진세노사이드 $Rb_1$, $Rg_1$의 경우 인삼의 주요 지표성분으로서 건강기능식품법 등 국내 주요 규격 뿐 만 아니라 Codex 등 국제 규격에서도 주요한 품질지표 인자로 활용되고 있다. 그러나 최근 기술표준원에서 발표한 KS 방법 및 2008년 8월부터 실효된 개정된 건강기능식품법에 제시되어 있는 HPLC를 이용한 $Rb_1$, $Rg_1$ 분석법의 경우 분석시간이 각각 90분, 70분으로 매우 길다는 단점이 있다. 따라서 본 연구에서는 기존에 제시되어 있는 HPLC 방법을 개선하여 진세노사이드 $Rb_1$, $Rg_1$ 및 고려인삼 특이 진세노사이드 겐를 단시간(50분)에 분석할 수 있는 새로운 방법을 개발한 후 개발된 분석법에 대한 평가를 수행하였다. 컬럼은 $\mu$-Bondapak $C_{18}$ column($3.9{\times}300\;mm$, $10{\mu}m$), 이동상 용매는 water, acetonitrile로 기울기 용리를 사용하였으며, 검출파장은 203nm 이동상의 유속은 1.6mL/mm이었으며 분석온도는 $35^{\circ}C$, 시료주입량은 $20{\mu}L$로 설정하여 분석하였다. 확립된 분석조건에서의 각 진세노사이드 머무름 시간(RT)은 $Rg_1$(17.6분), Rf(18.2분), $Rb_1$(39.1분)이었다. 진세노사이드 3종에 대한 표준검정곡선은 $0.01{\sim}1.00\;mg/mL$ 농도범위에서 상관계수가 0.9997 이상의 양호한 직선성을 나타내었다. 회수율은 $0.125{\sim}0.575\;mg/mL$의 농도범위에서 $101.1{\sim}l15.0%$으로 양호하였으며, 일내(intra-day)와 일간 (inter-day) 정밀도(RSD)는 $0.{\sim}2.8%$, $0.7{\sim}3.2%$이었다. 따라서, 확립된 분석방법은 인삼 중의 진세노사이드 $Rb_1$, $Rg_1$, Rf를 신속하고 효과적으로 분석하는데 이용될 수 있을 것으로 사료된다.
A high performance liquid chromatograpic procedure is described for determining ginseng saponins such as ginsenoside-Rb1, -Rb2, -Rc, -Rd, -Re, -Rf, -Rg1, and-Rg2. Ginseng saponins extracted with 90% methanol and water-saturated butanol were compared with pure standard ginsenosides. The resolution of the saponins was satisfactory and detection limit for each saponin was about 5.mu.g. Separation of the saponins was accomplished using a .mu. Bondapak carbohydrate analysis column, mobile phase of acetonitrile-water-butanol (80:20:15) and differential refractive index (RI) detector. The reproducibility and the recovery were also studied. This method was applied for determining the saponin contents of several parts of leaf, fresh ginseng, white ginseng, and red ginseng.
Saponins in leaf and stem of Gynostemma pentaphyllum that was collected from Jeju Island were extracted by the method for ginseng saponin. Comparison by overlapping chromatogram(HPLC) of pentaphyllum on that of ginseng and cochromatogram and ginseng although ginsenoside Rg2, Rg1 and Rf might be in common with rare possibility. It seems to be little difference in the kind of saponin glycosides between leaf and stem of pentaphyllum. Saponin content in leaf of pentaphyllum was higher than in stem, and much higher than those in ginseng. The kind of saponin glycoside in pentaphyllum appeared to be less than 22 and greater than those in ginseng. There was almost no change in saponins of pentaphyllum in methanol for 3 years at room temperature.
인삼농축액이 미생물에 의하여 품질이 저하되는 것을 방지하기 위한 기초자료를 얻고자 부패된 홍삼농축액으로부터 효모를 분리 동정하였고 홍삼농축액의 일반성분 및 사포닌의 조성을 조사하였다. 분리, 선발된 홍삼농축액의 부패성 효모는 형태학적, 배양학적 및 생리학적 특성을 검토한 결과 candida parapsilosis로 동정되었다. 홍삼농축액의 일반성분은 회분 3.85, 조지방 1.48, 조단백 15.3. 환원당 12.4, 전당 45.6% 및 기타성분으로 구성되어 있었다. 조사포닌 함량은 18.24%이었으며 각 ginsenoside의 구성은 Rb$_1$, Rg$_1$, Rc, Rb$_2$, Rf, Ra, Ro순이었으며 panaxadiol계 및 panaxatriol 계 saponin의 구성비는 1.56이었다.
