• 제목/요약/키워드: Giemsa staining

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전리 방사선 조사에 의한 마우스 배양 악하선 세포의 변화 (Effect of ionizing radiation on cultured submandibular gland (SG) cells of mouse)

  • 이송재
    • 대한방사선치료학회지
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    • 제4권1호
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    • pp.71-77
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    • 1990
  • 본 연구는 악하선 세포를 배양하고 전리 방사선을 조사하여 배양 세포의 DNA 합성능의 변화와 염색체의 구조적 이상을 연구하였다. SG세포는 DME배지에 $10\%$ FBS와 항생제, fungizone등이 첨가된 배양액에 배양하였다. 배양 악하선 세포에 대한 전리 방사선의 조사는 선량별로 $^{60}Co$ gamma선원을 이용하여 (dose rate 58.4 rad/min)실시하였다. 배양세포의 DNA 합성에 관한 방사선의 효과는 $^{3}H-TdR$의 동조율(incorporation)을 측정하여 평가하였다. 전리 방사선에 의하여 유발된 배양 악하선 세포의 염색체 이상을 관찰하기 위한 염색체 표본제작은 일반적으로 널리 사용되고 있는 방법에 따랐으며, 제작된 슬라이드는 Giemsa염색액으로 단염색 하였다. 본 실험에서 얻어진 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 배양 악하선 세포의 DNA 합성능은 전리 방사선의 양이 증가함에 따라 그 합성능이 감소하였다. 2. 방사선 조사후 배양2일째에 그 DNA 합성능이 회복되었다. 3. 본 연구에 나타난 염색체 이상은 염색체 절단(single break과 double break), 결손, triradius등이었으며 polyploid도 관찰되었다. 4. 전리 방사선에 의해 유발된 염색체 이상은 선량의 증가에 따라 그 발생빈도 역시 증가되었다.

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한국산 동물로부터 크립토스포리디움의 분리 및 동정 I . 각종 동물의 크립토스포리더움 감염상황 (Isolation and identification of Cryptosporidium from various animals in Korea I. Prevalence of Cyuptosporidium in various animals)

  • 이재구;서영석;박배근
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제29권2호
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    • pp.139-148
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    • 1991
  • 지역의 여러 동물의 분변으로부터 집충한 크립토스포리디움(Cryptosporidium)의 신선한 오오시스트를 광학 및 위상차현미경으로 직접 검경하고, 그리고 Kinyoun 항산염색 표본과 오스윰산 증기고정 Giemsa 염색 표본을 만들어 관찰하고, 또한 감염 동물의 조직절편 및 주사시료에서 여러 발육기를 광학 또는 주사전자현미경으로 관찰하여 오오시스트를 동정한 다음, 여러 동물의 분변을 Sheather액으로 처리하여 Kinyoun 항산염색 표본을 만들어 한떤 검경하여 오오시스트의 검출률을 조사하였다. 성숙한 실험 마우스 250 케이지 중에서 74케이지 (29.6%), 성숙한 집쥐 195마리 중에서 26마리 (13.3%), 4주령의 닭 500수 중에서 75마리 (15.0%), 6∼8개월령의 돼지 500마리 중에서 98마리 (19.6%), 2∼5세의 젖소 500마리 중에서 111마리 (22.2%)로부터 오오시스트를 검출하였다. 감염 정도는 대부분이 극히 경감염이었으며, 반복 분변검사를 실시하면 검출률이 현저하게 높아지는 것으로 미루어보아 실제적인 감염률은 이보다 휠씬 높을 것으로 생각된다. 한편, 마우스, 집쥐, 돼지 젖소로부터 대형 및 소형, 닭으로부터 중형 오오시스트가 각각 검출되었다.

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고온 및 저온처리에 었어서 가잠 Virus 다각체병의 유발에 대하여 (studies on the induction of nuclear and cytoplasmic polyhedrosis viruses by high and low temperature treatment in the silkworm, Bombsx mori L.)

