic acid and sorbitol were about 14.5 g/l/h and 14.8 g/l/h respectively at the dilution rate of 0.075 $h^{-1}$ when 300 g/l each of substrates was fed.
The addition of a limited concentration of yeast extract to a minimal salt medium (MSM) enhanced cell growth and increased the production of curdlan whereas nitrogen-limitation was found to be essential for the higher production of curdlan by Agrobacterium sp. ATCC 31749. As the amount of the inoculum increased, the cell growth as well as the production of curdlan also increased in the MSM without a nitrogen source. The cell growth and production of curdlan increased as the initial pH of the medium decreased as low as 5.0. The conversion rate and concentration of curdlan from 2% (w/v) glucose in the MSM with concentrated cells under nitrogen deletion was 67% and 13.4 g/L, respectively. The highest conversion rate of curdlan under the conditions optimized in this study was 71% when the glucose concentrations was 1% (w/v).
Optimal agitation speed and aeration rate for the production of gellan by Sphingomnas paucibilis NK2000 in a 7 l bioreactor were found to be 400 rpm and 1.0 vvm. The best time for glucose feeding into the medium for enhanced production of gellan by S. paucibilis NK2000 was 36 hr after cultivation. The concentrations of gellan produced by S. paucibilis NK2000 from 1) 20.0 g/l glucose without additional feeding, 2) 20.0 g/l glucose with feeding of 200.0 g/l glucose at 36 hr, in which the final concentration in the medium was 10.0 g/l, 3) 20 g/l glucose with feeding of 200.0 g/l glucose and a shift in an agitation speed from 400 to 600 rpm, 4) 20.0 g/l glucose with feeding of 200.0 g/l glucose at 36 hr and shifts in an agitation speed from 400 to 600 rpm and an aeration rate from 1.0 to 1.5 vvm, 5) and 20.0 g/l glucose with feeding of 200.0 g/l glucose at 36 hr and shifts in an agitation speed from 400 to 600 rpm and an aeration rate from 1.0 to 2.0 vvm, were 5.19, 5.74, 6.73, 7.93, and 9.40 g/l, respectively, and their conversion rates from glucose were 26.0, 19.1, 22.4, 26.4, and 31.3%, respectively. Compared to those developed using a normal process, production of gellan by S. paucibilis NK2000 from 20.0 g/l glucose was 1.81 times higher, and and its conversion rate was 1.20 times higher when the optimized process developed in this study was used.
Lactic acid production from ${\alpha}$-cellulose by simultaneous saccharification and fermentation (SSF) was studied. The cellulose was converted in a batch SSF using cellulase enzyme Cytolase CL to produce glucose sugar and Lactobacillus delbrueckii to ferment the glucose to lactic acid. The effects of temperature, PH, yeast extract loading, and lactic acid inhibition were studied to determine the optimum conditions for the batch processing. Cellulose was converted efficiently to lactic acid, and enzymatic hydrolysis was the rate controlling step in the SSF. The highest conversion rate was obtained at 46$^{\circ}C$ and pH 5.0. The observed yield of lactic acid from ${\alpha}$-cellulose was 0.90 at 72 hours. The optimum pH of the SSF was coincident with that of enzymatic hydrolysis. The optimum temperature of the SSF was chosen as the highest temperature the microoraganism could withstand. The optimum yeast extract loading was found to be 2.5g/L. Lactic acid was observed to be inhibitory to the microorganisms' activity.
In order to produce high concentration of sodium gluconate, optimization of the fermentation conditions, such as glucose concentration, inoculum size, dissolved oxygen concentration and glucose feeding method, was examined. When the glucose concentration was maintained in the range of 30∼50 g/L during the batch fermentation, glucose conversion yield and productivity were 92.2% and 6.0 g/L/hr, respectively. In the case of the low concentration below 30 g/L, the yield decreased by about 25%. As the inoculum size increased above 20%(w/v), lag phase was shortened but the productivity decreased. The dissolved oxygen level of 60∼70% was shown to be the threshold point for 75% of increase in the productivity of sodium gluconate. Finally, optimal glucose feeding rate was determined using various feeding methods such as exponential feeding, feeding based on the average glucose consumption rate and was determined using various feeding methods such as exponential feeding, feeding based on the average glucose consumption rate and on the oxygen uptake rate and etc. Our result shows that glucose feeding, based on the oxygen uptake rate is a very simple, efficient and robust method, especially when oxygen is consumed as a substrate for the bioconversion. Using the above glucose feeding strategy under the optimized condition, 255 g/L of sodium gluconate concentration, 12 g/L/hr of productivity and 95% of glucose conversion yield were achieved with A. niger ACM53.