흰쥐 대뇌겉질로부터 별아교세포를 배양하여 흥분성아미노산인 L-glutamate에 의하여 유발되는 세포종창(astrocytic swelling)에 대한 ginsenosides의 억제효과를 검토하였다. Glutamate(0.5 mM)를 세포에 가하고 1시간동안 배양하면 swelling을 일으켜, 세포내의 물의 용적([$^3$H]OMG의 uptake량으로 측정)은 대조세포에 비하여 약 2배의 증가를 나타냈다. Glutamate와 함께 ginsenosides Rb$_2$와 Rc를 가하고 배양하면 glutamate에 의한 astrocytic swelling이 용량의존적으로 감소하였다. 세포는 Rb$_2$와 Rc(0.5 mg/ml)에 24시간까지 노출시켜도 MTT reduction이 감소하지 않는 것으로 보아 이 ginsenosides에 의한 swelling의 억제효과는 세포막의 손상에 의한 것이 아님을 알 수 있었다. Rb$_2$와 Rc는 glutamate에 의한 세포내 $Ca^{2+}$농도의 상승을 억제하였다. 따라서 Rb$_2$와 Rc는Ca$^{2+}$의 유입을 억제하므로서 glutamate에 의한 astrocytic swelling을 억제하는 것으로 생각된다.
Ginseng(Panax ginseng C.A. Meyer) is reported to have many pharmaceutical activities. The minor ginsenosides(Rd, Rg3, Rh2 and compound K) display pharmaceutical properties superior to those of the major ginsenosides. These minor ginsenosides, which contribute a very small percentage, are produced by hydrolysis of the sugar moieties of the major ginsenosides. The pH of red ginseng extracts fermented with S. cerevisiae and S. carlsbergensis decreased rapidly during 3 days of fermentation, with no further significant change thereafter. After 20 days of fermentation, a relatively small difference remained in the acidity of extracts fermented with S. cerevisiae (0.54%) and S. carlsbergensis (0.58%). Reducing sugar in the S. cerevisiae and S. carlsbergensis extracts decreased from 25.86 to 4.54 mg/ml and 4.32 mg/ml glucose equivalents, respectively; and ethanol contents increased from 1.5% at day 0 to 16.0 and 15.0%, respectively, at 20 days. Ginsenosides Rb1, Rb2, Rc, Re, Rf, and Rg1 decreased during the fermentation with S. cerevisiae, but Rd and Rg3 increased by 12 days. Ginsenosides Rb1, Rb2, Rc, Re and Rg1 decreased gradually in the extract with S. carlsbergensis, but Rd and Rg3 were increased at 6 days and 9 days.
Park, Seong-Bum;Chun, Ju-Hyeon;Ban, Yong-Wook;Han, Jung Yeon;Choi, Yong Eui
Journal of Ginseng Research
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제40권1호
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pp.47-54
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2016
Background: The roots of Panax ginseng contain noble tetracyclic triterpenoid saponins derived from dammarenediol-II. Dammarene-type ginsenosides are classified into the protopanaxadiol (PPD) and protopanaxatriol (PPT) groups based on their triterpene aglycone structures. Two cytochrome P450 (CYP) genes (CYP716A47 and CYP716A53v2) are critical for the production of PPD and PPT aglycones, respectively. CYP716A53v2 is a protopanaxadiol 6-hydroxylase that catalyzes PPT production from PPD in P. ginseng. Methods: We constructed transgenic P. ginseng lines overexpressing or silencing (via RNA interference) the CYP716A53v2 gene and analyzed changes in their ginsenoside profiles. Result: Overexpression of CYP716A53v2 led to increased accumulation of CYP716A53v2 mRNA in all transgenic roots compared to nontransgenic roots. Conversely, silencing of CYP716A53v2 mRNA in RNAi transgenic roots resulted in reduced CYP716A53v2 transcription. HPLC analysis revealed that transgenic roots overexpressing CYP716A53v2 contained higher levels of PPT-group ginsenosides ($Rg_1$, Re, and Rf) but lower levels of PPD-group ginsenosides (Rb1, Rc, $Rb_2$, and Rd). By contrast, RNAi transgenic roots contained lower levels of PPT-group compounds and higher levels of PPD-group compounds. Conclusion: The production of PPD- and PPT-group ginsenosides can be altered by changing the expression of CYP716A53v2 in transgenic P. ginseng. The biological activities of PPD-group ginsenosides are known to differ from those of the PPT group. Thus, increasing or decreasing the levels of PPT-group ginsenosides in transgenic P. ginseng may yield new medicinal uses for transgenic P. ginseng.