  • 강석권
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 11호
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    • pp.63-68
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    • 1970
  • 가잠의 Virus다각체의 저온 및 고온처리에 대한 유발현상을 조사하기 위하여 5령기잠을 공시하고 저온(5$^{\circ}C$, 24hrs.), 고온(Hot water bath 에 4$0^{\circ}C$, 5min으로 침지 및 Oven 내에 4$0^{\circ}C$, 30min.으로 단독 및 복합처리하여 핵다각체병(N) 중장형 다각체병(C), 병발형(NC) 유발률을 조사하고 동시에 핵다각체병(N)과 중장형다각체병(C)대하여 Giemsa solution 염색법에 의한 염색성을 조사하였다. 1. 냉장(5$^{\circ}C$, 24 시간) 처리와 고온(Hot water bath, 4$0^{\circ}C$, 5분간) 처리를 한 핵복다각체병(N)은 중장형다각체병(C)보다 그 유발률이 적고 또 복합처리에 있어서도 중장형다각테병(C)의 유발율은 핵다각체병(N)보다 많다. 2. 냉장처리후 고온(4$0^{\circ}C$, 30분간 건열) 처리, 반대로 고온처리후 냉장처리한 Virus다각체의 유발률도 중장형다각체병(C) 보다 핵형다각예병(N)의 유발현상이 현저하게 많이 나타났다. 3. Giemsa solution 염색법에 의한 핵다각체병(N)의 다각체는 염색이 되지 않으나 중장형다각예병(C)의 다각체는 잘 염색되어 염색성에 의하여 구별할 수 있었다.

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닭 염색체의 분리 분석 방법에 관한 연구 (Methodology of Chromosome Preparation and Banding Analysis in Gallus domesticus)

  • 손시환;오봉국
    • 한국가금학회지
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    • 제14권2호
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    • pp.89-96
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    • 1987
  • 본 연구에서는 가금에 있어 세포유전학적 방법을 이용하여 닭 염색체의 분리방법과 G, C-banding에 의한 분염분석 방법을 재고하여 보다 명확한 염색체의 형태적 양상을 제시하였다. 염색체의 분리는 성장중인 초기배아를 이용하므로써 유사분열 중기상을 쉽게 포악할 수 있었으며, 성장 4-5일째의 배아조직으로부터 염색체의 분리는 다소 불편함이 많았다. 가금에 있어 염색체 분리기술중 가장 중요한 것으로 적합한 sample의 채취와 적절한 중기상의 유도, hypotonic 처리에 따른 뚜렷한 형태의 유도, 도말방법 및 염색의 처리과정이다. 또한 보다 명확한 염색체의 분석을 위하여서는 중기 분열상중 초기 중기 상태의 상을 포착함이 바람직하다. G. C-banding 처리를 위해서는 공히 충분하고도 완전히 건조된 air-dried prepration된 sample을 이용하여야 바람직한 결과를 얻을 수 있으며, slide의 보존시간에 따라 band 양상에 많은 차이를 나타낸다. G-banding 양상에 크게 영향하는 요인으로서는 trypsin의 농도, 처리시간, 처리온도가 주된 작용을 하고, Giemsa solution에 사용하는 buffer의 pH도 크게 작용하는 것으로 나타났다. C-banding에 있어서는 Ba(OJ)$_2$의 농도 처리시간, 처리온도가 큰 영향을 미친 바 다소 짧은 시간의 처리가 바람직한 양상을 보이고, 처리전 HCl 처리로서 세포들의 균일성을 가하고, 처리후 철저한 수세가 좋은 결과를 나타내었다. Band 양상의 보다 정확한 해석을 위해서는 densitometer를 이용하므로써 구체적 양상을 분석할 수 있었다.

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3-Hydrogenkwadaphnin Induces Monocytic Differentiation and Enhances Retinoic Acid-mediated Granulocytic Differentiation in NB4 Cell Line

