말라리아의 진단 방법으로 흔히 사용되고 있는 Giemsa 염색법과 형광염색법중 Acridine orange(AO) 염색법을 비교하였다. 말라리아 환자의 혈액을 채취하여 Giemsa와 AO로 염색하여 각각 광학현미경 및 형광현미경으로 관찰하였다. AO 염색법은 Giemsa 염색법에 비해 저배율에서도 쉽게 말라리아 원충을 찾을 수 있어 빠르고 정확한 말라리아의 진단을 위해 Acridineorange 염색법이 더 효과적이라고 생각된다.
Giemsa C-banding analysis with Korean rye strain revealed that individual chromosomes had characteristic banding patterns making it possible to distinguish the seven rye chromosomes one from another. It seems to be evident that B-chromosomes in rye contain proportionally more heterochromatin than autosomes.
The application of Giemsa technique to stain compressed diaphragm samples obtained from rodents experimentally infected with Trichinella spiralis is described. Diaphragm samples from rats heavily infected with 20 muscle larvae per gram of body weight(20 ML/gbw) were cut into several pieces and stained with Giemsa; on the other hand, whole diaphragms from slightly infected mice(1 ML/gbw) were also stained with Giemsa. Besides, muscle samples were also stained with Giemsa. Observation at 10 $\times$ magnification revealed that both ML and nurse cells(NC) look as bluish structures clearly contrasting with the pinkish color of the non-infected muscle fibers. NC in the diaphragms of mice could be easily observed at naked eye as blue points contrasting with the pink surrounding areas formed by the non-infected muscle fibers. Among NC observed in the diaphragms of rats infected with 20 ML/gbw, 4.4% was multiple infection. These findings were confirmed in sectioned and hematoxylin-eosin stained specimens. This data could be usefulness for a rapid diagnosis of trichinellosis in post-mortem mammals without magnification procedures.
Giemsa C-banding방법으로 한국 재래종 찰옥수수의 핵형 및 염색체 상에 존재하는 knob의 수와 위치 등을 확인하고 모식도를 통하여 염색체의 특성을 나타내고자 재래종 찰옥수수 5개의 자식 계통 (inbred stock)을 조사하였다. knob의 수는 6-12개이었고 평균 9.2개이었으며 계통별로 차이가 있었으며, knob을 가지고 있는 염색체도계통별로 차이가 있었다. YS-1의 경우 6번, 7번, 8번 그리고 9번 염색체에서 knob을 가지고 있었는데, MY-1의경우 1번, 2번, 3번, 6번, 「번 그리고 9번 염색체에서 knob을 가지고 있었다. 염색체의 장완과 단완의 비율, 염색체의 상대적 길이 등을 비교해 보기 위하여 YS-1과 MY-1 두 계통을 조사해 본 결과 두 계통 간에 차이가 있었고, 염색체의 상대적 길이는 YS-1이 큰 것으로 나타났다. Giemsa C-banding법은 재래종 찰옥수수의 계통별 특성과 이를 이용한 계통 분류에도 효과적으로 이용할 수 있을 것으로 생각된다.
Giemsa C-banding 방법에 의하여 한국 재래종 옥수수 핵형 및 염색체의 특성을 알아보고자 옥수수의 근단 생장점을 이용하여 조사 분석하였다. 이 방법은 한국 재래종 옥수수의 핵형 분석 및 염색체의 특성 연구에도 효과적으로 활용할 수 있는 방법임이 확인되었다. 조사된 재래종 옥수수에서는 각각 10개의 heterochrornatic knob이 발견되었으며 이것들의 크기와 위치는 계통별로 다른 것으로 나타났고, 모두가 6번 염색체에 부수체를 가지고 있었다. 10번 염색체를 100으로 해서 비교해 본 각 염색체들의 상대적 길이는 조사된 계통별로 큰 차이가 있었다.