Kim, Yu.A.;Park, Kyeong-Mee;Kyung, Jong-Su;Hyun, Hak-Chul;Song, Yong-Bum;Shin, Han-Jae;Park, Hwa-Jin
Journal of Ginseng Research
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제20권2호
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pp.168-172
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1996
Ginsenoside Rb,, at a concentration of 10 $\mu\textrm{g}$/ml and over, initiated the cycle of oscillation of ion flux in erythrocytes after the cells had been treated with a protonophore, carbonyl cyanide p-trifluoro-methoxyphenyl hydrazone (FCCP) and then with a $Ca^{2+}$ ionophore, A23,3,. Its action was similar to the additional portion of $Ca^{2+}$-ionophore or $Ca^{2+}$ ion to the erythrocytes. Effects of $Rg_1$ and Rf were different from that of Rb,. They did not induce the oscillation. They, however, increased the extracellular $K^{+}$ concentration and pH without returning to the initial state in the erythrocytes processed with FCCP and $A_{23187}$. We established that ginsenosides from 20-(5)-panaxatriol family induced the membrane hyperpolarization in erythrocytes, which was attenuated by the pretreatment of $Rb_1$, a major component of 20-(5)-panaxadiol.
Park, Hee-Won;In, Gyo;Han, Sung-Tai;Lee, Myoung-Woo;Kim, So-Young;Kim, Kyung-Tack;Cho, Byung-Goo;Han, Gyeong-Ho;Chang, Il-Moo
Journal of Ginseng Research
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제37권4호
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pp.457-467
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2013
A quick and simple method for simultaneous determination of the 30 ginsenosides (ginsenoside Ro, Rb1, Rb2, Rc, Rd, Re, Rf, Rg1, 20(S)-Rg2, 20(R)-Rg2, 20(S)-Rg3, 20(R)-Rg3, 20(S)-Rh1, 20(S)-Rh2, 20(R)-Rh2, F1, F2, F4, Ra1, Rg6, Rh4, Rk3, Rg5, Rk1, Rb3, Rk2, Rh3, compound Y, compound K, and notoginsenoside R1) in Panax ginseng preparations was developed and validated by an ultra performance liquid chromatography photo diode array detector. The separation of the 30 ginsenosides was efficiently undertaken on the Acquity BEH C-18 column with gradient elution with phosphoric acids. Especially the chromatogram of the ginsenoside Ro was dramatically enhanced by adding phosphoric acid. Under optimized conditions, the detection limits were 0.4 to 1.7 mg/L and the calibration curves of the peak areas for the 30 ginsenosides were linear over three orders of magnitude with a correlation coefficients greater than 0.999. The accuracy of the method was tested by a recovery measurement of the spiked samples which yielded good results of 89% to 118%. From these overall results, the proposed method may be helpful in the development and quality of P. ginseng preparations because of its wide range of applications due to the simultaneous analysis of many kinds of ginsenosides.
인삼정과 제조 시 물성학적 품질을 향상하는데 기초자료를 얻고자 sucrose, glucose, honey 및 fructose 등 4종의 당을 각각 첨가하여 제조한 인삼정과에 대하여 진세노사이드 함량, 물성 및 색도를 기계적인 측정치와 관능요원들의 평가치에 의하여 특성을 조사하였다. 조성 진세노사이드 중에서 Rf가 당 종류종별에 따라 각기 함량에 큰 차이를 보여 sucrose로 제조한 인삼정과에서 가장 함량이 높았으며 glucose>honey>fructose의 순으로 높은 결과를 보여주었고 검출된 7종의 진세노사이드의 총 함량은 sucrose로 제조한 인삼정과가 10.0 mg/g으로 가장 높은 함량을 보였으며 glucose>honey>fructose의 순으로 높아 fructose로 제조한 인삼정과가 가장 낮은 함량을 보여주었다. Hardness와 adhesiveness가 가장 높은 것은 fructose를 이용하여 제조한 정과이었고 stiffness, cohesiveness, gumminess, chewiness 및 springiness는 honey를 이용하여 제조한 정과이었으며 fracture force는 당 종류에 따라 차이가 크게 나지 않았다. 당 종류별 정과제품의 편차는 honey가 가장 높게 나타나 제품의 균일성이 떨어지는 현상을 보였다. 정과의 색도 중 밝기, 적색도 및 황색도 모두 sucrose에서 가장 높았으며 적색도가 가장 낮은 것은 glucose, 황색도는 fructose에서 가장 낮게 나타났다. 정과제조 시 당의 종류 중 fructose 함량이 높을수록 갈색화가 크게 일어남을 볼 수 있었다. 관능평가에서는 honey를 이용한 인삼정과가 조직도와 전체적인 기호도면에서 가장 좋았으며 fructose를 이용한 정과는 조직도면에서 기호도가 가장 낮았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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