  • Moosavi, Mohammad Amin;Yazdanparast, Razieh;Lotfi, Abbas
    • BMB Reports
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    • 제39권6호
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    • pp.722-729
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    • 2006
  • Recently, we have reported that 3-hydrogenkwadaphnin (3-HK), a diterpene ester isolated from Dendrostellera lessertii (Thymealeaceae), is very effective against leukemia cell lines without any detectable effects on normal cells (Moosavi et al., 2005b). In this study, we report that 3-HK induces $G_1$ cell-cycle arrest, differentiation and apoptosis in APL NB4 cell line. Indeed, the drug between 24 to 96 h induced 7-65% growth inhibition of NB4 cells. Cell viability was also decreased by 2-55% between 24 to 96 h treatments with the drug, respectively. These effects of the drug were also dose-dependent. According to flow cytomtry results, 3-HK (15 nM) induced a significant G1-arrest up to 24 h which was consequently followed with appearance of sub-$G_1$ peak at 72 to 96 h. Hoechst 33258 staining and DNA fragmentation assays confirmed the occurrence of apoptosis among the treated cells. On the other hand, NBT reducing assay, Wright-Giemsa staining, phagocytic activity and expression of cell surface markers (CD11b and CD14) confirmed that the inhibition of proliferation is associated with differentiation especially toward macrophage-like morphology. Interestingly, 3-HK at 5 and 10 nM enhanced the effects of all-trans retinoic acid (ATRA) in NB4 cells. Based on these results, 3-HK might become an ideal candidate for treatment of APL patients pending full exploration of its biological functions.

한국산 간질의 핵형분석 (Karyotype of Fasciola sp. Obtained from Korean Cattle)

  • 이재구;은길수;이상복
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제25권1호
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    • pp.37-44
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    • 1987
  • As a series of systematic classification for Korean common liver fluke, Fasciola sp., karyotype was investigated by means of the modified air-drying technique and of the regular Giemsa staining. Also, C-staining method was applied for detailed karyological analysis from the germ cells of the fluke. The following is a brief summary of the leading facts gained through the experiment. 1. Korean Pasciola sp. was classified into three types based on their chromosomal complements; individuals with 20 or 30 chromosomes and with a 20/30 mosaic constitution. Worms having 30 chromosomes represent a triploid form with 3 sets of 10 basic chromosomes, while those with 20 chromosomes were diploid and mosaic individuals were 2n/3n mixoploid. 2. The frequency of the individual type calculated is as follows; 67.45% of 212 flukes examined was of diploid, 10.85%, triploid, and the rest, 21.7%, mixoploid, respectively. In many cases, two or three types were found in the peculiar bovine host while single type inhabitant was about 20% out of 52 cases. 3. The twenty chromosomes consisted of 1 pair of large metacentrics, 4 pairs of medium-sized subtelocentrics, and 5 pairs of small submetacentrics, while constitution of the thirty chromosomes was nearly interpreted as a triploid form with 3 sets of 10 basic chromosomes. The high centromeric indexes of both types are the first Pairs among all the examined, and 37.93% was of diploid and 47.93%, triploid, respectively. 4. In mixoploid individuals, constitution of the chromosomes of diploid or triploid cells was the same as that of diploid or triploid individuals. 5. All the chromosomes of the germ cells in both types showed C-band around the centromeric region and especially the chromosomes no's 3,7, and 8 showed a remarkable C-band distinguished from other chromosomes. 6. The variance for the sizes of the worms and the eggs were not parallel with three different genotypes in Korean common liver fluke.

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신경교(神經膠) 성상세포(星狀細胞)의 세포자감사(細胞自減死)에 있어서 박하오일의 효과(效果) (Effects of Peppermint Oil on Apoptosis of Astrocytes)

  • 이성률;김태헌;류영수
    • 동의신경정신과학회지
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    • 제10권2호
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    • pp.47-57
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    • 1999
  • Recently, essential oils are used for aromatherapy. Most essential oils are said to be anti-bacterial; some may be anti-viral or anti-fungal. I investigated the effects of peppermint pure essential oil on the heat shock-induced apoptosis in human astrocyte cell line CCF-STTGI. In previous studies, heat shock has been reported to induce the apoptosis or programmed cell death through the activation of caspase-3. We studied the heat shock-induced apoptosis through flow cytometry, DNA electrophoresis, and giemsa staining. Interestingly, these events were inhibited by pretreatment of peppermint pure essential oils in CCF-STTGl cells. Peppermint oil also inhibited the heat shock-induced apoptosis in primary cultured rat astrocytes. In addition, this Peppermint essential oil inhibited the heat shock-induced activation of caspase-3. These results suggest that peppermint pure essential oils may modulate the apoptosis through the activation of the interleukin-I -converting enzyme-like protease.