본 연구에서는 배양된 액체종균의 세균 오염 여부를 Giemsa 용액의 단일 염색으로 짧은 시간 안에 정확하게 판정이 가능한지를 조사하였다. Giemsa 용액은 혈액 골수 림프절 말라리아 원충 리케차 세포 등을 염색하는 것으로, 염기성 색소인 methylene azul과 methylene blue, 그리고 산성색소인 eosine을 methyl alcohol-glycerine에 녹여서 제조하였다. 그리고 팽이 액체종균의 폭기 배양액 분취하여 슬라이드에 올리고 Gimesa 용액으로 염색한 후 광학 현미경으로 검사하였다. 이 결과 40~60초 동안의 세균세포를 (팽나무)버섯(류) 균사세포의 부스러기나 잔존 대두박 등과 구별할 수 있었다. 이 Gimesa 용액을 이용한 염색 및 검경방법은 빠르고 간편하며 정확하므로 액체종균을 사용하는 버섯재배 농가에서도 세균 오염을 효과적으로 동정(감지)하는데 이용할 수 있다고 생각한다.
A technique is described for producing high resolution G- and R-banded chromosomes in human peripheral lymphocyte cultures. Cultured lymphocyte cells were exposed to ethidium bromide ($10{\mu}g/ml$) and colcemid ($0.02{\mu}g/ml$) each for 2.5h and 0.5h prior to harvest for high resolution G-banded chromosomes. High resolution R-band patterns were obtained by BrdU substitution which was revealed by the fluorochrome-photolysis-Giemsa staining technique. These methods are easy to perform and highly reliable. The data on relative length of chromosomes at the four mitotic stages are presented in units of percentage of haploid autosome length. The characteristic patterns of GTG-bands (G-bands after trypsin and Giemsa) and RBG bands (R-bands after BrdU and Giemsa) were analyzed.
방사선에 의해 유도되는 사람 말초혈액 림프구 미소핵 관찰빈도를 높이면서 생물학적 선량평가법으로서 활용 가능성을 확인하고자 본 연구를 수행하였다. 우선 5명의 건강한 사람으로부터 혈액을 제공 받아 선량영역을 0에서 800cGy로 하여 감마선$(^{137}Cs)$을 조사 한 후 김사와 아크리딘 오렌지 형광 염색하고 미소핵 출현빈도를 비교하였다. 아크리딘 오렌지 염색법을 이용하여 미소핵을 관찰하였을 때, 김사 염색법에 비교하여 적갈색의 비특이성 과립과 녹황색의 DNA가 붉은색의 세포질을 배경으로 명확히 구별되었을 뿐만 아니라 선량이 증가하면서 검출율도 높았다. 아울러, 말초혈액 T와 B-림프구에 대하여 선량영역을 0에서 50cGy로 하여 방사선을 조사한 후 미소핵 출현빈도를 아크리딘 오렌지 염색하여 김사염색과 비교한 바, B-림프구에서 선량이 증가하면서 적어도 2배 이상 높게 관찰되었다. 본 실험 결과, 사람 말초 혈액 B-림프구를 대상으로 한 아크리딘 오렌지 형광염색 미소핵 분석법은 저선량 방사선 인체영향 평가나 과피폭 선량추정시 활용이 가능 할 것으로 생각된다.
On the basis of karyotypic analysis performed by conventional staining and Giemas C-banding technique, cytological relationship was inferred for 21 lines of Paeonia lactiflora Pal. cultivated in Korea. It was very difficult to infer their organized karyotypic classification system using the composition of somatic chromosomes involving sat-chromosomes, relative length of chromosomes, arm ratio and karyotypic formulae by conventional staining. From the distribution and number of Giemsa C-bands on the chromosomes b and c, 21 lines can be subclassified into 5 groups. It seems that the karyotypic polymorphism is observed in 21 lines of cultivated P. lactiflora because peony mainly propagates by outbreeding.
This paper describes the design and implementation of personal computer assisted karyotyping system of Giemsa stained chromosomes. The system consists of an Image Acquisition Module being capable of $256 {\times} 256$ pixels and its relevent software modules optimized for karyotyping. The results of karyotyping using this system with an image of chromosomes taken from the Rana Amurensis are acceptable. As a result of this study we can save our load oweing to the conventional hand- karyotyping and the high-cost computer.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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