O, Hu-Rok;Wi, Yeong-Jung;Jeong, Seon-Ok;Yun, Jong-Seon;Ryu, Hwa-Won
한국생물공학회:학술대회논문집
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2001.11a
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pp.410-413
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2001
In this study a repeated batch production of lactic acid was investigated for the purpose of reducing amount of yeast extract dosage. First batch operation was performed with nutrient rich media(glucose 100-150 g/${\ell}$, and high yeast extract contents; 15 g/${\ell}$), and subsequential batch operations were performed with nutrient poor media(glucose 100-150 g/${\ell}$, and reduced yeast extract contents; 4-5 g/${\ell}$). Volumetric productivities(6.03-6.20 g/${\ell}{\cdot}h$) and substrate conversion rate(94-98%) of eve η subsequential batch operation were maintained with the same level of first batch operation(6.19 g/${\ell}{\cdot}h$, and 99%, respectively), when concentrations of glucose and yeast extract were 100, and 4 g/${\ell}$ respectively.
The metabolic patterns of C-1 and C-6-carbon atoms of glucose were observed in the tissue homogenates of the Ehrlich ascites tumor tissue which was incubated for 3 hours in the Dubnuff metabolic shaking incubator. $C^{14}-1-and\;C^{14}-6-glucose$ were used as tracers. The glucose media in which tissue homogenate was incubated was kept at a concentration of 200mg% glucose of carrier and appropriate amount of $C^{14}-1-or\;C^{14}-6-tracer$. At the end of 3 hour incubation, respiratory $CO_2$ samples trapped by alkaline which is placed in the tenter well of incubation flask were analyzed for the total $CO_2$ production rates and their radioactivities. The tissue homogenate samples after incubation were analyzed for their concentrations of glucose, lactate, pyruvate and glycogen and calculations were made on the glucose consumption rate, pyruvate and lactate accumulation rates. The following results were obtained. Data obtained in each group are as follows: 1. In the tissue homogenate, which was incubated with $C^{14}-1-glucose as a substrate, total $CO_2$ production rate averaged $19.0{\pm}5.0{\mu}M/hr/gm$ and the mean specific activity of respiratory $CO_2$ was $840{\pm}296\;cpm/mgC.$ Relative specific activity (RSA) which means the fraction of $CO_2$ derived from medium $C^{14}-1-glucose$ to total $CO_2$ production rate was calculated by ratio of SA of respiratory $CO_2$ and medium $C^{14}-1-glucose.$ RSA was $14.3{\pm}5.0%,$ Accordingly actual $CO_2$ production rate from medium $C^{14}-1-glucose$ showed a mean value of $2.79{\pm}1.35\;{\mu}m$ of which amount was equivalent to the mean value of total glucose consumption rate $(RGDco_2)$, namely, $5.1{\pm}1.3%.$ Lactate and pyruvate appearance rates averaged $7.13{\pm}1.26\;and\;0.21{\pm}0.02{\mu}M/hr/gm,$ respectively. Assuming that these 3 carbon compounds appeared in the medium were derived from glucose, calculations were made that relative glucose disappearance rate into lactate $(RGD_L)$ was $38.0{\pm}5.4%\;and\;RGD_P$ was $1.23{\pm}0.03%.$ Therefore, about 43.3% of the total glucose consumed were accounted for by conversion into the respiratory $CO_2$, lactate and pyruvate. 2. In the second group, which was incubated with $C^{14}-1-glucose$ as a substrate, glucose consumption rate, lactate and pyruvate appearance rates showed almost the same order as the values of the $C^{14}-1-glucose$ substrate group. However, RSA was remarkably decreased showing a mean value of $1.02{\pm}0.13%.$ This fact means that the C-6 carbon of glucose take the minor part in the oxidative metabolism of glucose. The glycogen level in both substrate tissue homogenate showed less than 0.3% of tissue weight. These low value suggested that there was an inhibition of carbohydrate synthesis in the Ehrlich ascites tumor tissue. 3. The catabolic pathway of glucose in the tumor tissue were analyzed on the basis of Bloom's principle from the values of RSA. It was found that in the tumor tissue more than 90% of $CO_2$ derived from glucose were oxidized via the alternate pathway other than principal EMP-TCA cycle such as hexose monophosphate pathway (HMP). From the data described above, it was assumed that in the Ehrlich tumor tissue anaerobic glycolysis proceeds normally although, the oxidation of products of anaerobic glycolysis via the TCA cycle is inhibited resulting in the accumulation of lactate and almost all of oxidative energy from glucose is released by oxidative pathway such as HMP.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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