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Penicillium verruculosum의 종내원형질 융합체의 분리 및 특성 (Isolation and Characterization of Intraspecific Complementing Fusants of Penicillium verruculosum)

  • Chung, Ki-Chul;Park, Chang-Ryeol;Suk Bai;Chun, Soon-Bai;Kim, Ki-Chung
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제16권3호
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    • pp.182-186
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    • 1988
  • 원형질체 융합기술에 의한 Penicillium verruculosum 균주개량 가능성을 검토하였다. 영양요 구변이주간의 원형질 융합체 165주중 cellulase 고생산 융합체로 선별된 6주의 cellulase 활성은 야생주에 비해 2배이상, 모균주에 비해 1.2-4.4배의 증가를 나타냈다. Cellulase 고생산 융합체는 유전적 안정성조사, DNA 함량 및 핵염색 비교검토를 통해 핵융합이 일어난 것으로 확인되었고, 핵형이 이수체이며 4 개월 이상의 계대배양 후에도 자연형질 분리가 거의 일어나지 않는 것으로 보아 이들 융합체의 안정성이 매우 높은 것으로 인정되었다.

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신경교(神經膠) 성상세포(星狀細胞)에서 쥬니퍼오일에 의한 세포자멸사(細胞自滅死)의 억제(抑制) 효과(效果) (Inhibitory Effect of Apoptosis of Human Astrocytes by Juniper Oil)

  • 김태형;김태헌;이성률;류영수
    • 동의신경정신과학회지
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    • 제11권2호
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    • pp.1-9
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    • 2000
  • In previous studies, heat shock has been reported to induce the apoptosis or programmed cell death through the activation of caspase-3. 1 investigated the effect of juniper pure essential oil on the heat shock-induced apoptosis in human astrocyte cell line CCF-STTGI. Treatment of the astrocytes with heat shock markedly induced apoptotic cell death. However, pretreatment of the astrocytes with juniper oil ingibited the heat shock-induced apoptosis. To determine whether juniper inhibits the heat shock-induced activation of these apoptotic proteases, activation of CPP32 was assessed by Western blotting. Consistent with flow cytometry. DNA fragmentation and giemsa staining, heat shock-induced activation of CPP32 was blocked by juniper oil. Poly(ADP-ribose) polymerase (PARP), cysteine protease substrates were fragmented as a consequence of apoptosis by heat shock. Juniper oil inhibited the PARP fragmentation. This juniper oil also inhibited the heat shock-induced activation of caspase-3. These results suggest that juniper oil may modulate the apoptosis through the activation of the interleukin-1-converting enzyme-like protease.

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신경교(神經膠) 성상세포(星狀細胞)에서 레몬오일에 의한 세포자멸사(細胞自滅死)의 억제효과(抑制效果) (Inhibitory Effect of Lemon Oil on Apoptosis in Astrocytes)

  • 김준한;김태헌
    • 동의신경정신과학회지
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    • 제11권1호
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    • pp.37-46
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    • 2000
  • We investigated the effects of lemon pure essential oils on the heat shock-induced apoptosis in human astrocyte cell line CCF-STTG1. In previous studies, hear shock has been reported to induce the apoptosis or programmed cell death through the activation of caspase-3. Treatment of CCF-STTG1 cells with heat shock markedly induced apoptotic cell death as determined by flow cytometry. Interestingly, pretreatment of CCF-STTG1 cells with lemon pure essential oils inhibited the heat shock-induced apoptosis. Lemon also inhibited the heat shock-induced apoptosis in primary cultured rat astrocytes. To determine whether lemon inhibits the heat shock-induced activation of these apoptotic proteases, activation of CPP32 was assessed by Western blotting. Consistent with flow cytometry, DNA fragmentation and giemsa staining, heat shock-induced activation of CPP32 was blocked by lemon pure essential oil. PARP, cysteine protease substrates were fragmented as a consequence of apoptosis by heat shock. Lemon oil inhibited the PARP fragmentation. This essential oil also inhibited the heat shock-induced activation of caspase-3. These results suggest that lemon pure essential oils may modulate the apoptosis through the activation of the ICE-like caspases.

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